СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЖИРОВОЙ БОЛЕЗНИ ПЕЧЕНИ

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики жировой болезни печени.
Способ заключается в том, что 0,25мл сыворотки крови заливают в пробирку, добавляют 5мл хлороформ-метанольной смеси (2:1) и взбалтывают в течение 10 мин. Далее фильтруют, добавляют 0,5мл дистиллированной воды и центрифугируют в течение 10 мин. Хлороформный экстракт отделяют, выпаривают досуха, добавляют 2мл абсолютного метанола и 1 каплей концентрированной серной кислоты метилируют в течение 30 мин. Затем дважды экстрагируют смесью эфира с гексаном (1:1), экстракт промывают водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и удаляют растворитель. Остаток растворяют в 0,2мл этилового спирта. Далее проводят газохроматографическое исследование и определяют содержание высших жирных кислот.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики жировой болезни печени.
Известно, что в условиях гиперинсулинемии в жировой ткани нарастает липолиз с высвобождением большого количества свободных жирных кислот в печени, снижение скорости окисления которых, приводит к отложению триглицеридов в гепатоцитах, что способствует развитию ее жировой болезни. При жировой болезни печени повышается активность гаммаглутамилтрансферазы, а также щелочной фосфатазы в два раза.
Известна диагностика жировой болезни печени [1], включающая выполнение биохимического анализа крови и выявляющая поражения печени.
Данный способ не позволяет определять степень жировой инфильтрации печени, является затратным и его выполнение занимает много времени, что не выгодно в клинических условиях.
Известен другой подход диагностики жировой болезни печени [2], который основывается на изучении биопсии печени.
Данный способ не позволяет конкретно определять степень участия насыщенных и ненасыщенных жирных кислот.
В качестве прототипа выбран диагноз жировой болезни печени [3], включающий исследование количества липидов в сыворотке крови, проведение пункционной биопсии печени и анализ биоптата с целью определения количество накапливающихся липидов.
Недостатками прототипа можно считать следующее:
Во-первых, конкретно не определяется содержание накопившихся высших жирных кислот в сыворотке крови у больных с жировой болезнью печени.
Во-вторых, не определяется количество отложившихся триглицеридов в гепатоцитах и из каких высших жирных кислот они состоят.
Целью изобретения является разработка не
трудоемкого и не требующего больших затрат способа диагностики жировой болезни печени, позволяющего более точно и информативно определять высшие жирные кислоты.
Сущность способа заключается в том, что газохроматографическим методом устанавливают содержание высших жирных кислот в сыворотке крови, а именно в пробирку заливают 0,25 мл сыворотки крови, добавляют 5 мл хлороформметанольную смесь в соотношении 2:1 и взбалтывают в течение 10 минут. Далее фильтруют и после добавления 0,5мл дистиллированной воды смесь центрифугируют в течение 10 мин. После чего хлороформный экстракт отделяют и выпаривают досуха. Затем в содержимое колбы добавляют 2мл абсолютного метанола и одной каплей концентрированной серной кислоты метилируют в течение 30 минут. Гидролизат дважды экстрагируют смесью эфира с гексаном в соотношении 1:1. Эфиргексановый экстракт промывают водой и сушат над сульфатом натрия. Затем экстракт фильтруют и после удаление растворителя, остаток растворяют в 0,2 мл этилового спирта и хроматографируют. На основе результатов газохроматографического исследования определяют содержание высших жирных кислот.
Пример. Больная Л.М., 53 лет, обратился в клинику с жалобой на боли с правой стороны в подреберной области. При обследовании выявлено, что размер печени увеличена. После исследования с применением заявленного способа поставлен диагноз жировая болезнь печени
Способ позволяет определять количество жирных кислот в крови за короткое время и может быть использован в качестве прогностического теста для эффективного лечения заболеваний печени.
Предлагаемый способ является точным и более эффективным по сравнению с существующими. Преимущество способа – это доступность реактивов.

1. В.Т. Ивашкин, О.М.Дропкина, Ю.О. Шульпекова. Диагностика и лечение неалкогольной жировой болезни печени (Методические рекомендации)-М. ООО «Издательский дом» М-Вести, 2009-20с.
2. Donnlly K.L., Smith C.J. at al. Sources of fatty acids storet liver and secreted via lipoproteins in patients with nonalcoholic fatty liver discase //J.clin. Jnvest. -2005.- 115,1343-51.
3. С.Д.Подымова. Жировой гепатоз. Неалкогольной стеатогепатит (эволюция представлений о