СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-[2-(4-ФТОР-ФЕНИЛ)-1-МЕТИЛ]-ЭТИЛ-N-МЕТИЛ-N-ПРОПИНИЛ-АМИНА

Изобретение касается аминов, в частности способа получения N-[2-(4-фтор-фенил)-1-метил]-этил-N-метил-N-пропиниламина или его фармакологически приемлемых солей в виде рацемата или оптически активного изомера, обладающих антидепрессивной актив-ностью, что может быть использовано в медицине. Цель изобретения - создание новых более активных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией п-фторфенилацетона с амином формулы HNR1R2, где R1 - H или пропинил, R2 - H или ме-тил. Полученный кетимин или оксиамин восстанавливают и в случае, если R1 - H, его пропинилируют и, если R2 - H, его метилируют. Целевой продукт выделяют в виде сво-бодного основания или фармакологически приемлемой соли в форме рацемата или опти-чески активного изомера. Испытания показывают, что новые соединения являются очень активными селективными ингибиторами моноаминоксидазы типа В и ингибиторами по-глощения тирамина и биогенных аминов. 5 табл.

Изобретение относится к способу получения нового соединения - N-[2-(4-фторфенил)-1-метил]-этил-N-метил-N-пропиниламина (ПФФ), и его фармакологически приемлемых солей.
Указанные соединения, которые получают в форме рацемата или оптически актив-ного изомера, обладают антидепрессивным действием, являясь при этом ингибитором поглощения биогенных аминов, и в силу указанных свойств могут найти применение в медицине.
Цель изобретения - выявление в ряду N-фенилизопропилалкиламинов новых соеди-нений, обладающих более высокой антидепрессивной активностью в сочетании с избира-тельным ингибирующим МАО-В эффект действием.
Пример 1. В 55 мл 96%-ного этанола растворяют 10 г (0,065 моль) 4-фторфенилацетона и 5,3 г (0,097 моль) пропаргиламина. Раствор перемешивают в течение 0,5 ч при 600С, после чего добавляют 1,75 г алюминиевой фольги, активированной хло-ристой ртутью. Реакционную смесь оставляют на ночь, после чего добавляют 15 мл 40%-ного раствора гидроокиси натрия, спирт отгоняют и остаток экстрагируют бензолом. Бен-зольный раствор экстрагируют 10%-ной соляной кислотой, водно-кислотную фазу под-щелачивают и экстрагируют бензолом. После высушивания бензольную фазу выпарива-ют и остаток перегоняют под вакуумом. Таким образом, получают 4,9 г ( )-N-метил-N-пропинил-[2-(4-фторфенил)-1-метил]-этиламина, выход 36%,
Т.кип. 134-1400С/17 мм рт.ст., = 1,5031.
В 25 мл ацетона растворяют 4 г вышеуказанного соединения, после чего добавляют 4 г карбоната калия и 4 г йодистого метила. Реакционную смесь кипятят с обратным хо-лодильником в течение 2 ч, фильтруют и выпаривают. Остаток растворяют в 10%-ной соляной кислоте, фильтруют, подщелачивают 40%-ным раствором гидроокиси натрия и экстрагируют толуолом. После высушивания толуольный раствор подкисляют этаноль-ным раствором хлористого водорода, выпадающий в осадок продукт реакции фильтруют и высушивают. Таким образом, получают 3,1 г хлоргидрата ()-N-метил-N-пропинил-[2-(4-фторфенил)-1-метил]-этиламина с т.пл. 131-1330С.
Пример 2. В 60 мл 96%-ного этанола растворяют 10 г 4-фторфенилацетона и 6,9 г N-метил-пропаргиламина. К смеси добавляют 1,8 г алюминиевого листа, активированного хлористой ртутью, при 600С, смесь перемешивают в течение 10 ч, фильтруют и выпари-вают. Остаток растворяют в 10%-ной соляной кислоте и экстрагируют бензолом. Водный слой подщелачивают и экстрагируют бензолом, после чего бензольный экстракт высуши-вают и выпаривают. Остаток перегоняют под вакуумом. Получают 5,1 г ()-N-метил-N-(2-(пропинил)-[2-(4-фторфе-нил)-1-метил]-этиламина; Т.кип.120-1230С/2 мм рт.ст.; = 1,5058.
Пример 3. 50 см3 31,1%-ного раствора метиламина в метаноле и 15,2 г (0,1 моль) 4-фторофенилацетона смешивают с одновременным охлаждением. Добавляют 6,8 г палла-дированного древесного угля, после чего смесь нагревают до 400С. Реакцию проводят в течение 4 ч под давлением 10 бар. Полученный раствор отфильтровывают в вакууме. Осадок растворяют в 50 см3 бензола и заливают в 30 мл хлористоводородной кислоты. Водную фазу подщелачивают и экстрагируют бензолом. После высушивания бензол вы-паривают, а осадок дистиллируют в вакууме.
В результате получают 13,6 г N-метил-[2-(4-фтор-фенил)-1-метил]-этиламина, выход 81,4%, Т.кип. 87-890С; = 1,4922.
Пример 4. 1,53 г (0,00916 моль) ()-N-метил-[2-(4-фторфенил)-1-метил]-этиламина и 1,46 г (0,00973 моль) D-винной кислоты растворяют в 15 мл этанола. Смесь охлаждают до -100С и оставляют на 6-8 ч для кристаллизации. Кристаллическое вещество отфильтровы-вают и промывают холодным этанолом, В результате получают 1,15 г соли, Т.пл. 88-940С.
0,5 г полученной соли диспергируют в 3,2 мл воды, добавляют 1,3 мл 10%-ного раствора гидроокиси натрия, после чего смесь экстрагируют эфиром. Объединенную органиче-скую фазу высушивают на безводном сульфате натрия и выпаривают.Получают вещество (-)-N-метил-[2-(4-фтор-фенил)-1-метил]-этиламин. = -0,6320 (этанол), = 3,44.
Пример 5. 7,4 г (0,0443 моль) (-) N-метил -[2-(4-фтор-фенил)-1-метил]-этиламина = -3,440 ( этанол)) растворяют в 60 мл ацетона, добавляют 28,9 г (0,21 моль) карбоната калия, а затем по каплям при перемешивании добавляют 60%-ный рас-твор 7,56 г (0,045 моль) пропаргилбромида в толуоле. Реакционную смесь перемешивают в течение 3-4 ч при 35-400С,отфи-льтровывают, промывают ацетоном и фильтрат выпа-ривают. Осадок дистиллируют при 2 мм рт.ст. В результате получают 3,3 г (-)-N-метил-N-пропинил-[2-(4-фтор-фенил)-1-метил]-этиламина; Т.пл.120-1220С, = 1,5052. Гидро-хлорид плавится при 169-1790С. =-6,2 0(этанол, С = 2,4); = 10,98 (вода,С = 2,9).
Синтезированное в результате предлагаемого способа соединение было испытано на фармакологическую активность.
Использованы следующие обозначения:
пфф - //-N-метил-N-пропинил-2-(4-фторфенилметил) этиламин хлористоводород-ный;
пфф - //-N-метил-N-пропинил-2-(4-фторфенилметил) этиламин хлористоводород-ный;
рСlФ - //-N-метил-N-пропинил-2-(4-хлорфенилметил) этиламин хлористоводород-ный;
пBrФ - //-N-метил-N-пропинил-2-(4-бромфенилметил) этиламин хлористоводород-ный;
дезметил -пфф - N-пропинил-2-(4-фторфенилметил) этиламин.
Моноаминоксидаза (МАО) ингибиторная активность.
Опыты in vitro на не содержащем ядер гомогенате крысиного мозга и печени.
Субстраты: МАО-В: 14С-ФЭА (фенэтиламин) 0,2 мМ; специфическая активность 0,5  Ci/мл; МАО-А: 14С-5НТ (3 Н-5 -окситринтамин) 5,0 мМ; специфическая активность 0,25  Сi/мл.
Результаты приведены в табл.1.

Таблица 1


Доза

Орган
-пфф
пфф
псlФ
пВrФ

ИК50 (М)
МАО-В (М)


Мозг
Печень
Печень
4,57х10-8
1,98х10-8
238,38
4,17х10-8
1,19х10-8
580,67
1,48х10-7
1х10-7
43,47
3,98х10-7
1,64х10-7
51,28


Показатель селективности =
Вывод: пфф является более активным и более селективным ингибитором МАО типа В, чем пСlФ и пBrФ, при испытании in vitro на гомогенате крысиного мозга и печени.
Опыты in vitro на митохондриях крысиного мозга.
Метод. Из мозга крыс-самцов СРУ массой 200-250 г готовят митохондрии следую-щим образом. После обезглавливания готовят гомогенат ткани в 0,25 М сахарозе. Раствор центрифугируют в течение 10 мин при 1000 g, и всплывший на поверхность слой про-должают центрифугировать в течение еще 15 мин при 9000 g и осадок растворяют в 0.25 М сахарозе.
Субстраты: МАО-А: 6х10-4 М 5НТ; МАО-В: 2х10-5 М ФЭА..
Результаты значения ИК50(М) соединения пфф: МАО-А: 5х10-5; МАО-В: 3х10-8.
Вывод: пфф проявляет себя как очень активный и селективный ингибитор МАО типа В при испытании in vitro на митохондриях крысиного мозга.
Опыты in vitro на не содержащем ядер гомогенате крысиного мозга и печени.
Метод. Крысы получают подкожно различные дозы вещества, спустя 4 ч после вве-дения вещества органы отрезают и определяют активность.
Результаты приведены в табл.2.
Таблица 2

Доза Орган -пфф пфф пBrФ
ИК50
МАО-В,
мг/кг
Индекс
селективности Мозг

Печень

Печень 0,104

0,770

148,8 0,076

0,292

168,8 5,61

8,85

13,33

Индекс селективности =
После обработки в течение 21 дня соединением пфф (дневная доза 0,25 мг/кг под-кожно) МАО-В ингибирование составляет 92-94% (выражено в прцентах от контроль-ных), а МАО-А ингибирование равно 0%.
Вывод: пфф является селективным МАО-В ингибитором in vivo у крыс и более ак-тивен, чем пВrФ.
Определение МАО-В активности in vivo у кошки путем измерения изменений эф-фекта внутривенно введенного фенилэтиламина (ФЭА).
Метод. ФЭА выделяет норадренолин из терминалов нервов мигающей мембраны в количестве, зависящем от дозы. Поскольку ФЭА является специфическим субстратом для МАО-В в печени, селективные ингибиторы этого фермента усиливают действие ФЭА, как показывают сдвиг влево кривой ответа на дозу после введения МАО-В ингибитора.
Результаты: пфф при дозе 0,1 - 0,25 мг/кг значительно усиливает эффект ФЭА в этом опыте и сдвигает влево кривые ответа на дозу.
Вывод: пфф является очень активным селективным ингибитором МАО-В in vivo у кошки.
Повышение индуцированного ФЭА стереотипного поведения.
Результаты приведены в табл.3.
Таблица 3


Соединение

мг/кг
Максимальный счет
Суммарный счет

Контрольное
пфф
-
0,25
0,1
0,05
0,50,22
2,170,31
1,670,21
1,00,37
1,170,548
8,170,87
5,670,49
2,831,01









Ингибирование метаболизма 14С-ФЭА in vitro в мозговой ткани (табл.4).

Таблица 4


Концентрация лекарства (М)

пфф
Дезметил-пфф
10-8
10-7
2,5х10-7
5х10-7
7,5х10-7
10-6
2,5х10-6
5х10-6
7,5х10-6
10-5
5х10-5
10-4
10-3 28,980,79
87,490,41
-
-
-
92,150,31
-
-
-
100,0
-
-
- 5,490,96
9,620,49
16,730,76
29,450,50
38,410,52
47,430,81
68,910,14
79,340,36
82,240,27
85,460,57
91,210,19
93,680,15
99,620,22



Вывод: МАО тип В ингибирующая активность дезметил-пфф в 100 раз меньше ак-тивности пфф.
Ингибирующая поглощение тирамина активность.
Опыты из легочной артерии кроликов.
Метод. Для экспериментов применены кролики обоих полов массой 2-4 кг. Живот-ные убиты ударом в шею, и сразу же сердце изъято и помещено в насыщенный кислоро-дом раствор Кребса.
Состав раствора Кребса, ммоль/л: NaCl 111; KCl 4,7; СаСl2 2,52; MgSO4 1,64; NaHCO3 25; KH2PO4 1,2; глюкоза 11. Кровеносный сосуд очищен от соединительной тка-ни, из ткани вырезана спираль шириной 1,5 мм. Полученный таким образом сегмент кро-веносного сосуда помещен в баню емкостью 5 мл, содержащую раствор Кребса,через ко-торый пропускают газовую смесь, состоящую из 95% О2 + 5% СО2, при постоянной тем-пературе (370С). Механическую активность регистрируют на полуизометрическом ком-сенсографе с предварительной нагрузкой 1 г.
Результат: поглощение тирамина ингибировано на вышеописанном препарате со-единением -пфф в зависимости от дозы ИД50 = 4,5х10-5 М, при этом соединения -пСlФ и -пВrФ не проявляют ингибирующего действия.
Вывод: -пфф ингибирует поглощение тирамина в терминалы норадренергетическо-го нерва в полоске легочной артении кролика , тогда как -пСlФ и -пВrФ не оказывают этого действия.
Тот факт, что пфф является ингибитором поглощения тирамина, согласуется с ре-зультатами других опытов. Однако аналог дезметил-пфф, отличающийся только отсут-ствием одной метильной группы на альфа-углероде, является агентом, способствующим выделению норадренолина, и это действие ингибируется пфф. Это показывает, что раз-личное строение требуется для ингибирующей активности к поглощению тирамина по сравнению с селективной МАО типа В ингибирующей активностью (вещество В являет-ся активным и селективным ингибитором МАО типа В. хотя и менее активным, чем пфф, как показано выше).
Ингибирование поглощения биогенных аминов (см.табл.5).
Таблица 5

Лиганд
Концентрация ли-ганда
(М)

Участок
пфф
ИК50
(М)


Na*
5НТ**
ДА

5х10-8
1х10-7
1х10-7
Гипоталам
Гиппокамп
Полосатое тело
8х10-6
6х10-4
2х10-7

* Na: 3Н - норадреналин;
**5НТ: 3Н-5 - окситриптамин.
Благодаря такому высокому специфическому спектру фармакологической активно-сти пфф может быть использован в качестве антидепрессанта путем противодействия свя-занному с возрастом ослаблению функции чернополосатого допаминэргического нейро-на, кроме того, улучшается “качество жизни” старых людей.

Патент Швейцарии № 524568, кл. С 07 С 87/28, 1972; Патент США № 3485874, кл. 260-570.8, 1969.