9-О-ОКСИМОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ЭРИТРОМИЦИНА А И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ

В изобретении описаны соединения формулы (I),

где А, R1, R2, M, n, m и r имеют значения, указанные в описании, способы их получения и фармацевтические композиции, содержащие их в качестве действующих веществ. Соединения формулы (I) пригодны для лечения инфекционных заболеваний.

Настоящее изобретение относится к производным эритромицина А, обладающим антибиотической активностью, пригодным для лечения инфекционных заболеваний, в частности изобретение относится к производным 9-[O-(аминоалкил)оксима] эритромицина А, обладающим антибиотической активностью по отношению к грамположительным и грамотрицательным микроорганизмам.
Эритромицин А [The Merck Index, XI изд., № 3626] представляет собой хорошо известный, встречающийся в естественных условиях макро-лид, который обладает антибиотической активностью и который имеет следующую структуру


Помимо активности по отношению к некоторым микроорганизмам, не относящимся к бактериям, таким, как риккетсии и микоплазмы, эритромицин А обладает антибактериальной активностью в основном по отношению к грам-положительным микроорганизмам, таким, как стрептококки, стафилококки и пневмококки, но он также проявляет эффективность по отношению к некоторым грамотрицательным микроор-ганизмам, таким, как, например, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae и Bordetella pertussis.
Помимо хорошо известной активности по отношению к вышеуказанным прокариотам по появившимся недавно литературным данным эритромицин А и другие антибиотики из класса макролидов обладают активностью по отноше-нию к эукариотичным паразитам [Р.А. Lartey и др., Advances in Pharmacology, 28, 307-343 (1994)].
По отношению к эритромицину А, равно как и по отношению к другим антибактериальным лекарствам, у некоторых штаммов бактерий наблюдали явление устойчивости. В частности это явление наблюдали при продолжительном применении эритромицина А при лечении инфекций, вызванных стафилококками [А. Kucers и N МсК. Вennett, The use of antibiotics, А compre-hensive Review with Clinical Emphasis, William Heinemann Medical, IV изд., (1987) 851-882].
Интерес к антибиотикам из класса макролидов обусловлен возможностью их применения в клинической терапии и ветеринарии при лечении некоторых инфекционных болезней, таких, как, например, инфекционные заболевания ды-хательных путей, желудочно-кишечного тракта, мочеполовых путей и наружных органов, таких, как кожа, глаза и уши.
Вследствие своей низкой стабильности в кислой среде эритромицин А необратимо пре-вращается, например, в желудочно-кишечном тракте при оральном введении, в производное, лишенное антибиотической активности, что определяет плохую биологическую доступность действующего вещества [Н. А. Кirst, Annual Reports in Medical Chemistry, 25,119-128 (1989)].
Для преодоления вышеуказанных недостатков исследование было направлено на со-единения, которые, сохраняя хорошие антибио-тические свойства эритромицина А, характери-зовались бы более высокой стабильностью по отношению к кислотам и лучшими фармакоки-нетическими свойствами, такими, как, например, более высокая биологическая доступность при оральном введении, концентрация в крови, спо-собность проникать в ткани и период полураспада.
В качестве примера в данной области тех-ники можно привести карбаматы и карбонаты эритромицина А или 9-О-оксима эритромицина А, описанные в заявках на европейский патент 0216169 и 0284203 (обе на имя Beecham Group PLC, а также соединения, описанные в европейской заявке 0033255 (фирма Roussel-Uclaf).
В европейской заявке 0033255, в частности, описаны 9-О-оксимовые производные эритроми-цина А формулы
R-A-0-N = Ery
где
Ery обозначает остаток эритромицина А, в котором оксимовая группа (-N = Ery) замещает карбонильную группу в положении 9 (O = Ery); А обозначает прямую или разветвленную алкиль-ную группу с 1-6 атомами углерода; R обозна-чает, в частности, необязательно замещенную алкоксигруппу с 1-6 атомами углерода или группу [-N(R1)R2], в которой R1 и R2 имеют оди-наковые или различные значения и обозначают атом водорода или необязательно замещенную алкильную группу с 1-6 атомами углерода.
Соединения, описанные в заявке на евро-пейский патент 0033255, такие, как, например, 9-[O-[(2-метоксиэтокси)метил]оксим] эритромици-на А, известный под международным незапатен-тованным названием рокситромицин [The Merck Index, XI изд., № 8253], 9-[O-[(2-диметиламино)этил]оксим] эритромицина А и 9- [O-[(2-диэтиламино)этил]оксим] эритромицина А, обладают спектром активности in vitro, сопо-ставимым с таковым эритромицина А, но обла-дают более высокой стабильностью по отноше-нию к кислотам и лучшими фармакокинетиче-скими свойствами. Указанные соединения, сле-довательно, проявляют антибиотическую актив-ность по отношению к грамположительным мик-роорганизмам, таким, как стафилококки, стреп-тококки и пневмококки, и по отношению к неко-торым грамотрицательным микроорганизмам, таким, как, например, Haemophilus influenzae и Haemophilus pertussis.
Согласно настоящему изобретению были обнаружены соединения, являющиеся 9-О-оксимовыми производными эритромицина А, в частности соединения, представляющие собой производные 9-[O-(аминоалкил)оксима] эритро-мицина А, частично подпадающие под объем, но не приведенные в качестве примера в европей-ской заявке 0033255, которые обладают более широким спектром антибактериальной активно-сти по отношению к грамположительным микро-организмам, прежде всего по отношению к гра-мотрицательным микроорганизмам, и улучшен-ными фармакокинетическими свойствами, таки-ми, как, например, большая продолжительность действия и больший период полураспада при элиминации в тканях по сравнению с соединени-ями, описанными в вышеуказанной европейской заявке.
Таким образом, предметом настоящего изобретения являются соединения формулы

где
А обозначает фенильную группу или гетероцикл с 5 или 6 членами, содержащий один или не-сколько гетероатомов, выбранных из азота, кис-лорода и серы, необязательно замещенный 1-3 одинаковыми или различными группами, вы-бранными из прямых или разветвленных (С1-С4)алкильных или алкоксигрупп, (С1-С2)алкилен-диоксигрупп, (С1-С4)алкилсульфонильных групп, фенильной, фенокси-, гидрокси-, карбокси-, нит-рогруппы, галогена и трифторметильной груп-пы;
R1 и R2 имеют одинаковые или различные значе-ния и обозначают атом водорода или прямые либо разветвленные (С1-С4)алкильные группы;
n равно 1 или 2;
m равно целому числу от 1 до 8 включительно;
r равно целому числу от 2 до 6 включительно;
М обозначает группу формулы


где
R3 обозначает атом водорода или метильную группу;
и их фармацевтически приемлемые соли.
Оксимы формулы (I) могут иметь Z- или Е-конфигурацию.
Таким образом, предметом настоящего изобретения являются соединения формулы (I), имеющие Z- или Е-конфигурацию, причем пред-почтительны последние.
Соединения формулы (I) проявляют анти-биотическую активность и характеризуются высокой стабильностью по отношению к кисло-там и хорошими фармакокинетическими свой-ствами, что позволяет применять их в терапии человека или в ветеринарии для лечения некото-рых инфекционных заболеваний, таких, как, например, заболевания центральной нервной системы, верхних и нижних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, мочеполовых путей, зубной ткани и наружных органов, таких, как кожа, глаза и уши. В настоящем описании, если не указано иное, под понятием (С1-С4)алкильная группа понимают прямую или разветвленную (С1-С4)алкильную группу, такую, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втoр-бутил и трет-бутил; под поняти-ем (С1-С4)алкоксигруппа понимают прямую или разветвленную (С1-С4)алкоксигруппу, такую, как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втер-бутокси и трет-бутокси; под понятием (С1-С2) алкилендиоксиг-руппа понимают метилендиокси- или этиленди-оксигруппу.
Под понятием гетероцикл с 5 или 6 членами, содержащий один или несколько гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, понима-ют гетероцикл, предпочтительно выбранный из пиридина, пиррола, пирролидина, фурана, тет-рагидрофурана и тиофена.
Предпочтительными соединениями являют-ся соединения формулы (I), в которых А обозна-чает фенильную группу или гетероцикл, вы-бранный из пиридина и фурана, необязательно замещенный 1-3 группами, выбранными из гид-рокси-, метокси-, метилендиокси-, н-бутокси-, феноксигрупп, фенила, метилсульфонила, нитро-группы, галогена и трифторметила; R1 и R2 име-ют одинаковые значения и обозначают атом водорода или метильную группу; R3 обозначает атом водорода.
Еще более предпочтительными соединени-ями являются соединения формулы (I), в которых А обозначает фенильную группу, необязательно замещенную группой, выбранной из феноксиг-руппы, нитрогруппы и трифторметила; R1 и R2 имеют одинаковые значения и обозначают атом водорода или метильную группу; n равно 1; m равно 6; r равно 2; R3 обозначает атом водорода.
Фармацевтически приемлемые соли соеди-нений формулы (I) представляют собой соли органических или неорганических кислот, таких, как, например, соляная, бромистоводородная, йодистоводородная, азотная, серная, фосфорная, уксусная, винная, лимонная, бензойная, янтар-ная иглутаровая кислота.
Конкретными примерами предпочтитель-ных соединений формулы (I) являются:
(Е)-9-[O-[2-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]этил] оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[2-(фенилметиламино)этил-амино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[6-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]гексил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[6-[3-(фенилметиламино)пропил-амино]гексил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[6-[5-(фенилметиламино)пентил-амино]гексил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[О-[2-[8-(фенилметиламино)октил-амино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[О-[2-[5-(фенилметиламино)пентил-амино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[О-[5-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]пентил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[О-[3-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]пропил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[3-[4-(фенилметиламино)бутил-амино]пропил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[N-метил-6-(N’-метил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(бифенил-4-ил)метиламино] гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-феноксифенил)метилами-но]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-феноксифенил)метил-амино]гексиламино]этил]оксим]эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-(2-фурилметиламино)гексил-амино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-(3-пиридилметиламино)гек-силамино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-метоксифенил)метил-амино]гексиламино]этил]оксим]эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-н-бутоксифенил)метил-амино]гексиламино]этил]оксим]эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3,4-метилендиоксифенил) метиламино]гексиламино]этил]оксим] эритро-мицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-метилсульфонилфенил) ме-тиламино]гексиламино]этил]оксим] эритроми-цина А,
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-фторфенил)метиламино] гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(2-трифторметилфенил) мети-ламино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-трифторметилфенил) мети-ламино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-трифторметилфенил) мети-ламино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(2-гидроксифенил)метилами-но]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[3-гидроксифенил)метил-ами-но]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-гидроксифенил)метилами-но]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3,5-дихлор-2-гидрокси-фенил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(2-нитрофенил)метиламино] гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-нитрофенил)метиламинo] гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-нитрофенил)метиламино] гексиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-гидрокси-3-нитрофенил) метиламино]гексиламино]этил]оксим] эритро-мицина А;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-гидрокси-4-нитрофенил) метиламино]гексиламино]этил]оксим] эритро-мицина А;
(Е)-9-[O-[2-[N-метил-6- [N’-метил-N’-(4-трифторметилфе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А.
Получение соединений формулы (I), явля-ющихся предметом настоящего изобретения, может быть осуществлено в соответствии с опи-санным ниже способом синтеза. Способ включа-ет, во-первых, реакцию конденсации между со-ответствующей кислотой формулы
(II)
где R1 и m имеют указанные выше значения, с хлористым ацилом формулы
А-(CH2)n - 1 -COCl (III)
где А и n имеют указанные выше значения.
Реакцию конденсации осуществляют в со-ответствии со стандартными методами в инерт-ном растворителе и в присутствии основания, такого, как, например, гидроксид щелочного металла, с получением соединений формулы
(IV)

где А, R1, n и m имеют указанные выше значения.
Полученные таким образом N-ациламинокислоты формулы (IV) далее подвер-гают конденсации в соответствии со стандарт-ными методами с аминоэфирами формулы
(V)
где R2 и r имеют указанные выше значения, а R4 обозначает метильную или этильную группу, с получением соединений формулы

(VI)
где А, R1, R2, R4, n, m и r имеют указанные выше значения.
В соответствии со стандартными методами соединения формулы (VI) далее восстанавлива-ют, например, с помощью борогидрида натрия в присутствии кислот, алюмогидрида лития, диме-тилсульфидборана или путем каталитического гидрирования, до соответствующих аминоспир-тов формулы
(VII)
где А, R1, R2, n, m и r имеют указанные выше значения.
Аминоспирты формулы (VII) затем превра-щают в соответствующие сульфонильные произ-водные формулы (VIII), например, с помощью метансульфонилхлорида или пара-толуолсульфонилхлорида, и далее конденсиру-ют с 9-О-оксимом эритромицина А или с 9-О-оксимом 6-O- метилэритромицина А, причем оба соединения могут быть представлены формулой (IХ), с получением соединений формулы (I)
(VIII)
(I)
где A, R1, R2, M, n, m и r имеют указанные выше значения, а R5 обозначает мезильную или тозильную группу.
Реакцию между соединениями формулы (VIII) и оксимами формулы (IХ) осуществляют в инертном органическом растворителе, таком, как, например, тетрагидрофуран, этиловый эфир или 1,2-диметоксиэтан, в присутствии третбути-лата калия и 18-краун-6-эфира в качестве ком-плексообразующего агента.
Для специалиста в данной области техники очевидно, что, если реакцию сульфонилирова-ния осуществляют с использованием соединений формулы (VII), в которых один или оба замести-теля R1 и R2 обозначают атом водорода, может оказаться необходимым защитить атом или ато-мы азота перед осуществлением реакции суль-фонилирования.
В этом случае конденсацию полученных таким образом N-защищенных сульфонильных производных с оксимами формулы (IХ) осу-ществляют аналогично тому, как это описано выше, а последующее удаление защитной груп-пы осуществляют в соответствии с принятыми методами, что дает возможность получить со-единения формулы (I), в которых один или оба заместителя R1 и R2 обозначают атом водорода. Более подробно защита аминов описана в лите-ратуре, например, см. T.W. Greene и P.G.M. Wuts, Protective groups in organic synthesis, John Wiley & Sons, Inc., 2-e изд., (1991), 309-405.
Соединения формул (II), (III) и (V) являются известными или легко могут быть получены в соответствии с известными методами.
Оксимы формулы (IХ) также являются из-вестными соединениями и могут быть получены в соответствии со стандартными методами, включающими, например, взаимодействие эрит-ромицина А или 6-О-метилэритромицина А с гидрохлоридом гидроксиламина.
Сложные эфиры формулы (VI) необязатель-но могут быть получены в соответствии с аль-тернативным методом синтеза, включающим, во-первых, конденсацию соответствующей амино-кислоты формулы (II) с аминоэфиром формулы (V) с получением соединений формулы
(X)
где R1, R2, R4, m и r имеют указанные выше зна-чения.
Специалисту в данной области техники очевидно, что перед осуществлением реакции конденсации между аминокислотой формулы (II) и аминоэфиром формулы (V) может оказаться необходимым соответствующим образом защи-тить аминогруппу аминокислоты формулы (II) аналогично тому, как это уже было описано для реакции сульфонилирования.
Последующую конденсацию соединений формулы (Х) с соединением формулы (III) осу-ществляют в соответствии со стандартными методами, а необязательное удаление защитной группы затем позволяет получить соединения формулы (VI).
Получение соединений формулы (I), в кото-рых по крайней мере один из двух заместителей R1 и R2 обозначает группу, выбранную из этила, н-пропила, н-бутила и изобутила, может быть осуществлено в соответствии с альтернативным способом синтеза, описанным ниже.
Этот способ включает, во-первых, ацилиро-вание атома или атомов азота аминоспиртов формулы (VII), где один или оба заместителя R1 и R2 обозначают атом водорода.
Например, при использовании соединения формулы (VII), в котором оба заместителя R1 и R2 обозначают атом водорода, в соответствии со стандартными методами в присутствии пригод-ного ацилхлорида (R’COCl) можно получить соединения формулы
(XI)
где А, n, m и r имеют указанные выше значения, а R’ обозначает прямую или разветвленную (С1-С3)алкильную группу.
Восстановление соединений формулы (ХI), осуществляемое в соответствии со стандартны-ми методами, позволяет получить соединения формулы
(XII)
где А, n, m и r имеют указанные выше значения, а R1 и R2 обозначают этил, н-пропил, н-бутил или изобутил, из которых после превращения в соот-ветствующие сульфонильные производные и конденсации с оксимами формулы (IХ) анало-гично тому, как это описано выше, можно полу-чить соединения формулы
(I)
где А, М, n, m и r имеют указанные выше значе-ния, а R1 и R2 обозначают этил, н-пропил, н-бутил или изобутил.
Ниже описан процесс синтеза, альтерна-тивный по отношению к тому, который описан ранее для получения соединений формулы (I) являющихся предметом настоящего изобретения.
Этот процесс включает, во-первых, окисле-ние соответствующего N-защищенного амино-спирта, такого, как, например, N-бензилоксикарбониламиноспирт формулы (ХIII), в присутствии гипохлорита натрия и свободного радикала 2,2,6,6-тетраметилпиперидинокси (ТЕМПО) в инертном органическом растворите-ле с получением соединений формулы (XIV)

где m имеет указанные выше значения, а Z обо-значает защитную группу.
Примерами инертных органических рас-творителей, пригодных для реакции окисления, являются, например, метиленхлорид, хлоро-форм, черыреххлористый углерод, 1,2-дихлорзтан, этилацетат, бензол и толуол.
Аминирование полученного таким образом альдегида в присутствии пригодного амино-спирта формулы (XV) и восстановление полу-ченного промежуточного продукта, например, в присутствии боргидрида натрия, позволяет по-лучить аминоспирты формулы (XVI)

где Z, m и r имеют указанные выше значения.
Последующая защита азота аминогруппы соединений формулы (XVI) и тем самым пре-вращение в соответствующие сульфонильные производные, конденсация с оксимами формулы (IХ) и удаление защитной группы атомов азота аналогично тому, как это описано выше, позво-ляют получить соединения формулы
(XVII)
где М, m и r имеют указанные выше значения. Промежуточные оксимы формулы (XVII), скон-денсированные с соответствующим альдегидом формулы (XVIII) и восстановленные, например, каталитическим гидрированием, позволяют по-лучить соединения формулы (I)

где А, М, m и r имеют указанные выше значения.
Соединения формул (XIII), (XV) и (XVIII) являются известными или легко могут быть по-лучены в соответствии с известными методами.
Соединения формулы (I), в которых один или оба заместителя R1 и R2 обозначают атом водорода, полученные в соответствии с одним из описанных выше способов, необязательно могут быть алкилированы по атому или атомам азота диаминофрагмента в соответствии со стандарт-ными методами, включающими, например, кон-денсацию с соответствующим альдегидом и восстановление полученного промежуточного продукта.
Таким путем получают соединения форму-лы (I) в которых R1 и R2 имеют одинаковые или различные значения и обозначают прямую или разветвленную (С1-С4)алкильную группу.
Получение соединений формулы (I), имею-щих Z- или Е-кофигурацию, осуществляют в соответствии с одной из схем синтеза, описан-ных выше, используя оксим формулы (IХ) в тре-буемой конфигурации [J.C. Gasc и др., The Journal of Antibiotics, 44, 313-330, (1991)].
Было установлено, что соединения форму-лы (I) проявляют антибактериальную актив-ность по отношению к некоторым грамположи-тельным и грамотрицательным микроорганиз-мам и пригодны для применения в клинической терапии и в ветеринарии при лечении некоторых инфекционных заболеваний, таких, как, напри-мер, заболевания центральной нервной системы, верхних и нижних дыхательных путей, желу-дочно-кишечного тракта, мочеполовых путей, зубной ткани и наружных органов, таких, как кожа, глаза и уши.
Кроме того, эти соединения обладают ак-тивностью по отношению к некоторым пред-ставляющим клинический интерес грамположи-тельным микроорганизмам, устойчивым к эрит-ромицину А или в более общем случае к анти-биотикам из класса макролидов, характеризую-щихся наличием 14- или 15- членных макролак-тонов.
Антибактериальную активность соедине-ний формулы (I) по отношению к грамположи-тельным микроорганизмам, таким, как Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis и Staphylococcus aureus, и грамотрицательным микроорганизмам, таким, как Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae, оценивали с помощью опытов in vitro, пригодных для оценки мини-мальной концентрации антибиотика, позволяю-щей ингибировать рост бактерий (МИК) (пример 23). В качестве эталонов применяли рокситро-мицин и кларитромицин [The Merck Index, XI изд., № 8253 и № 2340 соответственно].
Было установлено, что антибактериальная активность соединений формулы (I) по отноше-нию к грамположительным микроорганизмам практически сопоставима с таковой рокситро-мицина и кларитромицина, т.е. двух макролидов, характеризующихся в опытах in vitro высокой антибактериальной активностью (таблица 1).
Было установлено также, что по отноше-нию к грамотрицательным микроорганизмам, в частности по оптношению к энтеробактериям, таким, как Escherichia соli и Klebsiella pneumoniae, соединения формулы (I) являются существенно более активными по сравнению с обоими соединениями, используемыми в каче-стве эталонов (таблица 2). В этой связи интерес-но отметить, что соединения формулы (I), явля-ющиеся предметом настоящего изобретения, оказались более активными, чем рокситромицин, описанный в вышеуказанной европейской заявке 0033255 и выбранный в качестве предпочти-тельного соединения по отношению к несколь-ким другим производным, таким, как, например, 9-[O-[(2-диметиламино)этил]оксим] эритромици-на А [J.C. Gasc и др., The Journal of Antibiotics, 44, 313-330, (1991)].
Кроме того, было установлено, что соеди-нения формулы (I) проявляют активность в опы-тах in vivo (таблица 3). Антибактериальную активность соединений формулы (I) в опытах in viva, выраженную в виде средней защищающей дозы РD50 (мг/кг), оценивали с помощью экспе-риментальной легочной инфекции, вызванной у мышей с помощью Streptococcus pyogenes (при-мер 23).
При анализе данных об активности, обна-руженной в опытах in vivo, становится очевид-ным, что соединения формулы (I) отличаются пролонгированным действием и длительным периодом полураспада при элиминации из тка-ни. Действительно, после внутрибрюшинного введения мыши соединения формулы (I) быстро и повсеместно распределялись по всему орга-низму, а уровни в тканях оказывались выше, чем в плазме. Эти результаты становятся особенно очевидными при анализе значений РD50 для со-единений формулы (I), введенных за 24 часа до или через 1 час после заражения. Действительно, эти величины оказались практически неизменен-ными после введения за 24 часа до или через 1 час после заражения.
В случае экспериментальной легочной ин-фекции, вызванной у мышей с помощью Streptococcus pyogenes, т.е. патогена, обычно вызывающего респираторные заболевания, эф-фективные концентрации соединений формулы (I), введенные внутрибрюшинно, сохранялись в области легких в течение 24-48 часов после вве-дения. В отличие от этого рокситромицин и кла-ритромицин, т.е. используемые в качестве этало-нов соединения, будучи введенными за 24 часа до заражения, оказались неактивными. Следова-тельно, соединения формулы (I) также обладают избирательной активностью по отношению к легким и могут успешно применяться для лече-ния инфекций дыхательных путей.
В дополнение к вышеуказанной активности по отношению к бактериальным микроорганиз-мам соединения формулы (I), являющиеся пред-метом настоящего изобретения, являются актив-ными по отношению к эукариотным патогенам, в частности, они обладают выраженной активно-стью по отношению к простейшим, таким, как Plasmodium falciparum, который является хоро-шо известным возбудителем малярии. Следова-тельно, соединения формулы (I) также могут успешно применяться для лечения заболеваний малярией.
Наряду с тем, что они характеризуются широким спектром антибиотической активности по отношению к грамположительным и грамот-рицательным микроорганизмам и простейшим, хорошей стабильностью по отношению к кисло-там и хорошими фармакокинетическими свой-ствами, острая токсичность для мышей соедине-ний формулы (I) сопоставима с таковой роксит-ромицина.
Следовательно, отличаясь высокой без-опасностью при применении, они могут успешно использоваться в терапии человека и в ветери-нарии.
Соединения формулы (I) предпочтительно следует использовать в соответствующей фар-мацевтической форме, пригодной для орального, парентерального введения, в виде суппозитория или для местного применения. Таким образом, предметом настоящего изобретения являются фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений формулы (I) в смеси с фармацевтически приемлемым носителем. Эти фармацевтические формы включают таблетки, капсулы, сиропы, растворы для инъекций, гото-вые к применению или получаемые перед при-менением путем разбавления лиофилизирован-ной формы, суппозитории, растворы, кремы, мази и глазные примочки. Для ветеринарных целей в дополнение к вышеуказанным компози-циям возможно изготовление твердых или жид-ких концентратов, подлежащих разбавлению в пище или в воде для питья.
В соответствии с типом композиции кроме терапевтически эффективного количества одного или нескольких соединений формулы (I) эти композиции должны содержать твердые или жидкие эксципиенты или растворители для фар-мацевтической или ветеринарной целей и необя-зательно другие добавки, обычно используемые в технике изготовления препаративных форм, такие, как загущающие агенты, агрегирующие агенты, замасливатели, агенты, способствующие дезинтеграции, корригенты и красители.
Для лечения конкретных инфекций соеди-нение формулы (I) может быть объединено с эффективным количеством другого действующе-го вещества.
Эффективное количество соединения фор-мулы (I) может варьироваться в зависимости от различных факторов, таких, как серьезность и фаза заболевания, орган или система, подвер-женная заболеванию, характеристики видов хозяев, чувствительность бактериальных видов, обусловливающих инфекцию, и выбранный путь введения. Терапевтическая доза обычно состав-ляет от 0,5 до 100 мг/кг веса тела в день и может применяться в виде однократной дозы или 30 нескольких суточных доз.
Ниже изобретение проиллюстрировано на примерах, не ограничивающих его объем.
Строение соединений формулы (I) и проме-жуточных продуктов синтеза при их получении подтверждали с помощью 1Н-ЯМР- или 13С-ЯМР- спектроскопии. Величины значимых сигналов наиболее важных промежуточных продуктов и соединений формулы (I) приведены ниже в опи-сании.
Пример 1
Получение N-бензоил-6-аминокапроновой кислоты
Раствор бензоилхлорида (0,18 моля) в эти-ловом эфире (160 мл) и раствор 1н. гидроксида натрия (180 мл) одновременно добавляли к сме-си 6-аминокапроновой кислоты (0,15 моля) в этиловом эфире (150 мл) и воды (200 мл), содер-жащей гидроксид натрия (0,15 моля), и переме-шивали при температуре от 0 до 5°С. По завер-шении добавления соединений температуру реакционной смеси доводили до комнатной и перемешивали в течение еще 4 часов. После разделения фаз водную фазу промывали этило-вым эфиром (200 мл) и подкисляли концентриро-ванной соляной кислотой с использованием ре-активной бумаги конго. После экстракции эти-лацетатом (3х200 мл) объединенные органиче-ские фазы промывали насыщенным водным рас-твором хлорида натрия (200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Таким путем получали N-бензоил-6-аминокапроновую кислоту, которую непосред-ственно применяли в последующих реакциях.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
N-бензоил-3-аминопропановую кислоту;
N-бензоилглицин;
N-бензоил-8-аминооктановую кислоту;
N-бензоил-4-аминобутановую кислоту;
N-фенилацетил-6-аминокапроновую кисло-ту;
N-фенилацетилглицин;
N-бензоил-N-изопропил-4-аминобутановую кислоту;
N-бензоил-N-изопропил-6-аминокапроно-вую кислоту.

Пример 2
Получение этилового эфира N-[6-(бензоиламино)гексаноил] глицина
Раствор дициклогексилкарбодиимида (112 ммолей) в безводном тетрагидрофуране (44 мл) постепенно добавляли к суспензии, содержащей N-бензоил-6-аминокапроновую кислоту (93,5 ммоля), полученную согласно примеру 1, гидро-хлорид этилового эфира глицина (112 ммолей), триэтиламин (112 ммолей) и безводный 1-гидроксибензотриазол (112 ммолей) в тетрагид-рофуране (330 мл) и перемешивали при темпера-туре 0°С. Далее температуру реакционной смесь доводили до комнатной и перемешивали в тече-ние 16 часов. В результате получали осадок, который удаляли фильтрацией, а полученный таким образом фильтрат упаривали при пони-женном давлении. Остаток объединяли с этила-цетатом (300 мл) и последовательно промывали раствором 5%-ной соляной кислоты (2х100 мл), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл), раствором 5%-ного бикарбоната натрия (2х100 мл) и в завершение насыщенным раство-ром хлорида натрия (100 мл). Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха при пониженном давлении, получая та-ким образом этиловый эфир N-[6-(бензоиламино)гексаноил] глицина, который непосредственно применяли в последующих реакциях.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
этиловый эфир N-[(бензоиламино)ацетил] глицина;
этиловый эфир N-[6-(фенилацетиламино) гексаноил] глицина;
этиловый эфир N-[(фенилацетиламино)аце-тил] глицина;
этил-6-[6-(бензоиламино)гексаноиламино] гексаноат;
метиловый эфир N-[5-(бензоиламино)пента-ноил]глицина;
метил-6-[5-(бензоиламино)пентаноиламино] гексаноат;
метиловый эфир N-[7-(бензоиламино)гепта-ноил]глицина;
метил-5-[6-(бензоиламино)гексаноил-амино] пентаноат;
метил-6-[(бензоиламино)ацетиламино] гек-саноат;
метил-3-[6-(бензоиламино) гексаноилами-но]пропионоат;
этил-6-[N-изопропил(фенилацетиламино) ацетиламино]гексаноат;
метил-6-[4-(бензоиламино)бутаноиламино] гексаноат;
метил-4-[N-изопропил-4-(N’-изопропил-N’-бензоиламино)бутаноиламино] бутаноат.

Пример 3
Получение этилового эфира N-(6-аминоногексаноил)глицина
а) К раствору гидроксида натрия (33,54 г; 0,831 моля) в воде (840 мл) и метаноле (400 мл) добавляли 6-аминокапроновую кислоту (100 г, 0,762 моля) и постепенно добавляли раствор ди-трет-бутилдикарбоната (168 г; 0,762 моля) в метаноле (140 мл). Реакционную смесь переме-шивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После этого вновь добавляли твердый ди-трет-бутилдикарбонат (17,5 г, 0,08 моля) и реак-ционную смесь перемешивали еще в течение 16 часов. Затем реакционную смесь промывали гексаном (2х400 мл), подкисляли раствором бисульфата калия до рН 1,5 и экстрагировали этилацетатом (3х450 мл). Объединенные орга-нические фазы сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха, получая при этом 6-(трет-бутоксикарбониламино)капроновую кислоту (163 г) в виде масла.
б) Аналогично методике, описанной в при-мере 2, 6-(трет-бутоксикарбониламино) капро-новую кислоту (163 г) непосредственно конден-сировали с гидрохлоридом этилового эфира глицина (118 г; 0,845 моля), получая таким обра-зом этиловый эфир N-[6-(трет-бутоксикарбониламино)гексаноил]глицина (285 г) в виде неочищенного продукта, который непо-средственно применяли в последующей реакции. tпл 76-77°С (изопропиловый эфир).
в) Раствор 6н. соляной кислоты (150 мл) в этилацетате (150 мл) добавляли к раствору эти-лового эфира N-[6-(трет-бутоксикарбониламино)гексаноил] глицина (285 г) в этилацетате (500 мл) и перемешивали при комнатной температуре. Через 24 часа образо-вывался осадок, который отфильтровывали, промывали этилацетатом и этиловым эфиром и сушили в термостате (50°С) под вакуумом. Та-ким путем получали этиловый эфир N-(6-аминоногексаноил) глицина (93 г) в виде неочи-щенного продукта, который непосредственно применяли в последующих реакциях. ТСХ (ме-тиленхлорид:метанол:аммиак = 10:2:1) Rf = 0,2.

Пример 4
Получение этилового эфира N- [6- [(4-фторбензоил)амино] гексаноил]глицина
Раствор 4-фторбензоилхлорида (47,4 ммо-ля) в метиленхлориде (30 мл) постепенно добав-ляли к суспензии, содержащей этиловый эфир N-(6- аминоногексаноил)лицина (39,5 ммоля), по-лученный согласно примеру 3, и триэтиламин (87 ммолей) в метиленхлориде (150 мл) и пере-мешивали при 0°С. Температуру полученной таким образом смеси, к которой затем добавляли триэтиламин (2 мл), доводили до комнатной и перемешивали. После выдержки в течение 1 часа в этих условиях реакционную смесь промывали раствором 5%-ной соляной кислоты (2х100 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия (3х100 мл). Отделенную органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха под ва-куумом. Таким путем получали этиловый эфир N-[6-[(4-фторбензоил)амино]гексаноил]глицина в виде неочищенного продукта, который непо-средственно применяли в последующих реакци-ях. tпл 121-122°С (этилацетат); ТСХ (этилацетат) Rf = 0,3.
По аналогичной методике получали следу-ющее соединение:
этиловый эфир N-[6-(2-фуроиламино)гексаноил]глицина, tпл 104- 106°С (ацетонитрил/изопропиловый эфир); ТСХ (мети-ленхлорид:метанол = 95:5) Rf = 0,3.

Пример 5
Получение этилового эфира N- [6- [(4-метоксибензоил)амино]гексаноил] глицина
Аналогично примеру 2 с использованием 4-метоксибензойной кислоты (33 ммоля) и этило-вого эфира N-(6-аминоногексаноил)глицина (39,5 ммоля), полученного согласно примеру 3, получали этиловый эфир N- [6- [(4-метоксибензоил)амино] гексаноил]глицина в виде неочищенного продукта, который непо-средственно применяли в последующих реакци-ях. tпл 106-107°С. ТСХ (метиленхлорид:метанол = 90:10) Rf = 0,46.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
этиловый эфир N-[6-[(3,4-метилендиоксибензоил)амино]гексаноил]глици-на, ТСХ (метиленхлорид:метанол = 90:10) Rf = 0,39;
этиловый эфир N-[6-[(4-метилсульфонилбензо-ил)амино]гексаноил]глицина, tпл 124-126°С; ТСХ (метиленхлорид:метанол = 96:4) Rf = 0,31;
этиловый эфир N- [6-[(3-трифторметилбензо-ил)амино]гексаноил]глицина, tпл 102-104°С; ТСХ (метиленхлорид:метанол = 95:5) Rf = 0,38.

Пример 6
Получение 2-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]этанола
Серную кислоту (6н.) в этиловом эфире (40,9 мл; 700 ммолей), полученную смешением 96%-ной серной кислоты (33 мл) и этилового эфира (100 мл), постепенно добавляли к суспен-зии, содержащей этиловый эфир N-[6-(бензоиламино)гексаноил] глицина (46,8 ммоля), полученный согласно примеру 2, и борогидрид натрия (700 ммолей) в безводном тетрагидрофу-ране (200 мл), и перемешивали при температуре от 15°С до 20°С. Реакционную смесь доводили до температуры кипения в течение 24 часов и затем охлаждали до 0°С. Затем при перемеши-вании добавляли метанол (150 мл). Растворитель выпаривали при пониженном давлении и оста-ток объединяли с раствором 6н. гидроксида натрия (200 мл), выдерживая полученную смесь при температуре кипения в течение 24 часов. Затем реакционную смесь, охлажденную до комнатной температуры, экстрагировали тетра-гидрофураном (2х100 мл) и органическую фазу упаривали досуха, объединяли с этилацетатом и сушили над сульфатом натрия. Путем подкисле-ния эфирным раствором соляной кислоты полу-чали осадок, представляющий собой 2-[6-(фенилметиламино)гексиламино]этанол в виде гидрохлорида. Полученный таким образом не-очищенный продукт непосредственно применяли в последующих реакциях.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
2- [2-(фенилметиламино)этиламино]этанол;
2- [6-(2-фенилэтиламино)гексиламино] эта-нол;
6- [6-(фенилметиламино)гексиламино] гек-санол;
2- [5-(фенилметиламино)пентиламино] эта-нол;
2- [8-(фенилметиламино)октиламино] эта-нол;
5- [6-(фенилметиламино)гексиламино] пен-танол;
6- [3-(фенилметиламино)пропиламино] гек-санол;
3- [6-(фенилметиламино)гексиламино] про-панол;
3- [4-(фенилметиламино)бутиламино] про-панол;
6- [2-(фенилметиламино)этиламино] гекса-нол;
6- [N-изопропил-4-(фенилметиламино)бу-тиламино] гексанол;
2- [6-[(4-фторфенил)метиламино]гексилами-но] этанол;
2- [6-[(4-метоксифенил)метиламина]гексил-амино] этанол;
2- [6-[(3,4-метилендиоксифенил)метилами-но]гексиламино]этанол;
2- [6-[(3-трифторметилфенил)метиламино] гексиламино]этанол;
2- [6-[(4-метилсульфонилфенил)метилами-нo]гексиламино]этанол;
4- [N-изопропил-4-(N’-изопропил-N’-фенил-метиламино)бутиламино]бутанол.

Пример 7
Получение 6-[N-ацетил-6-(N’-ацетил-N’-фенилметиламино) гексиламино]гексилацетата
Триэтиламин (1,95 мл; 14 ммолей) и рас-твор ацетилхлорида (0,62 мл; 8,69 ммоля) в ме-тиленхлориде (5 мл) постепенно добавляли к суспензии, содержащей 6-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]гексанол (1 г, 2,6 ммоля), полученный согласно примеру 6, в метиленхлориде (15 мл), и перемешивали при 0°С. После перемешивания в течение 1 часа при 0°С температуру реакционной смеси доводили до комнатной и перемешивали еще в течение 16 часов. Затем реакционную смесь промывали раствором 10%-ной соляной кислоты (10 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия. После разделения фаз органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха под ва-куумом, получая таким образом 6- [N-ацетил-6-(N’-ацетил-N’- фенилметилами-но)гексиламино]гексилацетат (1,18 г) в виде мас-ла, который непосредственно применяли в по-следующих реакциях. По аналогичной методике получали следующее соединение:
2- [N-ацетил-6-[N’-ацетил-N’-(2-фенилэтил) амино]гексиламино]этилацетат.

Пример 8
Получение 6-[N-этил-6-(N’-этил-N-фенил-метиламино)гексиламино] гексанола
Аналогично примеру 6 с использованием 6-[N-aцетил-6-(N’-aцетил-N’- фенилметилами-но)гексиламино]гексилацетата, полученного согласно примеру 7, получали 6- [N-этил-6-(N’-этил-N’-фенилметиламино) гексиламино] гекса-нол.
По аналогичной методике получали следу-ющее соединение:
2-[N-этил-6-[N’-этил-N’-(2-фенилэтил) ами-но]гексиламино] этанол.

Пример 9
Получение 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гек-силамино] этанола
Раствор 1н. гидроксида натрия (44,5 мл) и толуоловый раствор 50%-нoго бензилхлорфор-миата (44,5 ммоля) в этилацетате (33 мл) посте-пенно и одновременно добавляли к раствору дигидрохлорида 2-[6-(фенилметиламино)гексиламино]этанола (18,5 ммоля), полученного согласно примеру 6, в рас-творе 1н. гидроксида натрия (37,1 мл) и этилаце-тата (40 мл), и перемешивали при температуре 0°С. По завершении добавлений температуру реакционной смеси доводили до комнатной и перемешивали в течение 24 часов. После разде-ления фаз водную фазу промывали этилацета-том (2х50 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха под вакуумом. Таким путем получали 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этанол в виде масла, который непосредственно применяли в последующих реакциях. ТСХ (этилацетат:гексан = 50:50) Rf = 0,20.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
2-[N-бензилоксикарбонил-2-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)этиламино]эта-нол, ТСХ (этилацетат:гексан = 60:40) Rf = 0,25;
6-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино] гексанол, ТСХ (этилацетат:гексан = 50:50) Rf = 0,27;
6-[N-бензилоксикарбонил-5-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)пентиламино] гексанол;
2-[N-бензилоксикарбонил-5-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)пентиламино] этанол;
2-[N-бензилоксикарбонил-8-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)октиламино] этанол;
5-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино] пентанол;
6-[N-бензилоксикарбонил-3-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)пропиламино] гексанол;
3-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино]гексиламино] пропанол;
3-[N-бензилоксикарбонил-4-(N’-бензилокси-карбонил-N’-фенилметиламино)бутиламино]про-панол;
6-[N-изопропил-2-[N’-бензилоксикарбонил-N’-(2-фенилэтил)амино]этиламино]гексанол, ТСХ (метиленхлорид:метанол:аммиак = 95:5:0,5) Rf = 0,33;
6- [N-бензилоксикарбонил-4-(N’-изопропил-N’-фенилметиламино)бутиламино]гексанол, ТСХ (метиленхлорид:метанол:аммиак = 95:5:0,5) Rf = 0,42;
2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилокси-карбонил-N’-[(4-фторфенил)метил]амино]гек-силамино]этанол, ТСХ (этилацетат:гексан = 60:40) Rf = 0,35;
2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилокси-карбонил-N’-[(4-метоксифенил)метил]амино]гек-силамино]этанол, ТСХ (этилацетат:гексан = 50:50) Rf = 0,2;
2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилокси-карбонил-N’-[(3,4-метилендиоксифенил)метил] амино]гексиламино]этанол, ТСХ (этилацетат: гексан = 60:40) Rf = 0,26;
2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилокси-карбонил-N’-[(3-трифторметилфенил)метил]ами-но]гексиламино]этанол, ТСХ (этилацетат:гексан = 50:50) Rf = 0,25;
2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилокси-карбонил-N’-[(4-метилсульфонилфенил)метил] амино]гексиламино]этанол, ТСХ (этилацетат: гексан = 90:10) Rf = 0,36.

Пример 10
Получение 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино] этилметансуль-фоната
Раствор метансульфонилхлорида (3,16 ммоля) в метиленхлориде (5 мл) постепенно до-бавляли к раствору 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этанола (2,6 ммоля), полученного согласно примеру 9, в ме-тиленхлориде (15 мл), содержащем триэтиламин (0,44 мл; 3,16 ммоля), и перемешивали при тем-пературе 0°С. Реакционную смесь, температуру которой доводили до комнатной и перемешива-ли в течение 5 часов, добавляли к раствору 5%-ной соляной кислоты (20 мл). После разделения фаз органическую фазу промывали 5%-ной со-ляной кислотой (10 мл) и насыщенным раство-ром хлорида натрия (3х10 мл). Затем органиче-скую фазу сушили над сульфатом натрия и упа-ривали досуха, получая таким образом 2- [N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этилметан-сульфонат, который непосредственно применяли в реакции, приведенной в следующем примере.
Пример 11
Получение (Е)-9-[O-[2-[N-бензилокси-карбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенил-метиламино)гексиламино]этил]оксима] эритро-мицина А
(E)-9-O-оксим эритромицина А (627 мг; 0,84 ммоля), 18-краун-6-эфир (220 мг; 0,84 ммоля) и раствор 2-[N-бензилоксикарбонил--(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино] этилметансуль-фоната (0,84 ммоля), полученного согласно при-меру 10, в безводном тетрагидрофуране (5 мл) добавляли в указанном порядке к суспензии трет-бутилата калия (103 мг; 0,92 ммоля) в без-водном тетрагидрофуране (5 мл) и выдерживали при комнатной температуре и при перемешива-нии в атмосфере азота. Реакционную смесь пе-ремешивали при комнатной температуре в тече-ние 20 часов и затем упаривали при пониженном давлении. Остаток объединяли с этилацетатом (10 мл) и полученную таким образом смесь про-мывали насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл). Водную фазу экстрагировали этилаце-татом (2х10 мл) и объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха. Таким путем получали (Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил--(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этил]оксим] эритромицина А и применяли его непосред-ственно в последующих реакциях. ТCX (мети-ленхлорид:метанол:аммиак = 90:9:1) Rf = 0,58; МС (С.I.) (M+H) + = 1250; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,38-7,10 (m, 15H, арома-тические соединения); 5,18-5,10 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 2,26 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,81 (t, 3Н, СH3СН2).
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-2-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)этиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А, ТСХ (метиленхло-рид:метанол:аммиак = 90:10:1) Rf = 0,5; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3): 6 (част./млн) 7,11-6,97 (m, 15Н, ароматические соединения); 5,18-4,97 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 2,25 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, СН3СH2);
(Е)-9-[O-[6-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]гексил]оксим] эритромицина А, ТСХ (метиленхлорид:метанол: аммиак = 90:10:1) Rf = 0,6; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3): 6 (част./млн) 7,27-6,96 (m, 15Н, аромати-ческие соединения); 5,05-4,92 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,17 (s, 3Н, ОСН3); 2,13 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,70 (t, 3Н, СH3CH2);
(Е)-9-[O-[6-[N-бензилоксикарбонил-3-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)пропиламино]гексил]оксим] эритромицина А. ТСХ (метиленхлорид:метанол: аммиак = 90:10:1) Rf = 0,65; МС (С.I.) (M+H) + = 1194; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,39-7,01 (m, 15Н, ароматические соединения); 5,17-5,02 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 2,27 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, СН3СН2);
(Е)-9-[O-[6-[N-бензилоксикарбонил-5-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)пентиламино]гексил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-8-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)октиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-5-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)пентиламино]этил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[5-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино)пентил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[3-[N-бензилоксикарбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]пропил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[3-[N-бензилоксикарбонил-4-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)бутиламино]пропил]оксим] эритромицина А;
(Е)-9-[O-[6-[N-бензилоксикарбонил-2- [N’-бензилоксикарбонил-N’-(2-фенилэтил)амино]этиламино]гексил]оксим] эритромицина А, tпл 74-76°С; MС (С.I.) (M+H) + = 1172; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,38-7,03 (m, 10Н, ароматические соединения); 5,13-5,03 (m, 2Н, CH2Ph); 3,29 (s, 3Н, ОСН3); 2,25 (s, 6Н, 2 NCH3);
(Е)-9-[O-[6-[N-этил-6-(N’-этил-N’-фенилметиламино)гексиламино]гексил]оксим] эритромицина А (соединение 1), tпл 80-82°С (аце-тонитрил); МС (С.I.) (M+H) + = 1094; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,20; 171,35; 140,06; 128,86; 128,07; 126,62; 102,96; 96,27; 53,54;
(Е)-9-[O-[2-[N-этил-6-[N’-этил-N-(2-фенилэтил)амино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 2), ТСХ (хлоро-форм:гексан:триэтиламин = 45:45:10) Rf = 0,2; МС (С.I.) (M+H) + = 1052; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,26-7,04 (m, 5Н, аромати-ческие соединения); 3,22 (s, 3Н, ОСН3); 2,20 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,79 (t, 3Н, СH3СН2);
(Е)-9-[O-[6-[N-бензилоксикарбонил-4-(N’-изопропил-N’-фенилметиламино)бутиламино]гексил]оксим] эритромицина А, tпл 75-77°С; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,47-7,12 (m, 10Н, аромати-ческие соединения); 5,18-4,97 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 2,25 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, CH3CH2);
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилоксикарбонил-N’-[(4-фторфе-нил)метил]амино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А, ТСХ (метиленхло-рид:метанол:аммиак = 90:10:1) Rf = 0,62; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,38-6,88 (m, 15Н, ароматические соединения); 5,17-5,03 (m, 2Н, СH2Ph); 3,29 (s, 3Н, ОСН3); 2,26 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,81 (t, 3Н, СН3СН2);
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилоксикарбонил-N’-[(4-метоксифенил)ме-тил]амино]гексиламино]этил]оксим] эритроми-цина А, ТCX (метиленхлорид:метанол:аммиак = 45:45:10) Rf = 0,3, 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,40-7,23 (m, 10Н, 2 PhCH2O); 7,20-6,75 (m, 4Н, PhOCH3); 5,52-5,17 (m, 4H, 2 CH2Ph); 3,77 (s, 3H, PhOCH3); 3,29 (s, 3H, ОСН3); 2,25 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, СН3СН2);
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилоксикарбонил-N’-[(3,4-метилендиоксифе-нил)метил]амино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А, ТСХ (метиленхло-рид:метанол:аммиак = 95:5:0,5) Rf = 0,31; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,38-7,22 (m, 10Н, 2 PhCH2O); 6,78-6,55 (m, 3Н, аромати-ческие соединения); 5,90 (s, 2Н, ОСH2O); 5,15-5,02 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,29 (s, 3Н, ОСН3); 2,26 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, СН3СН2);
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилоксикарбонил-N’-[(3-трифторметилфенил) метил]амино]гексиламино]этил]оксим] эритро-мицина А, ТCX (метиленхлорид:метанол:аммиак = 90:10:1) Rf = 0,65; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,54-7,15 (m, 14Н, ароматические соединения); 5,20-5,03 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 2,26 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, CH3CH2);
(Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-6-[N’-бензилоксикарбонил-N’-[(4-метилсульфонилфе-нил)метил]амино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А, ТСХ (метиленхло-рид:метанол:аммиак = 95:5:0,5) Rf = 0,5; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,90-7,79 (m, 4Н, PhSO2CH3); 7,48-7,15 (m, 10Н, 2 PhCH2O); 5,19-5,03 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 3,02 (s, 3Н, CH3SO2); 2,27 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, СH3CH2);
(Е)-9-[O-[4-[N-изопропил-4-(N’-изопропил-N’-фенилметиламино)бутиламино]бутил]оксим] эритромицина А (соединение 3), tпл 83-85°С (гек-сан); МС (С.I.) (M+H) + = 1066; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,37-7,10 (m, 5Н, аро-матические соединения); 3,50 (s, 2Н, CH2Ph); 3,30 (s, 3Н, ОСН3); 2,26 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,82 (t, 3Н, СН3СН2).

Пример 12
Получение (Е)-9-[О-[2-[6-(фенилметил-амино)гексиламино]этил]оксима] эритромицина А (соединение 4)
К раствору (Е)-9-[O-[2-[N-бензилокси-карбонил-6-(N’-бензилоксикарбонил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этил]оксима] эритромицина А (5,9 ммоля), полученного со-гласно примеру 11, в этаноле (150 мл) добавляли 10%-ный палладий на угле (750 мг). Получен-ную таким образом смесь помещали в гидроге-низатор Парра, загруженный водородом (1 бар), и перемешивали при комнатной температуре. Через 7 часов катализатор отфильтровывали и спиртовой раствор упаривали досуха. Таким путем после очистки с помощью хроматографии на силикагеле (элюент метиленхло-рид:метанол:аммиак = 90:10:1) получали (E)-9-[O-[2-[6-(фенилметиламино)гексиламино]этил] оксим] эритромицина А. МС (С.I.) (M+H) + = 982; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 140,48; 128,39; 128,11; 126,88.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения:
(Е)-9-[O-[2-[2-(фенилметиламино)этиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 5), 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 176,51; 172,36; 140,96; 129,08; 128,95; 127,67; 103,84; 96,86; 53,35;
(Е)-9-[O-[6-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]гексил]оксим] эритромицина А
(соединение 6), МС (С.I.) (M+H) + = 1038; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,24; 171,31; 140,33; 128,37; 128,13; 126,89; 102,92; 96,27; 54,01;
(Е)-9-[O-[6-[3-(фенилметиламино)пропил-амино]гексил]оксим] эритромицина А
(соединение 7), МС (С.I.) (M+H) + = 995; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,15; 171,37; 140,41; 128,38; 128,09; 126,89; 102,92; 96,27; 54,04;
(Е)-9-[O-[6-[5-(фенилметиламино)пентил-амино]гексил]оксим] эритромицина А (соедине-ние 8), 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,35-7,15 (m, 5Н, ароматические соединения); 3,75 (s, 2Н, CH2Ph); 2,25 (s, 6Н, 2 NCH3); 0,81 (t, 3Н, СH3CH2);
(Е)-9-[O-[2-[8-(фенилметиламино)октил-амино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 9), 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,40-7,15 (m, 5Н, ароматические соединения), 3,75 (s, 2Н, CH2Ph); 3,29 (s, 3H, ОСН3); 2,25 (s, 6H, 2 NCH3); 0,82 (t, 3H, СН3СН2);
(E)-9-[O-[2-[5-(фенилметиламино)пентил-амино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 10), 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 174,96; 172,00; 140,31; 128,39; 128,14; 126,93; 103,16; 96,20; 53,98;
(Е)-9-[O-[5-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]пентил]оксим] эритромицина А (соедине-ние 11), 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,24; 171,24; 140,41; 128,38; 128,13; 126,88; 102,97; 96,28; 54,06;
(E)-9-[O-[3-[6-(фенилметиламино)гексил-амино]пропил]оксим] эритромицина А (соедине-ние 12), 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,23; 171,46; 140,45; 128,39; 128,13; 126,88; 102,99; 96,29; 50,06;
(Е)-9-[O-[3-[4-(фенилметиламино)бутилами-но]пропил]оксим] эритромицина А (соединение 13), 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,22; 171,45; 140,35; 128,39; 128,13; 126,90; 102,98; 96,26; 53,94;
(E)-9-[O-[6-[N-изопропил-2-(2-фенилэтил-амино)этиламино]гексил]оксим] эритромицина А (соединение 14), tпл 93-95°С; МС (С.I.) (M+H) + = 1038; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 174,92; 170,96; 139,71; 128,42; 128,10; 125,79; 102,62; 95,94; 50,93;
(Е)-9-[O-[6-[4-(N-изопропилфенилметил-амино)бутиламино]гексил]оксим] эритромицина А (соединение 15), tпл 78-80°С; МС (С.I.) (M+H) + = 1052; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,47; 171,30; 140,95; 128,61; 128,02; 126,70; 116,87; 102,94; 53,94;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-фторфенил)метиламина] гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (со-единение 16), МС (С.I.) (M+H) + = 999,5; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 161,88; 136,06; 129,65; 115,14;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-метоксифенил)метил-амино]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 17), МС (С.I.) (M+H) + = 1011; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 158,57; 132,58; 129,31; 113,76;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3,4-метилендиоксифенил) метиламино]гексиламино]этил]оксим] эритро-мицина А (соединение 18), МС (С.I.) (M+H) + = 1025; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 147,65; 146,44; 134,39; 121,18; 108,66; 108,06;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-трифторметилфе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромици-на А (соединение 19), МС (С.I.) (M+Н) + = 1050, 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 141,57; 131,40; 130,63; 128,76; 124,22; 124,72; 123,56;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-метилсульфонилфенил) ме-тиламино]гексиламино]этил]оксим] эритроми-цина А (соединение 20), МС (С.I.) (M+H) + = 1059; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 147,23; 138,97; 128,79; 127,49.

Пример 13
Получение N-бензилоксикарбонил-6-аминогексанола
Бензилхлорформиат (50%-ный в толуоле; 84,8 мл; 0,256 моля) в этилацетате (171 мл) и раствор 1н. гидроксида натрия (256 мл) посте-пенно и одновременно добавл.яли к смеси 6-аминогексанола (25 г; 0,21 моля) в этилацетате (250 мл) и воды (200 мл) и перемешивали при 0°С. Температуру реакционной смеси (рН 9) доводили до комнатной и перемешивали в тече-ние 5 часов. После разделения фаз водную фазу промывали этилацетатом (200 мл). Затем объ-единенные органические фазы промывали насыщенным раствором хлорида натрия (150 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха. Остаток объединяли с этиловым эфиром (300 мл) и образовавшийся осадок отфильтровы-вали и сушили под вакуумом при 50°С, получая таким образом N-бензилоксикарбонил-6-аминогексанол (44,5 г). tпл 80-82°С.

Пример 14
Получение N-бензилоксикарбонил-6-аминогексанала
Раствор бромида калия (1,89 г; 16 ммолей) в воде (31 мл) добавляли к раствору N-бензилоксикарбонил-6-аминогексанола (40 г; 0,159 моля), полученного согласно примеру 13, в метиленхлориде (600 мл), содержащему свобод-ный радикал 2,2,6,6-тетраметилпиперидинокси (ТЕМПО) (0,248 г; 1,6 ммоля). К реакционной смеси для установления значения рН на 8,7 постепенно добавляли раствор гипохлорита натрия (215 мл), полученный путем смешения 7%-нoго раствора гипохлорита натрия (240 мл) с бикарбонатом натрия (4,22 г) и 5%-ной соляной кислотой (5 мл), и перемешивали при 10°С. По окончании добавления и после разделения фаз органическую фазу промывали метиленхлори-дом (2х200 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха. Таким путем получали N-бензилоксикарбонил-6-аминогексанал (39,45 г) в виде масла. ТСХ (этилацетат:гексан = 1:1) Rf = 0,41.

Пример 15
Получение 2-[6-(бензилоксикарбониламино) гексилами-но]этанола
Смесь, содержащую N-бензилоксикарбонил-6-аминогексанал (35 г; 0,14 моля) и 2-аминоэтанол (51,3 г; 0,84 моля) в эта-ноле (250 мл), в присутствии молекулярных сит (3 Е) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем реакционную смесь фильтровали через целит и к образовавшемуся раствору добавляли борогидрид натрия (6,33 г; 0,168 моля). После перемешивания в течение 4 часов при комнатной температуре реакционный растворитель выпаривали под вакуумом и оста-ток объединяли с водой (500 мл) и этилацетатом (500 мл). После разделения фаз водную фазу дополнительно экстрагировали этилацетатом (200 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором хлорида натрия (250 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали досуха, получая таким образом 2- [6-(бензилоксикарбониламино)гексиламино]этанол (38,36 г). ТСХ (этилацетат:метанол:аммиак = 10:2:1) Rf = 0,4.

Пример 16
Получение 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(бензилоксикарбониламино)гексиламино] эта-нола
Аналогично примеру 9 с использованием 2-[6-(бензилоксикарбониламино)гексиламино]эта-нола (38,3 г, 0,13 моля), полученного согласно примеру 15, получали 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(бензилоксикарбониламино)гексиламино]эта-нол в виде масла. ТСХ (этилацетат:гексан = 65:35) Rf = 0,45.

Пример 17
Получение 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(бензилоксикарбониламино)гексиламино] этил-метансульфоната
Аналогично примеру 10 с использованием 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(бензилоксикарбонилами-но)гексиламино]этанола (20 г; 47,8 ммоля), по-лученного согласно примеру 16, получали 2- [N-бензилоксикарбонил-б-(бензилоксикарбонилами-но)гексиламино]этилметансульфонат (24,35 г), который использовали непосредственно в по-следующих реакциях.

Пример 18
Получение (Е)-9-[О-[2-[N-бензилоксикарбо-нил-6-(бензилоксикарбонил-амино)гексиламино] этил]оксима] эритромицина А
Аналогично примеру 11 с использованием 2-[N-бензилоксикарбонил-6-(бензилоксикарбонилами-но)гексиламино]этилметансульфоната (24,25 г; 47,8 ммоля), полученного согласно примеру 17, после хроматографии на силикагеле (элюент метиленхлорид:метанол:ам-миак = 95:5:0,5) получали (Е)-9-[O-[2-[N-бензилокси-карбонил-6-(бензилоксикарбониламино)гексил-амино]этил]оксим] эритромицина А (36,1 г). ТСХ (метиленхлорид:метанол:аммиак = 85:15:1,5) Rf = 0,5; 1Н-ЯМР (200 МГц, CDCl3):  (част./млн) 7,39-7,22 (m, 10Н, ароматические соединения), 5,14-5,05 (m, 4Н, 2 CH2Ph); 3,29 (s, 3Н, ОСН3); 2,25 (5, 6Н, 2 NCH3), 0,80 (t, 3Н, СН3СН2).

Пример 19
Получение (Е)-9-[O-[2-(6-аминогексил-амино)этил]оксима] эритромицина А
Аналогично примеру 12 с использованием (Е)-9-[O-[2-[N-бензилоксикарбонил-6-(бензилоксикарбониламино)гексиламино] этил]оксима] эритромицина А, полученного согласно примеру 18, после хроматографии на силикагеле (элюент метиленхло-рид:метанол:аммиак = 85:15:1,5) получали (Е)-9-[O-[2-(6-аминогексиламино)этил]оксим] эритро-мицина А.ТСХ (метиленхлорид:метанол:аммиак = 85:15:1,5) Rf = 0,2; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 175,18; 171,26; 102,96; 96,28.

Пример 20
Получение (Е)-9-[O-[2-[6-[(2-трифторметил-фенил)метиламино]гексиламино]этил]оксима] эритромицина А (соединение 21)
К раствору (Е)-9-[О-[2-(6-аминогексиламино)этил]оксима] эритромицина А (2 г; 2,24 ммоля), полученного согласно при-меру 19, в этаноле (50 мл) добавляли 2-трифторметилбензальдегид (0,4 г) и молекуляр-ные сита (4,5 г; 3 Е) и перемешивали при ком-натной температуре. Через 2 часа молекулярные сита отфильтровывали и к образовавшемуся раствору добавляли 10%-ный палладий на угле (0,2 г). Реакционную смесь помещали в гидроге-низатор Парра, загруженный водородом (1 бар). Через 1 час по окончании реакции гидрирования катализатор отфильтровывали и растворитель выпаривали. Остаток очищали с помощью хро-матографии на силикагеле (элюент метиленхло-рид:метанол:аммиак = 95:5:0,5), получая таким образом (Е)-9-[O-[2-[6-[(2-трифторметилфе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (2 г). МС (С.I.) (M+H) + = 1050, 13C-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 139,14; 131,88; 130,38; 127,58; 126,81; 125,82.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения: (Е)-9-[O-[2-[6-(3-пиридилметиламино)гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 22), МС (С.I.) (M+H) + = 982; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 149,66; 148,39; 135,81; 123,40;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-трифторметилфе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 23), МС (С.I.) (M+H) + = 1050; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 144,73; 128,23; 125,25; 124,26;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(2-гидроксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 24), МС (С.I.) (M+Н) + = 997; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 158,37; 128,60; 128,19; 122,54; 118,88; 116,32;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-гидроксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 25), МС (С.I.) (M+H) + = 997; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 157,28; 140,46; 129,56; 119,70; 115,55; 114,89;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-н-бутоксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 26), МС (С.I.) (M+H) + = 1053; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 158,27; 131,65; 129,40; 114,40;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-феноксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 27), МС (С.I.) (M+H) + = 1073; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 157,32; 157,28; 142,69; 129,72; 129,64; 123,16; 122,91; 118,84; 118,52; 117,29;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-гидроксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 28), МС (С.I.) (M+H) + = 997; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 156,49; 130,00; 128,87; 115,88;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-феноксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 29), МС (С.I.) (M+H) + = 1073; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 157,43; 156,05; 135,43; 129,69; 129,49; 123,07; 118,92; 118,72; 118,67;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(бифенил-4-ил) метилами-на]гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 30), МС (С.I.) (M+H) + = 1057; 13C-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 140,94; 139,86; 139,40; 128,74; 128,58; 127,13; 127,03;
(Е)-9-[O-[2-[6-(2-фурилметиламино)гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (соединение 31), МС (С.I.) (М+Н) + = 971; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 153,92; 141,73; 110,08; 106,81.

Пример 21
Получение (Е)-9-[О-[2-[6-[(3,5-дихлор-2-гидроксифенил)метиламино]гексиламино]этил] оксима] эритромицина А (соединение 32)
Молекулярные сита (6 г; 3 Е) и 3,5-дихлор-2-гидроксибензальдегид (0,535 г; 2,8 ммоля) добавляли к раствору (Е)-9-[O-[2-(6-аминогексиламино)этил]оксима] эритромицина А (2,5 г; 2,8 ммоля), полученного согласно при-меру 19, в безводном этаноле (100 мл). Реакци-онную смесь перемешивали при комнатной тем-пературе и через 2 часа молекулярные сита от-фильтровывали и к образовавшемуся раствору порциями добавляли борогидрид натрия (0,106 г; 2,89 ммоля). После перемешивания в течение 3 часов растворитель выпаривали при понижен-ном давлении и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент мети-ленхлорид:метанол:аммиак = 85:15:1,5), полу-чая таким образом (Е)-9-[O-[2-[6-[(3,5-дихлор-2-гидроксифе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (2,2 г). МС (С.I.) (M+H) + = 1066; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 153,43; 128,43; 126,42; 124,41; 122,91; 121,61.
По аналогичной методике получали следу-ющие соединения: (Е)-9-[O-[2-[6-[(2-нитрофе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 33), МС (С.I.) (M+H) + = 1027; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 149,14; 135,79; 133,13; 131,26; 127,87; 124,70;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(3-нитрофе-нил)метиламина]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 34), МС (С.I.) (M+H) + = 1027; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 148,37; 142,87; 134,17; 129,22; 122,81; 121,96;
(E)-9-[O-[2-[6-[(4-нитрофе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 35), МС (С.I.) (M+H) + = 1027; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 148,41; 147,00; 128,59; 123,60;
(Е)-9-[O-[2-[6-[(4-гидрокси-3-нитрофе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 36), МС (С.I.) (M+H) + = 1043; 13C-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 157,29; 137,40; 134,05; 128,01; 125,23; 121,70;
(Е)-9-[O-[2-[6-[3-гидрокси-4-нитрофе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 37), МС (С.I.) (M+H) + = 1043; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 155,50; 151,98; 132,51; 125,13; 119,67; 118,59.

Пример 22
Получение (Е)-9-[O-[2-[N-метил-6-[N’-метил-N’-фенилметиламино)гексиламино]этил] оксима] эритромицина А (соединение 38)
Водный 37%-ный раствор формальдегида (2 мл; 26,6 ммоля) и 10%-ный палладий на угле (0,82 г) добавляли в указанной последователь-ности к раствору (Е)-9-[O-[2-[6-(фенилметиламино)гексиламино] этил]оксима] эритромицина А (2 г; 2 ммоля), полученного согласно примеру 12, в смеси этанол:вода = 1:1 (20 мл) и перемешивали при комнатной темпера-туре. Реакционную смесь помещали в гидрогени-затор Парра, загруженный водородом (1 бар). Через 2 часа реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и образовавшийся раствор упаривали досуха. Образовавшийся остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент метиленхло-рид:метанол:аммиак = 90:10:1), получая (Е)-9-[O-[2-[N-метил-6-(N’-метил-(N’-фенилметиламино)гексиламино]этил]оксим] эритромицина А (1,8 г). МС (С.I.) (M+H) + = 1009; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl  (част./млн) 139,20; 129,04; 128,17; 126,86. По аналогичной методи-ке получали следующее соединение:
(Е)-9-[O-[2-[N-метил-6- [N’-метил-N’-(4-трифторметилфе-нил)метиламино]гексиламино]этил]оксим] эрит-ромицина А (соединение 39), MC (С.I.) (M+H) + = 1078; 13С-ЯМР (50 МГц, CDCl3):  (част./млн) 143,65; 129,12; 129,03; 125,10; 124,29.

Пример 23
Фармакологическая активность
а) Антибактериальная активность in vitro
Определение минимальных ингибирующих концентраций (МИК) по отношению к грампо-ложительным и грамотрицательным бактериям осуществляли микробиологическим методом серийных двукратных постепенных разведений жидкой среды [National Committee for Clinical Laboratory Standards, 1990, Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically; Approved standards M7-A2-NCCLS, Villanova, Ра] с использованием в каче-стве среды для культивирования бульона Мюл-лера-Хинтона (МHВ). В случае “требователь-ных” бактерий (Streptococcus pneumoniae и Streptococcus pyogenes) в среду добавляли 5%-ную лошадиную сыворотку. В качестве эталон-ных соединений из класса макролидов применя-ли рокситромицин и кларитромицин [The Merck Index, XI изд., № 8253 и № 2340 соответственно].
МИК, выраженные в (мкг/мл), определяли после инкубации микропланшетов при 37°С в течение 18 часов, оценивая наименьшую кон-центрацию антибиотика, обладающую способ-ностью ингибировать развитие бактерий.
б) Антибактериальная активность in vivо
Терапевтическую эффективность, выражен-ную в виде средней защищающей дозы (PD50) исследуемых соединений формулы (I), оценива-ли на примере индуцированной эксперимен-тальным путем легочной инфекции, вызванной у мыши Streptococcus pyogenes С 203. Использова-ли мышей-альбиносов линии Charles River (штамм CD 1) с весом тела 23-35 г, которых по-мещали в клетку группами по 6 особей, давая стандартный корм и воду по желанию. Суспен-зию S. pyogenes С 203 (соответствующую при-близительно 108 UFC) в триптозном бульоне (0,05 мл) вводили интраназально каждой мыши, анестезированной смесью этилового эфира и хлороформа. Исследуемые соединения вводили внутрибрюшинно в виде однократной дозы в 0,2%-ной суспензии Твина за 24 часа до или через 1 час после заражения. Наблюдение за гибелью мышей осуществляли в течение периода времени до 10 дней после заражения.
Определение PD50, выраженной в виде (мг/кг), проводили методом пробит-анализа.
Данные об антибактериальной активности в опытах in vitro по отношению к грамположи-тельным микроорганизмам (таблица 1) и гра-мотрицательным микроорганизмам (таблица 2) и об антибактериальной активности в опытах in vivo (таблица 3) некоторых характерных соеди-нений формулы (I) приведены ниже.

Таблица 1
Антибактериальная активность соединений 2, 4-12, 16-19, 21, 23-28 и соединений-эталонов рокситромицина и кларитромицина в опытах in vitro по отношению к грамположительным мик-роорганизмам, таким, как Streptococcus pneumoniae BS 3, Streptococcus pneumoniae BS 4, Streptococcus pyogenes A 26, Streptococcus pyogenes С 203, Enterococcus faecalis ATCC 29212 и Staphylococcus aureus PV 14, выражен-ная в виде минимальной ингибирующей концен-трации МИК (мкг/мл)

Сое-ди- МИК (мкг/мл)
нение S. pneu-moniae
BS 3 S. pneu-moniae
BS 4 S. pyogenes A 26 S. pyogenes C 203 E. faecalis ATCC 29212 S. aureus PV 14
2 0,0156 0,0312 0,0156 0,0312 8 1
4 0,0156 0,0156 0,0156 0,0039 4 0,25
5 0,0156 0,0312 0,0312 0,0156 4 1
6 0,0156 0,0312 0,0312 0,0156 8 0,25
7 0,0625 0,0625 0,0312 0,0156 4 0,5
8 0,25 0,5 0,0312 0,0078 8 0,5
9 0,0078 0,0078 0,0078 0,0039 4 0,25
10 0,0156 0,0156 0,0078 0,0039 4 0,5
11 0,25 0,5 0,0625 0,0312 16 0,5
12 0,25 0,5 0,0625 0,0312 16 0,25
16 0,0156 0,0156 0,0156 0,0039 4 0,25
17 0,0312 0,0625 0,0625 0,0039 4 0,25
18 0,0156 0,0312 0,0312 0,0078 2 0,25
19 0,0156 0,0078 0,0156 0,0156 2 1
21 0,0078 0,0039 0,0078 0,0156 2 1
23 0,0156 0,0078 0,0156 0,0156 2 1
24 0,0078 0,0156 0,0156 0,0039 4 0,25
25 0,25 0,25 0,125 0,0312 8 0,125
26 0,0156 0,0156 0,0312 0,0078 1 0,25
27 0,0078 0,0078 0,0156 0,0078 1 0,5
28 0,25 0,25 0,25 0,125 16 0,125
29 0,0078 0,0156 0,0312 0,0039 1 0,5
30 0,0156 0,0156 0,0156 0,0078 1 0,5
31 0,0078 0,0078 0,0078 0,0039 4 0,5
32 0,0625 0,0312 0,0625 0,0156 2 0,5
33 0,0039 0,0039 0,0039 0,00097 2 0,5
34 0,0019 0,0039 0,0078 0,0039 1 0,25
35 0,0039 0,0039 0,0078 0,0019 0,5 0,25
36 0,0625 0,0625 0,0625 0,0078 16 0,5
37 0,0312 0,0312 0,0312 0,0039 8 0,5
38 0,0078 0,0039 0,0156 0,0078 8 0,5
Рок-ситро-мицин 0,0312 0,0625 0,0625 0,0625 4 1
Кла-рит-роми-цин 0,0078 0,0156 0,0078 0,0078 1 0,25

Вышеприведенные данные явно свидетель-ствуют о том, что соединения формулы (I), явля-ющиеся предметом настоящего изобретения, обладают антибактериальной активностью по отношению к грамположительным микроорга-низмам, практически сопоставимой с таковой рокситромицина и кларитромицина.

Таблица 2
Антибактериальная активность соединений 2, 4-12, 16-19, 21, 23-38 и соединений-эталонов рокситромицина и кларитромицина в опытах in vitro по отношению к грамотрицательным мик-роорганизмам, таким, как Ensherichia coli ATC 25922 и Klebsiella pneumoniae ZC 2, выраженная в виде минимальной ингибирующей концентра-ции МИК (мкг/мл).

Соединение МИК (мкг/мл)
E. coli ATCC 25922 K. pneumoniae ZC 2
2 16 64
4 4 16
5 8 32
6 4 16
7 4 16
8 4 16
9 4 16
10 4 16
11 8 16
12 8 32
16 2 8
17 4 16
18 2 16
19 2 8
21 4 16
23 1 4
24 4 8
25 8 16
26 1 2
27 1 2
28 16 32
29 1 2
30 1 2
31 4 16
32 4 16
33 4 16
34 1 8
35 1 4
36 8 32
37 4 16
38 8 32
Рокситромицин 28 256
Кларитромицин 64 128

Антибактериальная активность соединений формулы (I) по отношению к грамотрицатель-ным микроорганизмам, таким, как Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae, оказалась существенно выше, чем таковая обоих эталонных соединений.

Таблица 3
Антибактериальная активность в опытах in vivo соединений 4, 10, 16-19, 21, 23, 26-27, 29-30, 33-35, 38 и соединений-эталонов рокситромици-на и кларитромицина при введении за 24 часа до и через 1 час после заражения мыши экспери-ментальным путем легочной инфекцией, вызван-ной Streptococcus pyogenes C 203, выраженная в виде средней защищающей дозы PD50 (мг/кг).

Соединение PD50 (мг/кг)
Легочная инфекция (S. pyogenes C 203)
Через 1 час после заражения За 24 часа после заражения
4 0,9 4,78
10 2,36 5,8
16 3,6 10,21
17 1,17 8,16
18 1,32 2,23
19 1,95 4,84
21 0,82 5,95
23 1,46 3,49
26 6,11 6,11
27 15,6 15,6
29 7,65 6,1
30 19,3 19,3
33 1,61 6,11
34 1,88 6,8
35 3,00 6,0
38 1,8 11,8
Рокситро-мицин 0,9 >25
Кларитро-мицин 3,25 >50

Соединения формулы (I) оказались активными в опытах in vivo, а профили их активности свидетельствуют о том, что эти соединения обладают существенно более высокими продолжительностью действия и периодом полураспада при элиминации из ткани, чем таковые соединенийэталонов.

EP, A, 0487411, 27.05.92
EP, A, 0033255, 05.08.81
US, A, 4740502, 26.09.88
SU 1577700 A3, 07.07.90
EP 0422843 A2, 17.04.91