СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУММЫ ФЛАВОНОИДОВ, ОБЛАДАЮЩИХ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Способ получения суммы флавоноидов, обладающих гепатопротекторной активностью путем экстракции растительного сырья спиртом, упаривания, фильтрования, сушки, отличающий-ся тем, что с целью повышения выхода целевого продукта, в качестве источника сырья ис-пользуют стебли хны красильной, которые дважды экстрагируют 60%-ным спиртом в тече-ние 8-12 ч при комнатной температуре в соотношении 1:4, экстракт отфильтровывают, очи-щают хлороформом, а затем элюируют целевой продукт водой и упаривают под вакуумом.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способов получения флавоноидов, обладающих гепатопротекторной активностью.
Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта, за счет того, что в качестве источника сырья используют измельченные стебли хны красильной (Lawsonia inermis L).
Способ иллюстрируется следующим примером.
0,5 кг сухих измельченных стеблей хны красильной заливают 2 л 60%-ного этанола (в соотношении 1:4) в колбе и настаивают в течение 12 ч с периодическим перемешиванием. Далее экстракт отфильтровывают и заливают заново 2 л этанола и проводят экстракцию в течение 12 ч с периодическим перемешиванием. Затем отфильтровывают, фильтраты объеди-няют и подвергают отгонке на роторном вакуумном испарителе до 1/3 части фильтрата. Фильтрат отстаивают в течение 2-х ч при ОС. Надосадочную жидкость отделяют от осадка и обрабатывают чистым хлороформом для удаления пигментов хлорофилла. Экстрагирование проводят до обесцвечивания хлороформа. Водный остаток выпаривают на водяной бане до густой массы и далее сушку ведут в вакууме при 60С в течение 4 ч. В результате получают аморфный порошок (субстрат) светло-коричневого цвета в количестве 50 г. 10 г сухого аморфного порошка растворяют в 20 мл смеси спирт: вода (1 : 1) и наносят на колонку из по-лиамидного сорбента - капрона (5см-150 см), заполненную влажным способом и промывают 5 л дистиллированной воды, собирая водные элюаты, качественно определяя отсутствие фла-воноидов. Затем промывание производят 60%-ным спиртом в количестве 5 л до отрицатель-ной реакции на флавоноиды. Полученный спиртовый раствор флавоноидов упаривают под вакуумом досуха при 60С. Затем взвешивают и получают 2,5 г суммы флавоноидов. Иден-тификацию флавоноидов проводят на основании качественных и цветных реакций на бу-мажных хроматограммах.
Таблица иллюстрирует зависимость выхода целевого продукта от соотношения травы и экстрагента и времени экстракции.

Количе-ство
Экстрак-ций Соотно-шение травы и экстраген-та Время экс-тракции, ч Выход субстрата из расчета 100 г сухо-го вещества, г Выход суммы фла-воноидов после ко-лонки, г
1 1 : 4 12 5,6
2 1 : 4 12 4,4 10,65 2,5
3 1 : 4 8 0,65
1 1 : 5 12 6
2 1 : 5 12 3,78 10,8 2,24
3 1 : 5 8 1,02
1 1 : 6 12 6,4
2 1 : 6 12 3,4 10,9 2,1
3 1 : 6 8 1,1


Как видно из таблицы, наиболее оптимальный выход суммы флавоноидов получается при соотношении 1:4. С увеличиванием растворителя выход балластных веществ увеличива-ется, что сказывается на качестве и выходе основного продукта суммы флавоноидов.
Наиболее целесообразно экстракцию флавоноидов проводить при 60%-ном этаноле. Снижение концентрации этанола ниже 60% приводит к извлечению полисахаридов. Наличие последних придает субстрату свойство гидроскопичности, что затрудняет его дальнейшую очистку в процессе выделения флавоноидов, хотя после трудоемкой и длительной очистки полученные флавоноиды качественно остаются без изменения.

Кроме того, снижение концентрации этилового спирта не приводит к увеличению суммы флавоноидов.
Увеличение концентрации этилового спирта более чем на 60% приводит к извлечению свободных сахаров, которые осложняют очистку суммы флавоноидов, но не сказывается на качестве. Кроме того увеличение концентрации этилового спирта приводит к уменьшению выхода флавоноидов на 0,2-0,4%.
Полученная сумма флавоноидов обладает гепатопротекторной активностью, что под-тверждается 100%-ным предупреждением гибели животных с подострым токсическим пора-жением печени CCI4, при введении полученной суммы флавоноидов в дозе 2 мг/кг в течение 30 сут.

Авторское свидетельство СССР № 540639, кл. А 61 К 35/78, 1965.