1,3-ОКСАТИОЛАН, ЕГО ГЕОМЕТРИЧЕСКИЕ И ОПТИЧЕСКИЕ ИЗОМЕРЫ, СМЕСИ ЭТИХ ИЗОМЕРОВ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ АНТИВИРУСНУЮ АКТИВНОСТЬ

Описаны соединения формулы:

где R1 представляет водород;
R2 представляет группу формулы:

Z представляет S, S=О или SO2,
и их фармацевтически приемлемые производные.
Кроме того, описано применение этих соединений в качестве противовирусных средств, фармацевтические составы и способы получения таких соединений.

Настоящее изобретение относится к новым замещенным циклическим 1,3-оксатиолана, обладающим фармакологической активностью, к способам их получения и промежуточ-ным соединениям, используемым при их получении, к содержащим эти производные фар-мацевтическим композициям и к использованию этих производных для лечения вирусных заболеваний млекопитающих.
Ретровирусные инфекции являются серьезной причиной заболеваний, и что примеча-тельно, синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД). Вирус иммунодефицита че-ловека (ВИЧ) признан этиологическим агентом СПИДа, и в связи с этим ведется активный поиск соединений, оказывающих ингибирующее действие на мультипкацию ВИЧ.
Mifsuya с сотр. сообщает о “3’-Азидо-3’-дезокситимидине (BW A509D) как о противо-вирусном срелстве, ингибирующем инфекционность и цитопатичное действие димфо-тропного вируса типа III Т-лимфоцитов человека, связанного с лимфоденопатией вируса in vitro”, Proc. Natl. Acad. Sci. США, 82, стр. 7096-7100 (1985), и ссылается на соединение формулы (А) (3’-азидо-2, 3-дидезоконтимидин, обычно называемый сокрашенно АЗТ. Это соединение, как указано, может быть использовано для некоторой защиты носителей СПИДа от цитопатогенного действия вируса иммунодефицита (ВИЧ).

(A)

В работе Mitsuya с сотр. “Ингибирование in vitro инфекционности и цитопатического действия лимфотропного вируса типа III Т-лимфоцитов человека, связанного с лимфоде-нопатией вируса (НТLV - III IL AV) с помощью 2 3-дидезокоинуклеозидов”, Proc. Natl. Acad. Sci. США, 86, стр. 1811-15 (1986) также ссылается на группу 2,3 - дидезоксинуклео-тидов, отраженных формулой (В), которые, как указано, обладают защитной активностью по отношению к вызванной ВИЧ цитопатогенности.
(B)
В работе Balgarini с сотр. “Сильное и селективное анти-HTLV - 111-LAV действие 2, 3-дидезоксицитидинена-2, 3-незамещенного производного 2, 3-дидезоксицитидина”, Biochem. Biophys. Res. Comm. 140, стр. 735-742 (1986) ссылается на ненасыщенный аналог таких нуклеозидов (2, 3-дидезоксицитидин, отраженный формулой (С), как характеризу-ющих противоретровирусной активностью.

(C)

В работе Baвa с сотр. “2, 3-дидезокситимидин и его 2, 3-ненасыщенное производное - сильные и селективные ингибиторы репликации вируса иммунодефицита человека in vitro”. Biochem. Biophys. Res. Coom. 142, стр. 128-34 (1987) ссылаются не 2, 3-незамещенный аналог, представленный формулой (D), 2, 3-дидезокситимидина. Этот ана-лог, как указано, является селективным ингибитором репликации ВИЧ.
(D)

Аналоги АЗТ, известные как 3-азидо-2, 3-дидезоксиуридины, представленные фор-мулой (Е), в которой у представляет бром или йод, как указано, обладают ингибирующим действием по отношению к лейкемии Молони мышей. См. Т.S. Lin с сотр. “Синтез и про-тивовирусная активность различных 3-азидо, 3-амино, 2, 3 ненасыщенных и 2, 3-дидезокси аналогов пиримидина, дезоксирибонуклеозидов по отношению к ретровиру-сам” J. Med. Chem. 30, стр.440-41 (1987).
(E)
И, наконец, 3’-фтораналоги 2, 3-дидезоксицитидна (формула (F)/ и 2, 3-дидезокситимидина /формула (G)/ указаны в работе Herdewijn с сотр. “3-замещенные ана-логи 2, 3-дидезоксинуклезидов в качестве потенциальных анти-ВИЧ (HTLV - III/LAV) агентов”, J.Med.Chem. 30, стр. 1270-1278 (1987), как обладающие сильной противоретрови-русной активностью.

(F) (G)

Таким образом, наиболее сильными из вышеперечисленных анти-ВИЧ соединений яв-ляются 2, 3-дидезоксинуклеозиды, более конкретно 2, 3-дидезоксицитидин (ddCyd) и 3-азидо-2, 3-дидезокситимидин (AzddThd или АЗТ). Эти же соединения активны и по от-ношению к другим видам ретровирусов, таким как вирус лейкемии Молони мышей. Вследствие роста случаев заболевания СПИДом с угрозой для жизни расширяются усилия, направленные на открытие и создание новых нетоксичных и мощных ингибиторов ВИЧ и веществ, блокирующих инфекционность ВИЧ. Таким образом, целью настоящего изобре-тения является создание эффективных анти-ВИЧ соединений с низкой токсичностью, а также создание легко доступного способа синтеза таких соединений.
Нами открыт структурно определенный класс соединений, а именно, 2-замещенных-5-замещенных-1,3-оксатиоланов, для которых обнаружена противоретровирусная актив-ность. В частности, было найдено, что эти соединения действуют как нетоксичные инги-биторы репликации ВИЧ-1 в Т-лимфоцитах продолжительные периоды времени.
Таким образом, в первом аспекте изобретения дается соединение формулы (1):



где R1 представляет водород; R2 представляет радикал, выбранный из:


Специалисту понятно, что соединения формулы (1) имеют по меньшей мере, два хи-ральных центра (обозначены в формелу (1) знаком *), вследствие чего существуют в виде двух пар оптических изомеров (т.е. энантиомеров) и их смесей, в том числе и рецемиче-ских смесей. Кроме того соединения формулы (1) могут являеться либо цис-изомерами (формула II), либо транс-изомерами (формула III) или смесью этих изомеров. Каждый из цис- и транс-изомеров может существовать как один из двух энантиомеров или в виде сме-си энантиомеров, в том числе и в виде рацемической смеси. Все эти изомеры и из смеси, включая рацемические смеси, включены в объем изобретения.


Соединения формулы (1) предпочтительно существуют в виде цис-изомеров.
Также понятно, что если Z представляет S=O, то соединения существуют в двух допол-нительных изомерных формах, представленных формулами (Па) и (Пв), отличающихся друг от друга конфигурацией оксидного атома кислорода относительно 2,5-заместителей. Соединения изобретения дополнительно охватывают такие изомеры и их смеси.



Предпочтительно R2 представляет радикал формулы:



где R3 и R4 принимают вышеуказанные значения.
Под “фармацевтически приемлемым производным” имеется в виду любая фармацевти-чески приемлемая соль, сложный эфир или соль такого сложного эфира соединения фор-мулы (1) или иного соединения, способного при ведении реципиенту образовывать прямо или косвенно соединение формулы (1) или его противовирусно активный метаболит или остаток.
Для специалиста очевидно, что соединения формулы (1) могут быть модифицированы с образованием его фармацевтически приемлемых производных по функциональным группам как в фрагменте основания R2, так и в гидроксиметильной группе оксатиоланово-го цикла. Модификации по этим функционаьным группам включены в объем изобретения. Однако, особый интерес представляют фармацевтически приемлемые производные (напр., сложные эфиры), полученные модифицированием 2-гидроксиметильной группы оксатио-ланового цикла.
Рекомендуемые сложные эфиры соединений формулы (1) включают соединения, в ко-торых R1 заменена карбоксильной функцией R-C=O, где некарбонильную часть R сложно-эфирной группы выбирают из: водорода, алкила нормального или изо-строения (например: метила, этила, н-пропила, трет-бутила, н-бутила), апкоксиалкила (например, метоксимети-ла), аралкила, (например, бензила), арилоксиалкила (напр., феноксиметила), арила (напр., фенила, возможно замещенного галогеном, С1-С4-алкилом или С1-С4-алкокси-группой); замещенного дигидропиридинила (напр., N-метилдигидропиридинила); сульфонатных эфиров, таких как алкил или аралкилсульфонил (напр., метальсульфонил); сульфатных эфиров; аминокислотных эфиров (напр.: L-валила или L-изолейцила) и моно-, ди- и три-фосфатных эфиров.
В число таких эфиров также включены эфиры, образованные из полифункциональных кислот, таких как карбоновые кислоты, содержащие более одного карбоксила, например, дикарбоновые кислоты формулы НО2С(СН2)n CO2OH, где n=1-10 (например, янтарная кис-лота) или фосфорные кислоты. Способы получения таких эфиров хорошо известны. См., например, Hahn с сотр., “Димеры нуклеотидов в качестве средств, направленных на вирус иммуннодефицита человека”, Nucleotide Analogues, стр. 156-159 (1989) и Busso с сотр., “Диметры нуклеотидов, подавляющих экспрессию ВИЧ in vitro”, AIDS Research and Human Retroviruses, 4 (6), стр. 449-455 (1988). При образовании эфиров из таких кислот каждая кислотная группа предпочтительно этерифицирована соединением формулы (1) или дру-гими нуклеозидами, или их аналогами и производными с образованием сложных эфиров формулы (IV):
(IV)

где W представляет РО4-, SРО3- или -О-СО-(СН2)n - СО-О, где J является остатком оксо- или аминопиримидинона, который может быть замещен низшим алкилом, или остаток 6’ -хлор или 6’ -гидроксипурина, R2 и Z имеют значения, указанные выше.
Что касается вышеописанных сложных эфиров, если нет особых указаний, то любой алкильный фрагмент преимущественно содержит 1-16 атомов углерода, предпочтительно 1-4 атома углерода и может содержать одну или несколько двойных связей. Любой ариль-ный фрагмент, присутствующий в таких эфирах, преимущественно представляет собой фенил.
В частности, это может быть С1-С16-алкиловый эфир, незамещенный бензоиловый эфир или бензоиловый эфир, замещенный по меньшей мере одним галогеном (бромом, хлором, фторм или йодом), насыщенным или ненасыщенным С1-С6-алкилом, насыщенной или не-насыщенной С1-С6-алкоксигруппой, нитрогруппой или трифторметилом.
Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (1) включают соли, образо-ванные с фармацевтически приемлемыми органическими или неорганическими кислотами и основаниями. Примеры приемлемых кислот включают: хлористоводородную, бромисто-водородную, серную, азотную, перхлорную, фумаровую, малеиновую, фосфорную, глико-левую, молочную, салициловую, янтарную, п-толуолсульфоновую, винную, уксусную, лимонную, метансульфоновую, бензойную, малоновую, нафталин-2-сульфоновую и бен-зол-сульфоновую кислоты. Другие кислоты, такие как щавелевая, хотя и не являясь фарма-цевтически приемлемыми, могут быть использованы для получения солей, применимых в качестве промежуточных продуктов для получения соединений изобретений и их фарма-цевтически приемлемых солей с кислотами.
Соли, образованные с соответствующими основаниями, включают: щелочнометалли-ческие соли (напр., натриевые), соли щелочноземельного металла (напр., магниевые), ам-мониевые соли и соли иона NR+4 (где R - С1-С4-алкил).
В последующем ссылки на соединение изобретения включают как соединения форму-лы (1), так и их фармацевтически приемлемые производные.
Конкретные примеры соединений формулы (1) включают: цис-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан и их смеси;
цис-2-бензоилоксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-бензоилоксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан и их смеси;
цис-2-гидроксиметил-5-(N4-ацетил-цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-гидроксиметил-5-(N4-ацетил-цитозир-1-ил)-1,3-оксатиолан и их смеси;
цис-2-бензоилоксиметил-5-(N4-ацетил-цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-бензоилоксиметил-5-(N4-ацетил-цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан и их смеси;
цис-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-3-оксо-1,3-оксатиолан;
цис-2-гидроксиметил-5-(N-диметиламино-метиленцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан;
бис-цис-2-сукцинилоксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан;
цис-2-бензоилоксиметил-5-(6-хлорпурин-N-9-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-бензоилоксиметил-5-(6-хлорпурин-N-9-ил)-1,3-оксатиолана и их смеси;
цис-2-гидроксиметил-5-(6-гидроксипурин-N-9-ил)-1,3-оксатиолан;
цис-2-бензоилоксиметил-5-(урацил-N-1-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-бензоилоксиметил-5-(урацил-N-1-ил)-1,3-оксатиолан и их смеси;
цис-2-гидроксиметил-5-(урацил-N-1-ил)-1,3-оксатиолан;
цис-2-бензоилоксиметил-5-(тимин-N-1-ил)-1,3-оксатиолан;
транс-2-бензоилоксиметил-5-(тимин-N-1-ил)-1,3-оксатиолан и их смеси;
цис-2-гидроксиметил-5-(тимин-N-1-ил)-1,3-оксатиолан;
цис-2-гидроксиметил-5-(5-фторцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан и их фармацевтически при-емлемые производные.
Соединения изобретения или сами обладают противовирусной активностью и/или спо-собны к метаболизму в такие соединения. В частности, эти соединения эффективны в ин-гибировании репликации ретровирусов, включая ретровирусы человека, такие как вирусы иммуннодефицита человека (ВИЧ), являющихся причиной возникновения СПИДа.
Таким образом, в качестве еще одного аспекта изобретения дается соединение формулы (1) или его фармацевтически приемлемое производное, предназначенное для применения в качестве актвиного терапевтического средства, в частности, противовирусного средства, например, для лечения ретровирусных инфекций.
В еще одном или альтернативном аспекте изобретения дается способ лечения вирусных заболеваний, в частности, вызванных ретровирусом инфекций, таким как ВИЧ у млекопи-тающих, в том числе и человека, способ заключается в введении эффективного количества противовирусного соединения формулы (1) или его фармацевтически приемлемого произ-водного.
Кроме того, еще в одном или альтернативном аспекте изобретения дается применение соединения формулы (1) или его фармацевтически приемлемого производного для приго-товления лекарства, предназначенного для борьбы с вирусными инфекциями.
Соединения изобретения также применимы для лечения связанных со СПИДом состо-яний, таких как: родственный СПИДу комплекс (ARC), стойкая генерализованная лимфо-денопатия (PGL), связанные со СПИДом невралогические состояния (такие как слабо-умие), состояния с анти-ВИЧ положительными антителами и состояния с ВИЧ-положительной реакцией, саркома Капоси, тробоцитопениа пурпура и условно-патогенные инфекции.
Соединения изобретения также применены для профилактики или развития до клини-ческого заболевания отдельных лиц, имеющих анти-ВИЧ антитела или ВИЧ-положительный антиген, а также для профилактики состояний после заражения ВИЧ.
Соединения формулы (1) или их фармацевтически приемлемые производные могут быть также использованы для предотвращения заражения вирусом биологических жидко-стей, таких как: кровь или семенная жидкость in vitro.
Отдельные соединения формулы (1) также применимы в качестве промежуточных со-единений при получении других соединений изобретения.
Для специалиста очевидно, что ссылки здесь на лечение распространяются и на профи-лактику, также как на лечение выявленных инфекций и симптомов.
Также понятно, что количество соединения изобретения, необходимое для лечения, будет меняться не только в зависимости от выбранного соединения, но также от пути вве-дения, природы подвергаемому лечению состояния, возраста и состояния больного, и пол-ностью находится в компетенции лечащего врача или ветеринара. Как правило, однако, приемлемая дозировка будет составлять интервал 1-750 мг/кг массы тела в день, например, 3-120 мг/кг массы тела реципиента в день, предпочтительно 6-90 мг/кг/день, наиболее предпочтительно 15-60 мг/кг/день.
Целевая дозировка может быть дана в виде разовой дозы или в виде раздельных доз, вводимых через соответствующие интервалы, например, в виде двух, терх, четырех и бо-лее субдоз ежедневно.
Соединение обычно вводят в единичной дозировочной форме, содержащей, например, 10-1500 мг, обычно 20-1000 мг, более обычно 50-700 мг активного компонента в единич-ной дозировочной форме.
В идеальном случае активный компонент необходимо ввести таким образом, чтобы пиковая концентрация активного компонента в плазме была 1-75 мкМ, предпочтительно 2-50 мкМ, наиболее предпочтительно 3-30 мкМ. Этого можно достигнуть, например, внут-ривенной инъекцией 0,1-5%-го солевого раствора активного компонента, возможно в со-левом растворе или введением в виде болюса, содержащего 0,1-110 мг/кг актвиного ком-понента. Целевые концентрации в крови могут быть достигнуты непрерывным вливанием с обеспечением 0,01-5 мг/кг/час или прерываемыми вливаниями, содержащими 0,4-15 мг/кг активного компонента.
Хотя в лечебных целях и возможно введение соединения изобретения в виде сырого химиката, тем не менее рекомендуется давать активный компонент в виде фармацевтиче-ского состава.
Таким образом, изобретением кроме того дается фармацевтический состав, содержащий соединение формулы (1) или его фармацевтически приемлемое производное в смеси с од-ним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями и, возможно, другими лечебными и/или профилактическими компонентами. Носитель(и) должен быть “приемле-мым” в смысле совместимости с другими компонентами состава и не оказывать вреда ре-ципиенту.
Фармацевтические составы включают составы, пригодные для перорального, ректаль-ного, назального, местного (в том числе трансбуккального и подъязычного), вагинального или парентерального (в том числе внутримышечного, подкожного и внутривенного) вве-дения или в форме, приемлемой для введения ингаляцией или инсуффляцией. Составы могут там, где это необходимо, быть введены в отдельных дозировочных формах и могут быть приготовлены любым хорошо известным в фармации способом. Все способы вклю-чают стадию смешивания активного соединения с жидкими носителями или мелко из-мельченными твердыми носителями, или с тем и другим с последующим, если необходимо формованием продукта в целевой состав.
Фармацевтические составы, пригодные для перорального введения, могут представ-лять собой дискретные единичные формы, такие как: капсулы, облатки, таблетки, в каждой из которых содержится заданное количество активного компонента, порошков или гранул, в виде растворов, суспензий или эмульсий. Активный компонент может также присут-ствовать в болюсе, электуария или пасте. Таблетки и капсулы для перорального введения могут содержать обычные добавки, такие как: связующие средства, наполнители, смазки, размельчители или смачивающие средства. На таблетки может быть нанесено хорошо из-вестными способами покрытие. Пероральные жидкие препараты могут иметь вид, напри-мер: водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или элксиров, или могут представлять собой сухой продукт, предназначенный для разбавления водой или другим приемлемым носителем перед употреблением. Такие жидкие препараты могут включать обычные добавки, такие как: суспендирующие средства, эмульгаторы, неводные носители (в том числе и пищевые масла) или консерванты.
Соединения изобретения могут быть также введены в парентеральные составы (напри-мер, для инъекции, такой как болюсная инъекция или непрерывное вливание), могут при-сутствовать в единичной дозировочной форме в ампулах, предварительно заполненных шприцах, вливаний небольшого объема или комплекте с несколькими дозами с добавлен-ным консервантом. Композиции могут представлять собой суспензии, растворы или эмульсии в масляном или водном носителе и могут включать вспомогательные средства, такие как: суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие средства. Или же активный компонент может представлять собой порошок, приготовленный асептическим выделением стерильного твердого компонента путем лиофилизаци раствора с последую-щим разбавлением перед употреблением приемлемым носителем, например, стерильной, не содержащей пирогена водой.
Для местного нанесения на эпидермий соединения изобретения могут быть приготов-лены в виде мазей, кремов, лосьонов или пластырей. Мази и кремы могут быть приготов-лены, например, на водной или масляной основе с добавлением приемлемого загустителя и/или гельобразующего средства. Лосьоны могут быть приготовлены на масляной или водной основе и кроме того, как правило, включают один или несколько эмульгаторов, стабилизаторов, диспергирующих средств, суспендирующих средств, загустителей или красителей.
Составы, пригодные для местного употребления в ротовой полости включают: ложи-джис, содержащий активный компонент во вкусовой основе, обычно сахарозе, камеди ака-ции или тригиканте; пастилки, содержащие активный компонент в инертной основе, та-кой как: желатин и глицерин или сахароза и камедь акации; и средство для полоскания рта, содержащее активный компонент в приемлемом жидком носителе.
Фармацевтические составы, пригодные для ректального введения и содержащие твер-дый носитель, наиболее предпочтительно имеют вид свеч с единичной дозой. Приемлемые носители включают: масло какао и другие материалы, обычно применяемые для этой цели, и свечи обычно готовят смешиванием активного соединения с размягченным или расплав-ленным носителем(ями) с последующим охлаждением и формованием в форме.
Составы для вагинального введения могут иметь вид: пессария, тампона, крема, геля, пасты, пены или состава для опрыскивания, содержащих кроме активного компонента та-кие носители, которые подходят для данной конкретной цели.
Для внутриназального введения соединения изобретения могут быть использованы в виде состава для впрыскивания или диспергируемого порошка, или в капельной форме.
Капельная форма может быть приготовлена на водной или неводной основе, содержа-щей кроме того одно или несколько диспергирующих средств, солюбилизирующих средств или суспендирующих средств. Жидкие составы для впрыскания обычно поступают из находящихся под давлением контейнеров.
При введении путем ингаляций соединения изобретения обычно поступают из инсуф-флятора, распылителя или находящегося под давлением контейнера, или иного обычного устройства для подачи аэрозольного состава. Находящиеся под давлением контейнера, или иного обычного устройства для подачи аэрозольного состава. Находящиеся под давлением контейнеры могут содержать приемлемый пропеллант, такой как: дихлордифторметан, трихлорфторметан, дихлортетрафторэтан, двуокись углерода или другой приемлемый газ. В случае находящегося под давлением аэрозоля единичная дозировка может быть задана с помощью предусмотренного клапана, подающего отмеренное количество смеси.
Или же для введения ингаляцией или инсуффляцией соединения изобретения могут иметь вид сухой порошковой композиции, например, порошковой смеси соединения и приемлемого порошкового основания, такого как: лактоза или крахмал. Порошковая ком-позиция может представлять собой единичную дозировочную форму, например: капсулы или патрона или, например, желатиновых или пузырьковых упаковок, из которых поро-шок может быть введен с помощью ингалятора или инсуффлятора.
При желании вышеописанные составы могут быть преобразованы в составы с про-дленным выделением активного компонента.
Фармацевтические композиции изобретения могут включать и другие активные ком-поненты, такие как: противомикробные средства или консерванты.
Соединения изобретения могут быть также использованы в сочетании с другими ле-чебными средствами, к примеру, с другими противоинфекционными средствами. В част-ности, соединения изобретения могут применяться вместе с известными противовирусны-ми средствами.
Таким образом, еще одним аспектом изобретения дается комбинация, включающая со-единение формулы (1) или его физиологически приемлемое производное в смеси с другим терапевтически актвным средством, в частности, противовирусным средством.
Выше указанные комбинации обычно предназначены для применения в виде фарма-цевтического состава, и таким образом, фармацевтические составы, содержащие вышеука-занные комбинации в смеси с фармацевтически приемлемым носителем, представляют еще один аспект изобретения.
Приемлемые терапевтические средства, предназначенные для таких комбинаций, включают: ациклические нуклеозиды, такие как: ацикловир, ганцикловир, интерфероны, такие как: альфа-, бета- и гамма-интерферон; глюкуронационные ингибиторы, такие, как пробеницид; ингибиторы переноса нуклеозида, такие как дипиридамол; аналоги нуклеози-дов, такие как: 3-азидо-2, 3-дидезокситимидин, 2, 3-дидезоксицитидин, 2, 3-дидезиоксиаденозин, 2, 3-дедезокситинозин, 2, 3-дидезокситимидин, 2, 3-дидезокси - 2, 3-дидегидротимидин и 2, 3-дидезокси-2, 3-дидегидроцитидин, а также рибавирин, им-муномодуляторы, такие как: интерлейкин 11(IL2) и фактор, стимулирующий колонию гра-нулоцитных макрофагов (GM-CSF), эритропойэтин, амплиген, тимомодулин, тимопентин, фоскарнет, ингибиторы гликозилации, такие как: 2-дезокси-D-глюкоза, кастаноспермин, 1-дезоксинойирмицин, ингибиторы связывания ВИЧ с рецепторами CD4, такие как: раство-римые CD4, фрагменты CD4 и гибридные молекулы CD4.
Отдельные компоненты таких комбинаций могут быть введены или по отдельности, или одновременно в виде отдельных или смешанных фармацевтических составов.
При использовании соединения формулы (1) или его фармацевтически приемлемого производного в сочетании со вторым терапевтическим средством, активным к тому же вирусу, доза каждого соединения может быть той же самой или отличаться от дозы, при-меняемой при отдельном использовании соединения. Необходимая доза может быть легко определена специалистом.
Соединения формулы (1) и их фармацевтически приемлемые производные могут быть синтезированы любым применяемым способом получения соединений аналогичного стро-ения.
Символы R1 и R2 в нижеследующих формулах имеют вышеприведенные значения, ес-ли нет особых указаний.
В одном из таких способов (А) используют реакцию 1,3-оксатиолана формулы (VIII):

где R1 представляет водород или защитную для гидроксила группу и L является способной к замещению группой или атомом, с соответствующим основанием R2-Н; приемлемые группы L включают: алкоксикарбонил, такой как этоксикарбонил или галогены, напри-мер: йод, бром или хлор, или радикал - OR, в ктором R представляет замещенный или незамещенный, насыщенный или ненасыщенный алкил, например, С1-С6-алкил, такой как метил или R представляет замещенный или незамещенный, алифатический или ароматиче-ский ацил, напр., алифатический С1-С6-ацил, такой как ацетил и ароматический ацил, та-кой как бензоил.
Соединение формулы (VIII) вводят в реакцию с соответствующим пуриновым или пи-римидиновым основанием формулы: R2-Н, (предварительно силилированным с помощью силилирующего агента, такого же как гексаметилдисилазан) в приемлемом растворителе, таком как хлористый метилен, в присутствии кислоты Льюиса (такой как: четыреххлори-стый титан или хлорид олова (IV) или триметилсилилтрифлата.
1,3-оксатиолан формулы (VIII) может быть приготовлен, например, реакцией альдеги-да формулы (VII) с меркаптоацеталем формулы (VI) в приемлемом органическом раство-рителе, таком как толуол, в присутствии кислотного катализатора, такого как: п-толуолсульфокислота или кислота Льюиса, напр., хлористый цинк.

(VI) HSCH2CH(OC2H5)2, C6H5COOCH2CHO (VII)

Меркаптоацеталь формулы (VI) может быть синтезирован известными способами. См., например, G. Hesse and J.Torder, “Меркаптоацетальдегид и диокси-1,4-дитиан”, Chem. Ber., 85, стр. 924-932 (1952).
Альдегид формулы (VII) может быть получен известными способами. См. например, E.G.Halloquist and H.Hibbert, “Исследования в области связанных с углеводами и полиса-харидами реакций. Часть XLIV. Синтез изомерных бициклических ацетальных простых эфиров”, Can. J. Research, 8, стр. 129-136 (1933).
Полученное соединение формулы (1) превращают в другое соединение формулы (1) путем взаимопревращения оснований. Подобное взаимопревращение может быть осу-ществлено либо простым химическим превращением (напр., превращением урацилового основания в цитозин) или ферментным путем использованием, например, дезоксирибози-лтрансферазы. Такие способы и условия их осуществления хорошо известны в области хи-мии нуклеозидов.
В другом способе соединения формулы (1) могут быть получены реакцией соединения формулы (IX):

где Р представляет защитную группу, с последующим удалением защитной группы.
Соединение формулы (IХ) может быть синтезировано реакцией приемлемого элоксида формулы (XI):

с соответствующим серосодержащим соединением, например, тиоацетатом натрия. Соеди-нения формулы (XI) либо известны, либо могут быть синтезированы по аналогичным ме-тодикам.
Многие из вышеприведенных реакций имеют обширную литературу в контексте син-теза пуриновых нуклеозидов. См., например, “Аналоги нуклеозидов: химия, биология и применение в медицине”, под ред. R.T.Walkeretal., Пленум Пресс, Нью-Йорк, стр.193-223, текст данной публикации вводится здесь в качестве ссылки.
Очевидно, что вышеприведенные реакции могут потребовать применения защитных групп или могут быть осуществлены с использованием исходных соединений с защищен-ными функциональными группами, вследствие чего для получения целевого соединения может оказаться необходимым удаление на промежуточной или конечной стадии защит-ной группы. Защита и снятие защиты с функциональных групп могут быть осуществлены с помощью обычных средств. Примеры приемлемых защитных для гидроксила групп включают: алкил (например, метил, трет-бутил или метоксиметил), аралкил (например, бензил, дифенилметил или трифенилметил), гетероциклические группы, такие как тетра-гидропиранил, ацил (например, ацетил или бензоил) и силильные группы, такие как три-алкилсилил (например, трет-бутилдиметилсилил). Защищающие гидроксил группы могут быть удалены обычными методами. Так, например, алкил, силил, ацил и гетероцикличе-ские группы могут быть удалены сольволизом, например, гидролизом в присутствии кис-лоты или основания. Аралкильные группы, такие как трифенилметил могут быть так же удалены сольволизом, например, кислотным или щелочным гидролизом. Аралкильные группы, такие как бензил могут быть отщеплены, например, обработкой эфиратом BF3 и уксусным ангидром с последующим удалением ацетатных групп, образующихся на соот-ветствующих стадиях синтеза. Силильные группы могут быть легко удалены использова-нием источника фторид-ионов, такого как тетра-н-бутиламмонийфторид.
В вышеописанных способах соединения формулы (1), как правило, образуются в виде смеси цис- и транс-изомеров.
Эти изомеры могут быть разделены, например, ацетилированием, например, обработ-кой уксусным ангидридом с последующим разделением физическими методами, например, хроматографией на силикагеле и дезацетилированием, например, обработкой метанольным раствором аммиака или же фракционной кристаллизацией.
Фармацевтически приемлемые соли соединений изобретния могут быть получены так, как описано в патенте США №4383114, описание которого вводится здесь в виде ссылки. Так, например, если необходимо получить соль соединения формулы (1) с кислотой, про-дукт, полученный по любому из вышеприведенных способов, может быть превращен в соль обработкой полученного свободного основания кислотой использованием обычных методик. Фармацевтически приемлемые соли с кислотами могут быть получены реакцией свободного основания с соответствующей кислотой, возможно в присутствии приемлемо-го растворителя, такого как: сложный эфир (например, этилацетат), спирта (напр.: метанол, этанол или изопропанол). Соли с неорганическими основаниями могут быть получены реакцией свободного основания соединения формулы (1) с соответствующим основанием, таким как алкоксид (например, метоксид натрия), возможно в присутствии растворителя, такого как спирт (например, метанол). Фармацевтически приемлемые соли могут быть также получены из других солей, в том числе других фармацевтически приемлемых солей соединений формулы (1) использованием обычных методик.
Соединение формулы (1) может быть превращено в фармацевтически приемлемый фосфат или иной сложный эфир в реакции фосфорилирующим агентом, таким как РОСI3 или приемлемым этерифицирующим агентом, таким как: галоидангидрид кислоты или ангидрид. Сложный эфир или соль соединения формулы (1) могут быть превращены в ис-ходное соединение, например, гидролизом.
Так, где соединение формулы (1) желательно иметь в виде отдельного изомера, тот мо-жет быть получен либо разделением конечного продукта, либо стереоспецифичным синте-зом из изомерно чистого исходного соединения или любого обычного промежуточного соединения.
Разделение конечного продукта, исходных или промежуточных соединений на изоме-ры может быть осуществлено любым известным способом. См., например, стереохимию соединений углерода, E.L.Eliel (МасГроу Хилл, 1962), а также таблицу разделяющих средств, S.H.Wilen.
Далее изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами, которые ни в коей мере не предназначены для его ограничения. Все температуры даны в градусах Цельсия.

ПРИМЕРЫ

Пример 1
Диэтилацеталь 2-тиобензоилацетальдегида

C6H5COS - CH2CH(OC2H5)2 (V)

К раствору трет-бутоксида калия (11,5 г, 0,11 моля) в ДМФА (100 мл) добавляют тиоб-ензойную кислоту (17 г, 0,11 моля) и раствор частично испаряют в вакууме, двумя после-довательными порциями добавляют бензол (2 х 30 мл) и каждый раз испаряют в вакууме. К остаточному раствору ДМФА добавляют диэтилацетель бромацетальдегида (20,3 г, 0,1 мо-ля) и смесь перемешивают 15 ч при 120°. После охлаждения смесь переносят в воду (500 мл), продукт экстрагируют эфиром (3 х 200 мл), экстракт промывают водным раствором NаНСО3, затем водой, сушат и растворитель удаляют в вакууме. Остаток разгоняют в ваку-уме и получают 17,2 г чистого соединения (V), т.кип. 131-133/0,07 мм.
1Н-ЯМР  (ч/млн, CDCI3): 7,97 (д, 2Н, ароматические), 7,47 (м, 2Н, ароматические), 4,59 (т, 1Н, -СН(ОС2Н5)2), 3,66 (м, 4Н, 2 х ОСН2СН3), 3,3 (д, 2Н, SCH2), 1,23 (т, 6Н, 2 х ОСН2СН3).

Пример 2
Диэтилацеталь меркаптоацетальдегида

HS CH2CH(OC2H5)2 (VI)

Описанный в предыдущем тиобензоилпроизводное (V) (17,2г) растворяют в 100 мл ТГФ, после чего добавляют 6 г NaOH в 20 мл Н2О. Смесь кипятят в атмосфере N2 15 ч, за-тем охлаждают, разбавляют водой (200 мл) и продукт экстрагируют эфиром (3 х 200 мл). Экстракт сушат, растворитель удаляют в вакууме и перегонкой остатка в вакууме получа-ют 7,1 г чистого соединения (VI), т.кип. 60-62/18 мм.
1Н-ЯМР  (ч/мин, С СI3): 4,51 (т, 1Н, СН(ОС2Н5)2), 3,51 (м, 4Н, 2 х ОСН2СН3), 2,65 (дв. д, 2Н, Н-СН2), 1,54 (т, 1Н, НS), 1,23 (т, 6Н, 2 х ОСН2СН3).

Пример 3
Бензоилоксиацетальдегид

С6Н5СООСН2СНО (VII)

Заглавное известное промежуточное соединение синтезировано ранее не описанным способом на основе известного 1-бензоилглицерина. А именно, 50 г последнего в смеси 500 мл СН2СI2 и 25 мл Н2О обрабатывают порциями 80 г NaIO4 (интенсивное перемеши-вание при комнатной температуре). По окончании прибавления перемешивание продол-жают еще 30 мин. Смесь фильтруют, фильтрат испаряют в вакууме и перегонкой остатка в вакууме получают 26 г чистого соединения (VII), т.кип. 92-94 (0,25 мм).
1Н-ЯМР (200 Мгц, CDCI3, ТМС - внутренний стандарт)  (ч/млн): 9,71 (с, 1Н, -СНО), 8,11 (ж, 2Н, ароматические), 7,6 (м, 1Н, ароматические), 7,46 (м, 2Н, ароматические), 4,88 (с, 2Н, -СН2СНО).
Пример 4
2-Бензоилоксиметил-5-этокси-1,3-оксатиолан

Ранее описанный ацеталь меркаптоацетальдегида (VI) (7 г) смешивают в 100 мл толуо-ла с 7 г вышеописанного бензоилоксиацетальдегида (VII), несколькими кристаллами п-толуолсульфокислоты и смесь нагревают в атмосфере N2 на масляной бане при 120. Обра-зующемуся этанолу позволяют отгоняться, смесь выдерживают при 120 еще 30 мин, затем охлаждают, промывают водным раствором NaHCO3, сушат и испаряют в вакууме. Пере-гонкой остатка в вакууме получают 9,8 г чистого соединения (XIII) в виде смеси цис- и транс-изомеров, т.кип. 140-143/0,1 мм, Rf 0,51 (гексан-EtOaC).
 (ч/млн, CDCI3) : 8,05 (м, 2Н, ароматические), 7,57 (м, 1Н, ароматический), 7,43 (м, 2Н, ароматические), 5,55 (м, 2Н, С2-Н, С5-Н), 4,55 (м, 2Н, С2-С6Н5СО2СН2), 3,8 (м, 1Н, С5-С6Н5СО2СН2), 3,76 (м, 1Н, С5-ОСН2СН3), 3,17 (м, 2Н, С4-Н2), 1,21 (т, 3Н, С5-ОСН2СН3).

Пример 5
Цис- и транс-2-Бензоилоксиметил-5-цитозин-1-ил-1,3-оксатиоланы



Смесь 2,7 г цитозина, 30 мл гексаметилдисилазана (ГМДС) и триметилсилилхлорида (ТМСХ) кипятят в сухом N2 до образования прозрачного раствора (3 часа) и избыток реа-гентов испаряют в вакууме. Оставшиеся летучие компоненты удаляют в глубоком вакууме (15 мин), твердый остаток переносят в 250 мл 1,2-дихлорэтана в сухом аргоне добавляют 5 г вышеописанного ключевого промежуточного соединения (XIII) в 50 мл дихлорэтана и затем 4,7 мл триметилсилилтрифлата (ТМСТФ). После трехдневного кипячения в токе ар-гона, смесь охлаждают и переносят в 300 мл насыщенного водного раствора NаНСО3. Ор-ганический слой отделяют, водную фазу экстрагируют СН2CI2 (2 х 100 мл), объединенные экстракты промывают водой, сушат и испаряют в вакууме. Остаток очищают хроматогра-фией на силикагеле с применением в качестве элюента СН2CI2-СН3ОН (9:1) и получают 2,5 г чистой смеси цис-/транс-(XIV) в отношении 1:1, что подтверждено даными 1Н-ЯМР. Смесь разделена в виде N-ацетилпроизводных по методике, описанной в нижеследующем примере.

Пример 6
Цис- и транс-изомеры 2-бензоилоксиметил-5-(N4-ацетилцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолана

(XV)

Описанную в предыдущем примере смесь (XIV) (2,5 г) в 100 мл сухого пиридина, со-держащего 0,1 г 4-диметиламинопиридина (ДМАП), обрабатывают уксусным ангидридом (7 мл) при комнатной температуре и спустя 6 ч переносят в холодную воду, после чего экс-трагируют СН2CI2 (3 х 150 мл). Экстракт промывают водой, сушат и испаряют в вакууме. К остатку добавляют толуол, затем испаряют в вакууме, остаточное масло очищают хрома-тографией на силикагеле (EtOAc-CH3ОН 99:1) и получают 1,35 г чистого транс- (XV) в виде более быстро вымываемого продукта и 1,2 г чистого цис-(XV) в виде медленно вы-мываемого продукта. Оба охарактеризованы 1Н-ЯМР спектроскопией. Транс-(XV), т.пл. 158-160, Rf 0,48 (EtОАс-СН3ОН 95:5).
УФ (СН3ОН) max : 297 нм
 (ч/млн, CDCI3) : 9 (уш., 1Н, С4 - Н-Ас), 8,06 (м, 2Н, ароматические), 7,74 (д, 1Н, С6 - Н), 7,56 (м, 1Н, ароматический), 7,47 (д, 1Н, С5-Н), 7,45 (м, 2Н, ароматические), 6,53 (дв. д, 1Н, С5-Н), 5,89 (дв. д, 1Н, С2-Н), 4,46 (дв. д, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5), 3,66 (дв. д, 1Н, С4-Н), 3,32 (дв. д, 1Н, С4-Н), 2,25 (с, 3Н, NН-СОСН3).
Цис-(XV), т.пл. 150-152, Rf : 0,4 (EtОАс-МеОН 95:5).
УФ (СН3Он), max : 297 нм
1Н-ЯМР  (ч/млн, CDCI3) : 9,03 (уш., 1Н, NН - Ас), 8,21 (д, 1Н, С6-Н), 8,05 (м, 2Н, аро-матические), 7,6 (м, 1Н, ароматический), 7,5 (м, 2Н, ароматические), 7,29 (д, 1Н, С5-Н), 6,34 (дв. д, С5-Н), 5,52 (дв. д, 1Н, С2-Н), 4,8 (дв. д, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5), 3,66 (дв. д, 1Н, С4-Н), 3,24 (дв. д, 1Н, С4-Н), 2,23 (с, 3Н, NН-СОСН3).

Пример 7
Цис- и транс-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиоланы

а) транс-(XVI). В 100 мл метанольного раствора аммиака при 24 растворяют 375 мг ранее полученного транс-(XV) и перемешивают 16 ч, после чего растворитель удаляют в вакууме, а остаток кристаллизуют из эфира и после перекристаллизации из смеси этанола с эфиром получают 174 мг чистого продукта, т.пл. > 220 (разл.), охарактеризованного 1Н - и 13С-ЯМР спектрами.
1H-ЯМР  (ч/млн), ДМСО-d6): 7,57 (д, 1Н, С6-H), 7,18 (д, 2Н, С4’NH2), 6,30 (дв. д, 1Н, С5-Н), 5,68 (д, 1Н, С5-Н), 5,48 (т, 1Н, С2-Н) 5,18 (т, 1Н, С2-СН2-ОН), 5,45 (м, 3Н, С2-СН2ОН + С4-Н), 3,06 (дв. д, 1Н, С4-Н).
УФ (СН3ОН) max : 297 нм
13С-ЯМР (ДМСО-d6, Вариан XL-300)  (ч/млн):
С2 С3 С5 С6 С5 С4 С2 CН2ОН
154,71 165,7 93,47 140,95 87,77 36,14 86,80 64,71
в) цис-(XVI). Обработкой по вышеприведенной методике 375 мг цис-(XV) получают 165 мг чистого продукта, перекристаллизованного из смеси этанола с эфиром, т.пл. 171-173, охарактеризованного 1Н- и 13С-ЯМР спектрами.
1Н-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6) : 7,8 (д, 1Н, С6-Н), 7,2 (д, 2Н, С4-NH2), , 18 (т, 1Н, С5-Н), 5,7 (д, 1Н, С5-Н), 5,14 (т, 1Н, С2-СН2ОН), 3,71 (м, 2Н, С2-СН2ОН), 3,4 (дв. д, 1Н, С4-Н), 2,99 (дв. д, 1Н, С4-Н).
УФ (СН3ОН) max : 270 нм.
13С-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6):
С2 С4 С5 С6 С5 С4 С2 CН2ОН
154,63 165,59 93,86 140,91 86,47 36,22 85,75 62,79

Пример 8
Цис-2-Гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-3-оксо-1,3-оксатиолан

Ранее полученный изомер цис-(XVI) (100 мг) в 30 мл охлажденного льдом метанола обрабатывают 93 мг м-хлорнадбензойной кислоты. После 15-ти минутного перемешивания выделяется белый осадок, который отделяют и промывают 10мл метанола с получением чистого изомера а сульфоксида. Метанольный фильтрат испаряют в вакууме, твердый остаток промывают 15 мл смеси этанола с эфиром (1:1) и затем 30 мл эфира с получением чистого изомера в сульфоксида. Оба изомера охарактеризованы 1Н-ЯМР спектерами

Изомер (XVII) a.
Т.пл. > 270 (разл.), Rf = 0,3 (СН2CI2 - МеОН 3:1).
УФ (СН3ОН) max : 270 нм.
 (ч/мл, ДМСО-d6) : 7,68 (д, 1Н, С6-Н), 7,36 (с, 2Н, C4 -NH2), 6,69 (дв., д, 1Н, С5-Н), 5,76 (д, 1Н, С5-Н), 5,47 (т, 1Н, С2-СН2ОН), 4,63 (дв. д, 1Н, С2-Н), 3,88 (м, 1Н, С2-СН-ОН), 3,72 (м, 1Н, С2-СН2-ОН), 3,36 (дв., д, 1Н, С4-Н), 3,05 дв. д, 1Н, С4-Н).

Изомер (XVII) в

Т.пл. > 220 (разл.), Rf = 0,32 (СН2CI2 - МеОН 3:1)  (ч/млн, ДМСО-d6) : 7,76 (д, 1Н, С6-Н), 7,28 (д, 2Н, C4 -NH2), 6,66 (дв. д, 1Н, С5-Н), 5,77 (д, 1Н, С5-Н), 5,45 (т, 1Н, С2-СН2ОН), 4,64 (т, 1Н, С2-Н), 3,77 (т, 2Н, С2-СН2ОН), 3,65 (дв. д, 1Н, С4-Н), 3,17 (дв., д, 1Н, С4-Н).

Пример 9
Цис-2-Гидроксиметил-5-(N-диметиламинометиленцитозин-1’-ил)-1,3-оксатиолан.


В 10 мл N-диметилформамид-диметилацеталя (ДМФА-диметилацеталь) суспендируют 300 мг цис-2-гидроксиметил-5-(цитозик-1-ил)-1,3-оксатиолана и смесь перемешивают при комнатной температуре около суток (18 часов). Летучие компоненты удаляют испарением при пониженном давлении и перекристаллизацией остатка из смеси этанола с эфиром по-лучают 345 мг (93%) чистого продукта, т.пл. 162-164; Rf=0,56 (CH2CI2-МеОН 4:1).
УФ max : 325 нм.
1H-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6) : 8,64 (1H, N=CH-N), 8,04 (д, 1Н, д, 1Н, С6’-Н, J = 7,2 Гц), 6,22 (т, 1Н, C5 -Н, J =4,9 Гц), 5,97 (д, 1Н, С5’-Н, J=7,2 Гц), 5,37 (т, 1Н, -ОН, J=5,8 Гц, D2O-обмен), 5,22 (т, 1Н, С2-Н, J=4,4 Гц), 3,77 (т, 2Н, С2-СН2ОН, J=4,9 Гц), 3,5 (дв. д, 1Н, С4-Н, J=4,9 и 9,9 Гц), 3,17 (с, 3Н,-сН3), 3,12 (дв, д, 1Н, С4-Н, J=4,2 и 11,9 Гц), 3,04 (с, 3Н, -СН3).

Пример 10
Бис-цис-2-сукцинилоксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан

В 10 мл сухого пиридина растворяют 284 мг цис-2-гидроксиметил-5-(N,N-диметиламинометиленцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолана и охлаждают в бане со льдом до ОС. Шприцем прибавляют 60 мкл сукцинилхлорида и перемешивают около суток (18 ча-сов). Затем смесь переносят в 50 мл насыщенного раствора NaHCO3, экстрагируют хлори-стым метиленом (з х 50 мл), объединенный раствор СН2CI2 промывают водой (2 х 50 мл) и сушат над MgSO4. После фильтрования растворитель удаляют испарением при понижен-ном давлении. Пенистый остаток растворяют в 10 мл CH2CI2, содержащих 5 мл метанола, добавляют 2 мл 80%-й водной уксусной кислоты и смесь перемешивают около суток при комнатной температуре. Затем смесь испаряют досуха и после очистки твердого остатка на силикагеле (CH2CI2-МеОН 4:1) получают 145 мг (54%) чистого продукта, т.пл. > 230C (разл.) Rf = 0,23 (CH2CI2-MeOH 4:1).
УФ (МеОН) max : 271 нм.
1H-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6 : 7,69 (д, 2H, 2 х С6-H, J=7,6 Гц), 7,28 (д, 4Н, xNH2,=24,9 Гц, D2O-обмен), 6,24 (т, 2Н, 2 x С5-Н, J=5,6 Гц), 5,76 (д, 2Н, 2 х С5‘-Н, J=7,4 Гц), 5,35 (т, 2Н, 2 х С2-Н, J=4,5 Гц), 4,37 (д, 2 х С2,-СН2О-), 3,42 (дв, д, 2 х С4-Н, J=5,5 и 10,9 Гц), 3,1 (дв. д, 2Н, 2 х С4-Н, J=5,6 и 11,7 Гц), 2,6 (с, 4Н, 2х -СН2-С-О).

Пример 11
Цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(6-хлорпурин-N-9-ил)-1,3-оксатиоланы


В 50 мл гексаметилдисилазана (ГМДС), содержащих 50 мг (NH4)2SO4 кипятят 1,7 г 6-хлорпурина до момента образования прозрачного раствора (1 час). Избыток ГМДС удаляют при пониженном давлении, маслянистый остаток сушат 1 ч в глубоком вакууме и затем растворяют в 100 мл сухого 1,2-дихлорэтана.
В круглодонной колбе на 500 мл двукратным испарением с 50 мл бензола сушат 2,7 г 2-бензоилоксиметил-5-этокси-1,3-оксатиола (XIII) и затем растворяют в 200 мл сухого 1,2-дихлорэтана.
Затем с помощью канюли в атмосфере аргона переносят раствор силилированного 6-хлорпурина в раствор 1,3-оксатиолана. В реакционную колбу добавляют 11 мл 1М ТМС-трифлата (триметилсилилтрифторметансульфо-ната), кипятят 5 часов и охлаждают до ком-натной температуры. Затем смесь переносят в 300 мл насыщенного раствора бикарбоната натрия (ратсвор NaHCO3) при перемешивании, органический слой отделяют, а водную фазу экстрагируют СН2CI2 (2 х 100 мл). Объединенную органическую фазу промывают водой, сушат над MgSO4, фильтруют и испаряют при пониженном давлении. Очисткой и разделением остатка на силикагеле (гексан-этилацетат 7:3) получают 1,05 (28% менее по-лярного продукта в виде пены, идентифицированного как альфа- или транс-изомер, и 710 мг другого компонента, идентифицированного как бета- или цис-изомер. Общий выход 46,1%, отношение цис-/транс-1:1,4.
транс-изомер (-изомер): Rf =0,43 (гексан-EfOAc 1:1)
УФ (МеОН) max : 264,7 нм.
1Н-ЯМР (CDCI3) : 8,76 (с, 1Н, С8’-Н), 8,48 (с, 1Н, С2’-Н), 8,06 (м, 2Н, ароматические), 7,56 (м, 1Н, ароматический), 7,45 (м, 2Н, ароматические), 6,9 (дв. д, 1Н, С5-Н, J = 5 Гц), 5,78 дв. д, 1Н, С2-Н, J=6 Гц), 4,56 (м, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5), 3,74 (м, 2Н, С4-Н).
цис-изомер (-изомер): Rf = 0,35 (гексан-EtOAc 1:1)
УФ (МеОН) max : 264,7 нм.
1Н-ЯМР (CDCI3) : 8,72 (с, 1Н, С8-Н), 8,51 (с, 1Н, С2’-Н), 8 (м, 2Н, ароматические), 7,56 (м, 1Н, ароматический), 7,44 (м., 2Н, ароматические), 6,61 (т, 1Н, С5-Н, J = 4,7 Гц), 5,62 (т, 1Н, С2-Н, J=4,9 Гц), 4,69 (м, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5), 3,66 (м., 2Н, С4-Н).

Пример 12
Цис-2-Гидроксиметил-5-(6-гидроксипурин- -9-ил)-1,3-оксатиолан (производное ино-зина)

В 25 мл этанола растворяют 533 мг цис-2-бензоилоксиметил-5-(6-хлорпурин-N-9-ил)-1,3-оксатиолана, к раствору добавляют 5 г гидроксида натрия (NaOH) и 3 мл воды и смесь кипятят 5 часов. Охлажденную до комнатной температуры смесь затем разбавляют 100 мл воды, нейтрализуют пиридиниевой смолой и фильтруют. Остаток смолы промывают 100 мл метанола, объединенный фильтрат испаряют при пониженном давлении. Очисткой остатка на силикагеле (CH2CI2-МеОН 4:1) получают 183 мг (51%) чистого продукта, иден-тифицированного как производное инозина, т.пл. 208-210С. Rf = 0,27 (EtOAc-МеОН 4:1).
УФ (МеОН) max : 246 нм.
1Н-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6) : 12,42 (с, 1Н, - NH, D2О-обмен), 8,36 (с, 1Н, С8’-Н), 8,07 (c, 1H, C2’-1H), 6,37 (т, 1H, C5-H, J =5,1 Гц), 5,29 (т, 1Н, -ОН, J = 6 Гц, D2О-обмен), 5,24 (т, 1Н, С2-Н, J = 4,9 Гц), 3,63 (м, 4Н, 2Н от С4-Н и 2Н от СН2-ОН).

Пример 13
Цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(урацил-N-1-ил)-1,3-октиолан



В 30 мл ГМДС в присутствии 50 мг (NH4)2SO4 кипятят 760 мг урацила до момента, пока раствор не станет прозрачным. Затем смесь испаряют при пониженном давлении, остаток сушат 1 час в высоком вакууме и растворяют в 100 мл сухого 1,2-дихлорэтана.
В круглодонной колбе на 500 мл двукратным испарением с 50 мл бензола сушат 1,5 г 2-бензоилоксиметил-5-этокси-1,3-оксатиолана и растворяют в 150 мл сухого 1,2-дихлорэтана.
С помощью канюли в атмосфере аргона раствор силилированного урацила переносят в раствор оксатиолана, добавляют 1,5 мл ТМС-трифлата и реакционную смесь кипятят 48 часов в атмосфере аргона. Охлажденную до комнатной температуры смесь переносят в насыщенный раствор NaHCO3 (30 мл), органический слой отделяют, водную фазу дважды экстрагируют СН2CI2 (2х100 мл). Объединеный органический слой промывают водой (2х200 мл), один раз раствором NaCI (1х150 мл) и сушат над MgSO4.
После фильтрования растворитель удаляют в вакууме и очисткой остатка на силикаге-ле (гексан-Et Oac 1:1) получают 594 мг (32%) чистого продукта.
Продукт дает только одно пятно в ТСХ. Однако 1Н-ЯМР спектр показывает присут-ствие двух изомеров (цис- и транс-) в отношении 1:1,2, которые не были разделены на дан-ной стадии. Rf=0,35 (гексан-EtОАс 3:7).
УФ (МеОН) max : 261 нм.
1Н-ЯМР (CDCI3) : 8,88 (уш, с, 1Н, N3-H), 8,05 (м, 2Н, ароматические), 7,71 (д, 1Н, С6-Н-цис, J=8,2 Гц), 7,57 (м, 1Н, ароматический), 7,45 (м, 3Н, ароматические и N3-H), 6,55 (дв. д, 1Н, С5-Н-транс, J=2,4 b 5,4 Гц), 6,35 (дв. д, 1Н, С5-Н-цис, J=4,1 и 5,6 Гц), 5,79 (т, 1Н, С2-Н-транс, J=5,4 Гц), 5,73 (д, 1Н, С5’-H, J=8,2 Гц), 5,57 (д, 1Н, С5’-H, J=8,2 Гц), 5,46 (т, 1Н, С2-Н-цис, J=3,9 Гц), 4,73 (д, 2Н, -СН2О-СОС6Н5), 4,45 (т, 2Н, -СН2ОСОС6Н5), 3,57 (м, 1Н, С4-Н), 3,17 (м, 1Н).

Пример 14
Цис-2-Гидроксиметил-5-(урацил-N-1-ил)-1,3-оксатиолан



В 75 мл метанольного раствора аммиака растворяют 300 мг смеси цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(урацил-N-1-ил)-1,3-оксатиолана и смесь перемешивают около суток при комнатной температуре. После испарения растворителя досуха остаток очищают и разделяют на два изомера хроматографией на силикагеле (EtОАс-МеОН 98:2).
Преобладающий продукт, выделенный в качестве твердого вещества, идентифициро-ван как цис-изомер.
цис-изомер. Т.пл. 162-164С. Rf=0,57 (EtОАс-МеОН 95:5).
УФ (МеОН) max : 261,4 нм.
1Н-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6) : 11,36 (с, 1Н, - N3-Н), 7,88 (д, 1Н, С6-Н, J = 8,1 Гц), 6,18 (т, 1H, C5-H, J=4,8 Гц), 5,62 (д, 1H, C5-H, J =8,1 Гц), 5,33 (т, 1Н, C2-Н, J = 5,7 Гц), 5,17 (т, 1Н, OН, D2O-обмен), 3,72 (т, 2Н, С2-СН2-ОН, J=4,6 Гц), 3,41 (дв. д, 1Н, С4-Н, J=5,7 и 12 Гц), 3,2 (дв, д, 1Н, С4-Н, J=4,6 и 9,8 Гц).

Пример 15

Цис- и транс-2-Бензоилоксиметил-5-(тимин-N-1-ил)-1,3-оксатиоланы


В 50 мл ГМДС, содержащих 50 мг (NH4)2SO4, кипятят 1,7-тимина до момента, пока рас-твор не станет прозрачным. Затем смесь испаряют при пониженном давлении. Остаток сушат 1 час в глубоком вакууме и растворяют в 150 мл 1,2-дихлорэтана.
Двукратным испарением с 75 мл бензола сушат 3 г 2-бензоилоксиметил-5-этокси-1,3-оксатиолана и растворяют в 150 мл сухого 1,2-дихлорэтана.
Раствор силилированного тимина через канюлю в атмосфере аргона переносят в рас-твор оксатиолана и в реакционную смесь через канюлю в атмосфере аргона вводят 3,3 мл ТМС-трифлата (триметилсилил-трифата в 30 мл сухого 1,2-дихлорэтана. Раствор кипятят в атмосфере аргона 36 часов, охлаждают до комнатной температуры и переносят в 30 мл насыщенного водного раствора NaHCO3). Органический слой отделяют и водную фазу дважды экстрагируют хлористым метиленом (2 х 100 мл). Объединенную органическую фазу дважды промывают водой (2х200 мл), один раз раствором NaCI (1 х 150 мл) и сушат над MgSO4. Раствор фильтруют, фильтрат испаряют в вакууме и хроматографией остатка на силикагеле (гексан-EtOAc 1:1) получают 1,3 г (35%) чистого продукта.
Продукт дает только одно пятно в ТСХ, но 1Н-ЯМР спектр показывает наличие двух изомеров (цис- и транс) в отношении 1:1,2. Rf=0,3 (гексан-EtОАс).
УФ (МеОН) max : 266 нм.
1Н-ЯМР (ч/млн, CDCI3) : 8,6 (уш, с, N3-H), 8,06 (м, 2Н, ароматические), 7,59 (м, 1Н, ароматический), 7,49 (м, 2Н, ароматические), 7,38 (д, 1Н, С6-цис, J=1,3 Гц), 7,28 (д, 1Н, С6-транс, J=1,3 Гц), 6,55 (дв. д, 1Н, С5-Н-транс-изомер. J=3,1 и 5,6 Гц), 6,38 (т, 1Н, С5-H-цис-изомер, J=5,5 Гц), 5,78 (дв., д, 1Н, С2-H-транс, J=4,4 и 6,4 Гц), 5,46 (т, 1Н, С2-Н-цис-изомер, J=4,3 Гц), 4,69 (д, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5, J=4,2 Гц), 4,45 (м, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5), 3,58 (м, 1Н, С4-Н), 3,13 (м, 1Н С4-Н), 1,93 (д, 1Н, С5-СН3-транс-изомер, J=1,2 Гц), 1,78 (д, 1Н, С5-СН3-цис-изомер, J=1,2 Гц).

Пример 16

Цис-2-Гидроксиметил-5-(тимин-N-1-ил)-1,3-оксатиолан

В 100 мл насыщенного метанольного раствора аммиака растворяют 500 мг смеси цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(тимин-N-1-ил)-1,3-оксатиоланов (XXIV) и смесь перемеши-вают около суток (18 часов) при комнатной температуре. После испарения смеси при по-ниженном давлении остаток разделяют на силикагеле (EtОАс-МеОН 98:2).
Менее полярный продукт идентифицирован как цис-изомер, т.пл. 167-168С. Rf=0,66 (EtОАс-МеОН 95:5).
УФ (МеОН) max : 266 нм.
1Н-ЯМР  (ч/млн, ДМСО-d6) : 11,38 (с, 1Н, - N3-Н), 7,73 (д, 1Н, С’-Н, J = 1,1 Гц), 6,16 (т, 1H, C5-H, J=5,5 Гц), 5,31 (т, 1H, C2-H, J =5,9 Гц), 5,14 (т, 1Н, OН, D2O-обмен), 3,7 (т, 2Н, С2-СН2-ОН, J=5,1 Гц), 3,36 (дв. д, 1Н, С4-Н, J=5,7 и 1,7 Гц), 3,16 (дв. д, 1Н, С4-Н, J=5,5 и 11,7 Гц) 1,75 (д, 3Н, С5-СН3, J=1,7 Гц).

Пример 17
Малеат цис-5-(4-амино-1,2-дигидро-2-оксо-1-пиримидинил)-1,3-оксатиолан-2-метанола
Смесь цис-5-(4-амино-1,2-дигидро-2-оксо-1-пиримидинил)-1,3-оксатиолан-2-метанола (1,0 г, 4,6 ммоля) и малеиновой кислоты (506 мг, 4,36 ммоля) в промышленном метилиро-ванном спирте (IMS 320 мл) нагревалась до температуры дефлегмации. Получающийся в результате прозрачный раствор концентрировался с помощью перегонки из 140 мл раство-рителя, а затем охлаждался до 5С. С помощью фильтрования отделялось белое кристалли-ческое твердое вещество, промывалось IMS (15 мл) и сушилось в вакууме при 40С, давая цис-5-(4-амино-1,2-дигидро-2-оксо-1-пиримидинил)-1,3-оксатиолан-2-метанол малеат (1,22 г), т.пл. 187С.
Найдено: С 41,7 Н 4,4, N 12,1%
С8H11N3O3 . C4H4O4.
Вычислено: С 41,7, н 4,4 N 12,2%

Пример 18
Хлоргидрат цис-5-(4-амино-1,2-дигидро-2-оксо-1-пиримидинил)-1,3-оксатиолан-2-метанола
Раствор цис-5-(4-амино-1,2-дигидро-2-оксо-1-пиримидинил) 1,3-оксатиолан-2-метанола (1,0 г, 4,6 ммоля) в промышленном метилированном спирте (IMS 320 мл) обрабатывался при дефлегмации раствором концентрированной соляной кислоты (160 мг, 4,36 ммоля) в IMS (8 мл). Смесь затем охлаждалась до ОС. Получающееся в результате белое кристалли-ческое твердое вещество отделялось с помощью фильтрования, промывалось IMS (5 мл) и сушилось в вакууме при 40С, давая хлоргидрат цис-5-(4-амино-1,2-дигидро-2-оксо-1-пиримидинил)-1,2-оксатиолан-2-метанола (912 г), т.пл. 192С.

Найдено: С 36,2 Н 4,7 N15,9%
C8H11N3O3 HCI. Вычислено: С, 36,2 Н 4,55,
N15,8%

Пример 19
Цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(5-азацитозин-N-1-ил)-1,3-оксатиоланы

5-азацитозин (2:0 г) нагревали с обратным холодильником в HMDS (50 мл), содержа-щем каталитическое количество (NH4)2SO4 (50 мг) до тех пор, пока раствор не становился чистым. Смесь выпаривали досуха. Остаток высушивали в высоком вакууме в течение 1 часа и растворяли в сухом дихлорметане (100 мл).
2-бензоилоксиметил-5-этокси-1,3-оксатиолан высушивали путем двукратного совмест-ного выпаривания с бензолом (2х50 мл) в 500-мл колбе с круглым дном и растворяли в су-хом дихлорметане (150 мл).
Силилированный раствор 5-азацитозина переносили в раствор оксатиолана посред-ством канюли в атмосфере аргона с последующим добавлением раствора триметилсили-лтрифторметансуль фоната (TMS-трифлат, 3,5 мл) в дихлорметане (20 мл). Смесь нагревали с обратным холодильником 24 часа, охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщенный водный раствор NaHCO3 (300 мл). Органическую фазу собирали. Водную фазу экстрагировали метиленхлоридом (2х100 мл). Объединенные экстракты промывали водой (2 х 200 мл), один раз раствором NaCI (100 мл) и высушивали сульфатом магния. После фильтрации, фильтрат выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали на силикагеле, в качестве элюента используя EtOAc-MeOH (95:5). Получали 1,6 г (34%) чи-стого твердого продукта, который обнаруживал только одно пятно на ТСХ, но 1Н-ЯМР-спектр показал присутствие цис- и транс-изомеров в отношении 1:1,2.
1Н-ЯМР (CDCI3):  (ppm):
8,41 (с, 1Н, С6-Н, цис-изомер),
8,26 (с, 1Н, С6-Н, транс-изомер),
7,95 (м, ароматич.),
7,54 (м., ароматич.),
6,36(дд, 1Н, С5-Н,транс-изомер, J=1,9 и 5,0 Гц),
6,17 (т, 1Н, С5-Н, цис-изомер),
6,05 (т, 1Н, С2-Н, транс-изомер),
5,53 (т, 1Н, С2-Н, цис-изомер),
4,68 (м, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5 цис-изомер),
4,42 (м, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5 транс-изомер),
3,54 (м, 2Н, С1-Н, цис и транс),
3,36 (м, 2Н, С4-Н, цис и транс).

Пример 20
Цис- и транс-2-гидроксиметил-5-(5-азацитозин-N-1-мл)-1,3-оксатиоланы

Смесь цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(5’-азацитозин-N-1-ил)-1,3-оксатиоланов (505 мг) растворяли в метанольном аммиаке (100 мл) и перемешивали при комнатной тем-пературе в течение 18 часов. Раствор выпаривали досуха. Остаток обрабатывали дважды диэтиловым эфиром (2 х 50 мл) и декантировали. Твердый остаток перекристаллизировали в метаноле и кристаллы собирали путем фильтрации. Продукт идентифицировали как чи-стый цис-изомер.
Цис-изомер:
Т.пл. > 210С (разлож.)
УФ:  макс. (МеОН) : 243 нм
1Н-ЯМР (ДМСО-d6):  (ppm):
8,62 (с, 1Н, С6-Н),
7,53 (шс, 2Н, - NH2),
6,12 (дд, 1Н, С5-Н),
5,40 (т, 1Н, -ОН),
5,20 (т, 1Н, С2-Н, J=3,9 Гц),
3,75 (м, 2Н, С2-СН2ОН),
3,45 (дд, 1Н, С4-Н, J=5,3 Гц),
3,25 (дд, 1Н, С4-Н, J=3,5 Гц).
Другой продукт был получен в виде пенистого вещества и идентифицирован как транс-изомер. Транс-изомер:
1Н-ЯМР (ДМСО-d6):  (ppm):
8,25 (с, 1Н, С6-Н),
7,58 (шс, 2Н, - NH2),
6,29 (дд, 1Н, С5-Н, J=3,1 и 4,9 Гц),
5,65 (т, 1Н, С2-Н, J=5,2 Гц),
5,44 (шс, 1Н, -ОН),
3,49 (м, 3Н, 2Н от С2-СН2ОН и 1Н от С4-Н),
3,24 (м, 1Н, С4-Н).

Пример 21
Цис- и транс 2-бензоилоксиметил-5-(8-азаденин-N-9-ил)-1,3-оксатиоланы и цис и транс 2-бензоилоксиметил-5-(8’-азааденин-N-8’-ил)-1,3-оксатиоланы.

Суспензию 8-азааденина (1,00 г, 7,348 мМ) и сульфата аммония (30 мг) в HMDS (30 мл) нагревали с обратным холодильником в течение ночи (16 часов). Прозрачный раствор концентрировали при пониженном давлении. Белый твердый остаток высушивали в высо-ком вакууме в течение 2 часов, растворяли в свежедистиллированном 1,2-дихлорэтане (30 мл) и переносили в атмосфере аргона посредством канюли в раствор 2-бензоилокси метил-5-метилкарбонат-1,3-оксатиолана (1,461 г, 4,90 мМ) в безводном 1,2-дихлорэтане (50 мл). Затем добавляли TMS-трифлат (1,42 мл, 7,348 мМ) и полученную смесь нагревали с обрат-ным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 дней, затем охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщенный водный раствор NaHCO3 (100 мл). Органическую фазу отделяли, а водную фазу экстрагировали метиленхлоридом (3 х 50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл), осушали безводным суль-фатом магния, фильтровали, и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очи-щали путем флеш-хроматографии на силикагеле, элюируя СН2CI2: МеОН (98:2), в резуль-тате чего получали 0,875 г (49,6%) светло-желтого твердого вещества, который обнаружи-вал только одно пятно на ТСХ, но 1Н-ЯМР - спектр показал присутствие двух N-9-изомер, цис- и транс-2-безоилоксиметил-5-(8-азааденин-N-9-ил)-1,3-оксатиолан.
N-9’-региоизомеры:
УФ:  макс. (EtОН) : 280, 19 нм
1Н-ЯМР (CDCI3) : б (ppm):
8,50 (с, 1Н, С2-Н, цис-изомер),
8,46 (с, 1Н, С2Н, транс-изомер),
8,03 (м, 4Н, ароматич.),
7,57 (м, 2Н, ароматич.),
7,44 (м, 4Н, ароматич.),
7,08 (дд, 1Н, С5-Н, J=2,97 и 6,14 Гц, транс-изомер),
6,73 (дд, 1Н, С5-Н, J=5,53 и 6,53 Гц, цис-изомер),
6,64 (шс, 4Н-NH2),
5,89 (дд, 1Н, С2-Н, J=4,15 и 5,59 Гц, транс-изомер),
5,72 (т, 1Н, С2-Н, J=5,37 Гц, цис-изомер),
4,64 (т, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5, J=5,76, цис-изомер),
4,60 (д, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5, J=5,32, транс-изомер),
4,37 (дд, 1Н, С4-Н, J=6,53 и 11,42 Гц, цис-изомер),
4,04 (дд, 1Н, С4-Н, J=3,14 и 11,81 Гц, транс-изомер),
3,79 (дд, 1Н, С4-Н, J=6,14 и 11,6 Гц, цис-изомер),
3,61 (дд, 1Н, С4-Н, J=5,52 и 11,45 Гц, транс-изомер).
Другой продукт получали в виде желтого маслянистого продукта (0,313 г, 17,7%) и идентифицировали как два N-8’-региомера, цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(8-азааденин-N-8-ил)-1,3-оксатиолан.
N-8’-региоизомеры:
УФ:  макс. (EtОН) : 295 нм
1Н-ЯМР (CDCI3) :  (ppm):
8,50 (с, 1Н, С2-Н, цис-изомер),
8,46 (с, 1Н, С2Н, транс-изомер),
8,03 (м, 4Н, ароматич.),
7,57 (м, 2Н, ароматич.),
7,44 (м, 4Н, ароматич.),
7,08 (дд, 1Н, С5-Н, J=2,97 и 6,14 Гц, транс-изомер),
6,73 (дд, 1Н, С5-Н, J=5,53 и 6,53 Гц, цис-изомер),
6,64 (шир.с., 4Н-NH2),
5,89 (дд, 1Н, С2-Н, J=4,15 и 5,59 Гц, транс-изомер),
5,72 (т, 1Н, С2-Н, J=5,37 Гц, цис-изомер),
4,64 (т, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5, J=5,76, цис-изомер),
4,60 (д, 2Н, С2-СН2ОСОС6Н5, J=5,32, транс-изомер),
4,37 (дд, 1Н, С4-Н, J=6,53 и 11,42 Гц, цис-изомер),
4,04 (дд, 1Н, С4-Н, J=3,14 и 11,81 Гц, транс-изомер),
3,79 (дд, 1Н, С4-Н, J=6,14 и 11,6 Гц, цис-изомер),
3,61 (дд, 1Н, С4-Н, J=5,52 и 11,45 Гц, транс-изомер).

Пример 22
Цис- и транс-2-гиддроксиметил-5-(8-азаадении-N-9-ил)-,3-оксатиоланы

Раствор цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(8-азааденин-N-9-ил)-1,3-оксатиоланов (0,285 г, 0,7908 мМ) в метаноловом аммиаке (50 мл) размешивали в течение 1 дня при ком-натной температуре. Эту смесь концентрировали при пониженном давлении, и твердый остаток очищали с помощью флеш-хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом МеОН (1 % —— 6 %) в CH2CI2, в результате чего получали 0,079 г цис-изомера и 0,084 г транс-изомера в виде белых твердых веществ. Полный выход составлял 81%.
Цис-изомер:
Т.пл. 203-204С, УФ:  макс. (МеОН) : 278 нм,
Rf: 0,31 (CH2CI2:MeOH 9:1),
1Н-ЯМР (ДМСО-d6) :  (ppm):
8,54 (шир.с., 1Н, NН2),
8,33 (с, 1Н, С2 -Н),
8,20 (шир.с., 1Н, -NH2),
7,69 (т, 1Н, С5-Н, J=6,38 Гц),
5,34 (т, 1Н, С5-Н, J=5,53 Гц),
5,22 (т, 1Н, -ОН, J=5,74 Гц),
4,05 (дд, 1Н, С4-Н, J=6,93 и 11,05 Гц),
3,63 (м, 2Н, С2-СН2ОН),
3,50 (дд, 1Н, С4-Н, J=5,44 и 11,32 Гц),
13С-ЯМР (ДМСО-d6) : б (ppm): 157,153; 156, 119; 149, 049; 123, 631; 87,674; 85, 339; 64,137; 32,846.
Транс-изомер:
Т.пл. > 213-214С, УФ:  макс. (МеОН) : 278 нм,
Rf: 0,24 (CH2CI2:MeOH 9:1),
1Н-ЯМР (ДМСО-d6) :  (ppm):
8,53 (шир.с., 1Н, NН2),
8,33 (с, 1Н, С2 -Н),
8,18 (шир.с., 1Н, -NH2),
7,01 (дд, 1Н, С5-Н, J=3,24 и 6,54 Гц),
5,35 (т, 1Н, С2-Н, J=4,97),
5,55 (т, 1Н, -ОН, J=6,05),
3,89 (дд, 1Н, С4-Н, J=3,24 и 11,53 Гц),
3,67 (м, 3Н, С2-СН2ОН и С4-Н).

Пример 23
Цис- и транс-2-гидроксиметил-5-(8-азааденин-N-8-ил)-1,3-оксатиолан

Раствор цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(8-азааденин-N-8-ил)-1,3-оксатиоланов (0,300 г, 0,8324 мМ) в метаноловом аммиаке (50 мл) размешивали 30 часов при комнатной температуре. Смесь концентрировали при пониженном давлении, и твердый остаток очи-щали с помощью флеш-хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента гради-ент МеОН (2%—6%) в СН2CI, в результате чего получали 0,037 г цисиомера, 0,058 г транс-изомера, и 0,095 г смеси изомеров в виде бледножелтых твердых продуктов. Полный вы-ход составлял 90%.
Цис-изомер: т.пл. 182-183С, Rf: 0,44 (CH2CI2: MeOH 9:1),
УФ:  макс. (МеОН) : 296 нм,
1Н-ЯМР (ДМСО-d6) :  (ppm):
8,38 (шир.с., 1Н, NН2),
8,30 (с, 1Н, С2 -Н),
8,17 (шир.с., 1Н, -NH2),
6,77 (дд, 1Н, С5-Н, J=4,12 и 5,28 Гц),
5,41 (т, 1Н, С2-Н, J=6,04 Гц),
5,17 (т, 1Н, -оН, J=5,77 Гц),
3,92 (дд, 1Н, С4-Н, J=4,15 и 12,05 Гц),
3,67 (м, 3Н, С4-Н и С2-СН2ОН).
Транс-изомер: т.пл. 206-207С, Rf : 0,38 (СН2CI2 : МеОН 9:1),
УФ:  макс. (МеОН) : 196 нм,
1Н-ЯМР (ДМСО-d6) :  (ppm):
8,38 (шир.с., 1Н, NН2),
8,30 (с, 1Н, С2 -Н),
8,16 (шир.с., 1Н, -NH2),
7,04 (дд, 1Н, С5-Н, J=1,92 и 5,76 Гц),
5,46 (т, 1Н, С2-Н, J=5,01 Гц),
5,24 (т, 1Н, -оН, J=5,77 Гц),
3,85 (дд, 1Н, С4-Н, J=1,98 и 12,96 Гц),
3,62 (м, 3Н, С4-Н и С2-СН2ОН).

Пример 24
Цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(8-азагуанин-9-ил)-1,3-оксатиолан

8-азагуанин (1,0 г, 6,58 мМ) подвергали персилилированию посредством нагревания с обратным холодильником с 1,1,1,
3,3,3,-гексаметилдисилазаном (НМDS, 50 мл) в присутствии каталитического количе-ства сульфата аммония (50 мг) в течение ночи (16 часов). Прозрачный раствор выпаривали досуха при пониженном давлении. Остаток осушали в высоком вакууме в течение 1 часа и растворяли в безводном 1,2-дихлорэтане (100 мл).
2-бензоилоксиметил-5-метилкарбонат-1,3-оксатиолан (1,96 г, 6,58 мМ) сушали путем двухкратного выпаривания с бензолом (2 х 50 мл) в 500-мл колбе с круглым дном, и рас-творяли в безводном 1,2-дихлорэтане (150 мл).
Раствор силилированного 8-азагуанина вводили посредством канюли в раствор окса-тиолана в атмосфере аргона с последующим добавлением ТМS-Трифлата (1,3 мл, 6,58 мМ). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 5 часов, охлаждали до комнатной температуры, и выливали в насыщенный водный раствор NaHCO3 (100 мл). Органический слой собирали. Водную фазу экстрагировали СН2CI2 (3 х 100 мл). Объединенный органический слой промывали водой (2 х 100 мл), один раз рас-твором NaCl (100 мл) и осушали сульфатом магния. После фильтрации, растворитель уда-ляли путем выпаривания в вакууме, и остаток очищали на силикагеле, элюируя EtOAc:МеОН=97:3. В результате получали 712 мл (29%) целевого продукта в виде смеси цис- и транс-изомеров в отношении 1:1.
Rf: 0,40 (CH2CI2: MeOH 95:5)
1Н-ЯМР (ДМСО-d6) :  (ppm):
11,06 (ш.с, 1Н, NH),
7,92 (м, 2Н, ароматич.),
7,66 (м, 1Н, ароматич.),
7,55 (м, 2Н, ароматич.),
7,05 (ш.с., 2Н, ароматич.),
7,05 (ш.с., 2Н, NH2-),
6,74 (дд, 1Н, Н-5, транс-изомер, J=3 и 6 Гц),
6,45 (т, 1Н, Н-5, цис-изомер, J=6 Гц),
5,68 (м, 1Н, Н-2)
4,55 (м, 2Н, СН2ОВz),
3,65 (м, 2, Н-4).

Пример 25
Цис- и транс-2-гидроксиметил-5-(8-азагунин-9-ил)-1,3-оксатиолан

Раствор цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(8-азагуанин-9-ил)-1,3-оксатиолана (350 мг) в метаноле (100 ил) охлаждали до 0С в ледяной бане, и аммиачный газ барбатировали через раствор в течение 15 минут. Реакционную смесь перемешивали при комнатной тем-пературе в течение ночи (16 часов). Раствор выпаривали досуха. Остаток очищали, а два изомера частично разделяли на силикагеле, элюируя СН2CI2: МеОН+9:1, в результате чего получали чистый целевой продукт, который идентифицировали как цис-изомер (30 мг).
Цис-изомер:
Т.пл. >260С (разлож.)
Rf: 0,26 (CH2CI2 : MeOH 9:1)
УФ: макс. (pH14): 278 нм,
1H-ЯМР (ДМСО-d6):  (ppm):
11,08 (ш.с., 1Н, NH-),
7,05 (ш.с., 2Н, NH2),
6,33 (дд, 1Н, С2-Н, J=6 и 7 Гц),
5,26 (т, 1Н, С2-Н, J=6 Гц),
5,17 (т, 1Н, ОН-, J=6 Гц),
3,93 (дд, 1Н, С4-Н, J=7 и 11 Гц),
3,47 (м, 3Н, 1Н, С4-Н и 2Н,С2-СН2ОН),
13С-ЯМР (ДМСО-d6) :  (ррm):
155,81; 155,46; 151,79; 124,35; 86,73; 84,94; 64,22 и 32,42.
Другие фракции объединяли и концентрировали досуха. Остаток очищали с помощью ЖХВД (жидкостная хроматография высокого давления), в результате чего получали 72 мг трансизомера.
Транс-изомер:
Т. пл.: 220-222С (разлож.):
УФ: макс. (рН 14): 280 нм.
1Н-ЯМР (ДМСО-d6):  (ррm):
11,0 (ш.с., 1H, -NH),
7,06 (ш.с., 2Н, -NH2),
6,67 (дд, 1Н, С5-Н, J=3 и 7 Гц),
5,28 (т, 1Н, С2Н, J=5Гц),
5,20 (ш.т., 1Н, -ОН, J=6 Гц),
3,78 (дд, 1Н, 1Н, С4-Н, J=3 и 12 Гц),
3,67 (м, 1H, С4-Н и 2Н-CН2ОН),
13С-ЯМР (ДМСО-d6)  (ррm) :
155,8; 155,6; 151,4; 124,3; 86,7, 86,4; 63,6; 34,4.

Пример 26
Цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(3-карбоэтокси-1,' 2' -4'-триазол-1'-ил)-1,3-оксатио-лан


3-карбоэтокси-1,2,4-триазол (400 мг, 2,83 ммоля) грели в сосуде с обратным холодиль-ником в НМDS (1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазан, 20 мл), содержащем каталитическое ко-личество сульфата аммония (20 мг) в течение 2 ч. Прозрачный раствор упаривали до сухо-го состояния при пониженном давлении, и остаток растворяли в сухом дихлорэтане (50 мл). Раствор 2-бе-нзоилоксиметил-5-ацетокси-1,3-оксатиолана (1,2 г, 4,20 ммоля) в сухом дихлорэтане (100 мл) добавляли к силированному триазольному производному, делая это через трубку в атмосфере аргона, после чего добавляли 1 М дихлорэтановый раствор три-ме-тилсилилтрифторметан-сульфоната (TMSOТf) (5 мл).
Реакционную смесь грели в сосуде с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 ч, охлаждали до комнатной температуры и выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия (100 мл). Органический слой собирали. После этого водный раствор экстрагировали метиленхлоридом (2 раза по 50 мл).
Объединенную органическую фазу промывали водой (2 раза по 100 мл), сушили над сульфатом магния и фильтровали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Оста-ток очищали на силикагеле с использованием смеси гексана с этилацетатом при соотноше-нии 1:1 в качестве элюента, в результате чего получали требуемый продукт (800 мг) с вы-ходом 77% в виде смеси цис- и трансизомеров в соотношении 3:2.
Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, СDСI3,) был следующим: величина  в миллионных до-лях составляла 8,57 (синглет, 1Н, H'-5, цис-изомер), 8,43 (синглет, 1Н, Н'-5, транс-изомер), 8,04 (мультиплет, 4Н, бензольное кольцо, цис- и транс-изомеры), 7,57 ( мультиплет, 2Н, бензольное кольцо, цис - и транс-изомеры), 7,47 (мультиплет, 4Н, бензольное кольцо, цис- н транс-изомеры), 6,57 (дублет из дублета, 1Н, Н-5, транс-изомер, J=1,б и 4,8 Гц), 6,37 (дуб-лет из дублета, 1Н, Н-5, цис-изомер, J=3,2 и 7,8 Гц), 5,79 (дублет из дублета, 1Н, Н-2, транс-изомер, J=4 и 6,1 Гц), 5,63 (дублет из дублета, 1Н, Н-2, цис-изомер, J=3,6 и 5,3 Гц), 4,71 (мультиплет, 2Н, -СН2ОС(С6Н5)), 4,50 (мультиплет, 6Н, 2Н, из -СН2ОС(С6Н5) и 4Н из СОО(С2Н5), цис- и транс-изомеры), 3,65 (мультиплет, 4Н, Н-4, цис - и трансизомеры) и 1,43 (триплет, 6Н, СОО (С2Н5), цис- и транс-изомеры).

Пример 27
Цис- и транс-2-гидроксиметил-5-(3'-карбоксамид-1', 2', 4' -триазол-1'-ил) -1,3-оксатиолан

Смесь цис- и транс-изомеров 2-бензоилоксиметил-5-(3'-карбоэтокси-1’, 2', 4'-триазол-1’-ил)-1,3-оксатиолана (800 мг, 2,2-ммоля) растворяли в метанольном аммиаке (80 мл). Рас-твор перемешивали в герметичной колбе при комнатной температуре в течение 4 дней. Растворитель удапяли выпариванием при пониженном давлении, и маслянистый остаток растирали с простым эфиром (3 раза по 30 мл). Остаток после этого очищали на силикагеле при использовании смеси этилацетата с метанолом в соотношении 95:5 в качестве элюен-та, в результате чего в чистой твердой форме получали оба цис- и транс-изомера.
Цис-изомер. Температура плавления составляла 119-120С. Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, диметилсульфоксид-d6) величина  в миллионных долях составляла 8,85 (синглет, 1Н, С5'-Н), 7,81 (широкий синглет, 1Н, СОNН2-,D2О (способная обмениваться)), 7,59 (ши-рокий синглет, 1Н, ( способная обмениваться)), 6,38 (триплет, 1Н, С5-Н), 5,27 (триплет, 2Н, С2-Н и ОН), 3,56 (мультиплет, 4Н, С4-Н и С2-СН2ОН).
Транс-изомер. Температура плавления составляла 215-216С. Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных долях составляла 8,83 (синглет, 1Н, С5’-Н), 7,87 (широкий синглет, 1Н, СОNH2-, D2O (способная обмениваться)), 7,65 (ши-рокий синглет, 1Н, СОNH2-, D2O (способная обмениваться)), 6,69 (дублет из дублета, 1Н, С5-Н, J=3 и 4,2 Гц), 5,43 (триплет, 1Н, С2-Н, J=5,1 Гц), 5,23 (триплет, 1Н, ОН, D2O (способ-ная обмениваться)), 3,60 (мультиплет, 4Н, С4-Н и С2-СН2ОН) .

Пример 28
Цис- и транс-2-бензоилоксиметил-5-(2'-амино-6' -хлорпурин-9'-ил)-1,3-оксатиолан

6-хлор-2-аминопурин (3,96 г, 23,35 ммоля) грели в сосуде с обратным холодильником в HMDS (1,1,1,3,3,3-гексаметил-дисилазане, 100 мл), содержащем каталитическое количество сульфата аммония (20 мг) в течение ночи (16 ч). Прозрачный раствор упаривали досуха при пониженном давлении, и остаток растворяли в дихлорэтане (60 мл). Раствор добавляли к смеси 2-бензоилоксиметил-5-ацетокси-1,3-оксатиолана (5,98 г, 21,33 ммоля) в сухом ди-хлорэтане (30 мл) с молекулярными ситами 4A (2 г), после чего добавляли триметилсили-лтрифторметансульфонат (ТМS-triflate 4,1 мл). Реакционную смесь грели в сосуде с обрат-ным холодильником в атмосфере аргона в течение 10 ч и выливали в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (100 мл). Органический слой собирали. Водный раствор затем экстрагировали метиленхлоридом (2 раза по 60 мл). Объединенную органическую фазу промывали водой (2 раза по 100 мл), сушили над сульфатом магния н фильтровали. Рас-творитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали на силикагеле, используя смесь из гексана и этилацетата при соотношении 1:1 в качестве элюента, в результате чего получали требуемые цис-изомер (2 г, 24%) и транс-изомер (3,10 г, 37,3%) с общим выходом б1%.
Цис-изомер. Температура плавления составляла 137-138°С. Величина Rf составляла 0,29 (смесь гексана с этилацетатом при соотношении 1:1).
Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, СDСI3): величина  в миллионных долях составляла 8,11 (синглет, 1Н, С8'-Н), 8,02 (мультиплет, 2Н, бензольное кольцо), 7,55 (мультиплет, 1Н, бен-зольное кольцо), 7,44 (мультиплет, 2Н, бензольное кольцо), 6,38 (триплет, 1Н, С5-Н, J=5,2 Гц), 5,60 (дублет из дублета, 1Н, С2-Н, J=4,2 и 5,4 Гц), 5,32 (широкий синглет, 2Н, NH2), 4,66 ( мультиплет, 2Н, -СН2ОС(С6Н5)), 3,58 (муkьтипkет, 2Н, С4-Н).
Транс-изомер. Температура плавления составляла 152-153С. Величина Rf составляла 0,29 (смесь гексана с этилацетатом при соотношении 1:1).
Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, СDСI,): величина  в миллионных долях составляла 8,15 (синглет, 1Н, С8'-Н), 8,02 (мультиплет, 2H, бензольное кольцо), 7,56 (мультиплет, 1Н, бен-зольное кольцо), 7,43 (мультиплет, 2Н, бензольное кольцо), 6,67 (дублет из дублета, 1Н, С5-Н, J=1,7 и 5,2 Гц), 5,69 (дублет из дублета, 1H, С2-Н, J=4,1 и 6,0 Гц), 5,50 (широкий синглет 2Н, NH2), 4,57 (мультиплет, 2Н, -СН2ОС (С6Н5)), 3,66 (дублет из дублета, 1Н, С4-Н, J=5,3 и 12,0 Гц) н 3,55 (дублет из дублета, 1Н, С4-Н, J=2,8 и 12 Гц).

Пример 29
Цис-2-гидроксиметил-5-(гуанин-9'-ил)-1,3-оксатиолан

К 10%-ному водному метанольному раствору цис-2-бензоил-оксиметил-5-(2'-амино-6'-хлорпурин-9'-ил)-1,3-оксатиолана (200 мг, 0,73 ммоля) добавляли в виде одной порции гидроксид натрия (3 г, 75 ммолей). Реакционную смесь грели в сосуде с обратным холо-дильником в течение 16 ч, затем охлаждали до комнатной температуры, и растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток вновь растворяли в воде (100 мл), раствор нейтрализовали пиридиниевой смолой и фильтровали. Фильтрат упаривали досуха при пониженном давлении, и остаток очищали высокопроизводительной жидкостной хромато-графией на колонке с обращенной фазой, в результате чего получали названное соедине-ние (146 мг) с выходом 74%.
Температура плавления превышала 258°С (идет разложение).
Величина Rf составляла 0,54 (смесь этилацетата с метанолом при соотношении 4:1).
Ультрафиолетовый спектр: величина max (в воде) составляла 254 и 275 (коротковолно-вая область) нм.
Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных долях составляла 7,89 (синглет, 1Н, С8'-Н), 7,00 (широкий синглет, 2Н, NН,), 6,15 (триплет, 1Н, С5-Н, J=5,6 Гц), 5,50 (широкая линия, 1Н, ОН), 5,22 (триплет, 1Н, С2-Н, J=4,7 Гц), 3,62 (мультиплет, 4H, С4-Н и С2 -СН2ОН).
Спектр ЯМР на 13С (75,46 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных долях составляла 162,25, 157,79, 151,72, 134,33, 117,18, 85,52, 85,22, 64,18 и 34,81.

Пример 30
Цис-2-гидроксиметил-5-(2'-6'-диаминопурин-9'-ил)-1,3-оксатиолан

Аммиак пробулькивали через раствор цис-2-бензоилоксиметил-5-(2'-амино-6'-хлорпурин-9'-ил)-1,3-оксатиолана (185 мг, 0,64 ммоля) в этаноле (25 мл) при ОС в течение 20 мин. Раствор помещали в стальную бомбу и грели при 110С в течение 16 ч. Бомбу охлаждали до комнатной температуры и затем освобождали. Растворители удаляли при пониженном давлении, и остаток очищали на силикагеле с использованием смеси этилаце-тата с метанолом при соотношении 9:1 в качестве элюента, в результате чего получали тре-буемый продукт (125 мг) с выходом 73%.
Температура плавления составляла 120-122С (разложение). Величина Rf составляла 0,48 (смесь этилацетата с метанолом при соотношении 4:1).
Ультрафиолетовый спектр: величина max (в воде) составляла 256 и 280 нм.
Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных долях составляла 8,31 (синглет, 1Н, С8'-Н), 6,86 (широкий синглет, 2Н, -NН2), 6,19 (триплет, 1Н, С5-Н, J=5,2 Гц), 5,90 (широкая линия, 2H, NH2), 5,40 (триплет, 1Н, ОН), 5,22 (триплет, 1H, С2-Н), 3,62 (мультиплет, 4Н, С4-Н и С2 -СН2ОН).
Спектр ЯМР на 13С (75,46 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных долях составляла 160,70, 156,44, 151,65, 135,91, 113,07, 85,47, 85,39, 63,83 и 34,92.

Транс-2-гидроксиметил-5-(2',6'-диаминопу-рин-9'-ил)-1,3-оксатиолан

Аммиак пробулькивали через раствор цис-2-бензоилоксиметил-5-(2'-амино-6'-хлорпурин-9'-ил)-1,3-оксатиолана (200 мг, 0,69 ммоля) в этаноле (25 мл) при ОС в течение 20 мин. Раствор помещали в стальную бомбу и грели при 110С в течение 16 ч. Бомбу охлаждали до комнатной температуры и освобождали. Растворители удаляли при пони-женном давлении, и остаток очищали на силикагеле с использованием смеси из этилацета-та и метанола при соотношении 9:1 в качестве элюента, в результате чего получали требу-емый продукт (136 мг с выходом 72%).
Температура плавления превышала 220С (идет разложение). Величина Rf составляла 0,40 (смесь этилацетата с метанолом при соотношении 4:1).
Ультрафиолетовый спектр: величина max (в воде) составляла 256 и 280 нм.
Спектр ЯМР на 1Н (300 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных полях составляла 7,90 (синглет, 1H, С8'-Н), 6,76 (широкий синглет, 2Н, -NH2), 6,49 (дублет из дуб-лета, 1H, С5-Н, J=3,0 и 5,4 Гц), 5,88 (широкая линия, 2H, NН), 5,32 (триплет, 1H, С2-Н, J=4,7 Гц), 5,21 (триплет, 1Н, ОН), 3,62 (мультиплет, 4Н, С4-Н и С2 -СН2ОН) .
Спектр ЯМР на 13С (75,46 МГц, диметилсульфоксид-d6): величина  в миллионных долях составляла 160,90, 156,64, 151,81, 135,27, 113,35, 86,00, 85,31, 64,50 и 35,23.

Пример 31
Цис- и транс-2-бензонлоксиметил-5-(N4' -ацетил-5' фтор-цитозин-1'-ил)-1,3-оксатиотлан

5-фторцитозии (4,30 г, 33,3 ммол), гексаметилдисилозан (25 мл) и сульфат аммония (120 мг) кипятили с обратным холодильником до растворения цитозина (3 часа) и затем кипят или еще в течение 2 часов, Гексаметилдисипозан испаряли в вакууме и к остатку добавляли толуол (100 мл) для совместного испарения растворителей. Образующийся рас-твор, бис(триметилсилил)-фторцитозин в дихлорметане (40 мл) добавляли в атмосфере ар-гона к раствору 2-бензоилоксиметил-5-ацетокси-1,3-оксатиолана (8,537 г, 30,3 ммол) в су-хом дихлорметане (100 мл) и к молекулярным ситам (4?, 2 г), предварительно охлажден-ный до ОС и выдерживании в атмосфере аргона в течение 20 минут.
К этой смеси добавляли (трифторметан-сульфонил) окситриметилсилан (6 мл, 31 ммол) при ОС и образующийся раствор перемешивали при 25С в течение приблизительно 18 часов. Затем, реакционную смесь обрабатывали 300 мл насыщенного раствора бикарбоната натрия и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Фильтрат дважды встряхивали с 300 мл солевого раствора и один раз с дистиллированной водой. Органиче-ский слой высушивали над сульфатом магния, фильтровали и выпаривали до сухого состо-яния. Это давало неочищенное производное 5-фторцистозина (10,1 г). Rf: 0,57 (ЕtО-Ас:МеОН 9:1).
Этот остаток подвергали ацетилированию на следующем этапе без дальнейшей очист-ки. Неочищенное вещество растворяли в сухом дихлорметане (120 мл) в атмосфере аргона в 500-миллилитровой круглодонной колбе. К раствору добавляли триэтиламин (12,7 мл, 91,1 ммол) и диметиламинопиридин (III мг, 0,9 ммол). Затем, колбу погружали в ледяную баню на 1 час при создании в ней атмосферы аргона. В охлажденную колбу впрыскивали уксусный ангидрид (4,3 мл, 45 ммол), очищенный над ацетатом натрия. Смесь перемеши-вали в течение ночи и затем тщательно декантировали в эрленмейеровской колбе, содер-жащей насыщенный раствор бикарбоната натрия. 3атем, полученный продукт промывали дистиллированной водой, за которой следовал соляной раствор. Метиленхлоридные пор-ции сушили и выпаривали в высоком вакууме до сухого состояния, образуя ацетилирован-ную смесь в виде бесцветной пены, имеющей после высушивания вес 9,6 г. Флеш-хроматография этого вещества при использовании смеси этилацетат: метанол (9:1) дала 3,1 г, 7,8 ммол (46%) чистого транс- (LI) и 3,5 г, 8,9 ммол (30%) чистого цис-(LI).
Транс-изомер: Rf: 0,65 в смеси этилацетат: метанол 9:1
У.Ф.: (MеOH) Лямбда максим.: 309 нм.
1Н-ЯМР  (мил.д. в СDСI3)
8,77 (уш., 1Н, С4'-NН-Ас)
8,06 (м, 2Н; аромат).
7,70 (д, 1Н; С6'-Н, J6, F=6,3 Гц)
7,62 (м, 1Н; аромат)
7,49 (м, 2Н; аромат)
6,51 (дд, 1Н; С5-Н)
5,91 (дд, 1Н; С2-Н)
4,48 (дд, 2Н; С2-СН2ОСОС6Н5)
3,66 (дд, 1Н; С4-Н)
3,44 (дд, 1Н; С4-Н)
2,56 (с, 3Н; NН-СОСН3)
Цис-изомер: Rf :0,58 в смеси этилацетат: метанол 9:1.
У.Ф.: [МеОН) Лямбда max : 309 нм
1Н-ЯМР  (мил.д. в СDСI3)
8,72 (уш, 1Н; С4'-NН-Ас)
8,06 (м, 2Н; аромат.)
7,87 (д, 1Н; С6'-Н, J6, F=6,2 Гц)
7,60 (м, 1H; аромат)
7,49 (м, 1H; аромат.)
6,32 (дд, 1Н; С5-Н)
5,47 (дд, 1Н; С2-Н)
4,73 (дд, 2Н; С2-СН2 ОСОС6Н5)
3,62 (дд, 1Н; С4-Н)
3,19 (дд, 1Н; С4-Н)
2,55 (с, 3Н; Н-СОСH3)

Пример 32
Цис- и транс -гидроксиметил-5-(5' -фторцитозин-1'-ил) -1,3-оксатнолан

1,0 г (2,54 ммоп) транс-2-бензоилоксиметил-5-(N4'-ацетил-5'-фтор-цитозин-1'-ил)-1,3-оксатиолана перемешивали в 25 мл метанольного раствора аммиака при ОС в течение 1 часа и затем в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выпаривали при понижен-ном давлении, остаток дважды растирали (2х30 мл) с безводным эфиром. Твердый остаток перекристаллизовывали в абсолютном этаноле, образуя 484 мг (1,95 ммол, 77%) желаемого продукта транс (LII): т.пл. 219-221°С; Rf=0,21 в смеси этилацетат; метанол (9:1), который был идентифицирован с применением 1Н, -13С-ЯМР и У.Ф. Лямбда max (Н2О) 260,9 нм.
1,2 г (3,05 ммол) цис-2-бонзоилоксиметил-5-(N4'-ацетил-5'-фтор-цитозин-1'-ил)-1,3-оксатиолана перемешивали в 30 мл метанольнога раствора аммиака при ОС в течение 1 часа и затем в течение ночи при комнатной температуре. Смесь выпаривали при понижен-ном давлении. Остаток дважды растирали (2х30 мл) с безводным эфиром. Твердый остаток перекристаллизовывали в абсолютном этаноле с образованием 655 мг (2,64 ммол. 87%) чистого продукта цис- (LII): т.пл. 204-206°С; Rf=0,21 в смеси этилацетат : метанол (9:1). Нужное соединение было идентифицировано с применением 1Н, 13С-ЯМР и У.Ф.Лямбда max (H2O) 280,9 нм.
Транс-изомер;
1Н-ЯМР  (мил.д в ДМСО-d6):
7,85 (д, 1H; C6'-H, J=7,01 H2)
7,83 (д, 2Н; С-NН2)
6,30 (дд, 1H; С5-Н)
5,60 (т, 1H; С2-Н)
5,18 (т, 1Н; С2-СН2-ОН)
3,49 (м, 3Н; С2-СH2-ОН+С4Н)
3,17 (дд, 1Н; С4Н)
13С-ЯМР (ДМСО-d6 ( Varian XL 300),  в мил.д
С2' С4' С5' С6'
153,47 158,20 134,65 126,24


2JСF=13,2 Гц) (2 JСF =26,2 Гц) (2 JСF=32,0 Гц)
C5 C4 C2 СH2-OH
88,20 6,18 87,16 64,71
Цис-изомер
1Н-ЯМР  (мил.д. в ДМСО-d6)
8,22 (д, 1Н; С6'-н, J=7,26 Гц)
7,84 (д, 2Н; С4'-NH2)
6,16 (т, 1H; С5Н)
5,43 (т, 1Н; С2-СН2-ОН)
5,19 (т, 1Н; С2-Н)
3,77 (м, 2Н; С2-СН2ОН)
3,35 (дд, 1Н; С4-Н)
3,12 (дд, 1Н; С4-Н)
13С-ЯМР (ДМСО-d6)

C2' C4' C5' C6'
153,46 153,14 134,635 126,32

(2JCF=14,0 Гц) (JCF=24,1 Гц) (JCF=32,0 Гц)

С5 С4 С2 СН2ОН
86,82 36,80 86,77 62,32

Пример 33
Хиральное ВЭЖХ разделение энантиомеров (+)-цис-2-гидроксиметил-5-(5'-фторцитозин-1'-ил)-1,3-оксатиолана
Рацемические продукты примера 35 могут быть разделены с применением хиральной ВЭЖХ при следующих условиях:
Колонка: Aster Cyclobond I ацетилированная
-циклодекстрином, 4,6 х 250 мм
Элюент: 0,1% триэтиламина в воде,
содержащей 0,1% ацетонитрила при
рН 7,3 (изократический режим)
Скорость: 1 мл/мин
(-)- и (+) энантиомеры элюировали с временем удерживания 492 и 538 с соответствен-но. Хиральная ВЭЖХ разделяет рацемический цис-изомер на его, главным образом, чи-стые энантиомеры. В основном, чистая (-)-энантиомерная смесь содержит менее 1% (+)-энантиомера. В основном, чистый (+)-энантиомер содержит менее 2% (-)-энантиомера.

Противовирусная активность

Для определения ингибирующих свойств отдельных соединений изобретения проведе-ны их испытания in vitro. Полученные результаты приведены в таблицах 1 и 2. Указанные концентрации (мкг/мл) в инкубационной среде соответствуют концентрациям, оказываю-щим влияние на восприимчивость непрерывно линии Т-лимфоцитов, создаваемых в Ин-ституте медицинских исследований лэди Дэвис (Монреаль) и др. Dr. MarkA. Wainberg по отношению к инфекции ВИЧ-1 по методике, аналогичной методике Н.Mitsuya and S.Broder, "Ингибирование in
vitro инфекционности и цитопатического действия Т-лимфотропного вируса типа III чело-века/вируса лимфоденопатии (НTLV -III/LAV) 2', 3' -дидезоксинуклеозидами", Рroc. Natl. Аcad. Sci США, 83 стр. 1911-15 (1986). Защиту клеточной линии от инфекции осушеств-ляют их окрашиванием моноклональными антителами к вирусным белкам обычным обра-зом (таблица 1). Во всех опытах сравнение ведется с лекарством АЗТ в качестве контроля. Для подтверждения результатов действие лекарства выявляют измерением активности об-ратной транскриптазы (ОТ) в моноцитных клетках человека линии V-937 в испытании обычным образом с применением тритиированного тимидинтрифосфата (ТТФ) (таблица 2). И, наконец, выявляют приемлемым способом действие лекарства на жизнеспособность клеток измерением хорошо известного цитопитического действия ВИЧ-1 на клеточную линию МТ-4 (таблица 2).
Токсичность
Никакого токсичного действия не отмечено в вышеописанных испытаниях.

Таблица 1

Ингибирование ВИЧ-1 соединениями формулы (1) в клетках МТ-4
а) Выжившие клетки подсчитывают (6 дней в культуре) при концентрации соединения 2 мкг/мл

Соединение жизнеспособность клеток, %
Без лекарства 6,47
АЗТ 88,6
цис-ХVI 87,4
транс-ХVI 24
цис-ХVII (в) 14
цис-ХХV 11
цис-ХХI 18
цис-ХХIII 14

в) Иммуннофлуоресценция с Р-24

Время в культуре Иммунофлуоресцентные клетки, %
(Дни) Без лекарства 2 мкг/мл АЗТ 2 мкг/мл цис-XVI

3
5,9
1
1,0
6 99 1 7,6

с) Опыты с обратной транскриптазой

Время в культуре Активность от (К/М х 1000) / мл
(Дни) Без лекарства 2 мкг/мл АЗТ 2 мкг/мл цис-XVI

3
36,43
1,564
2,381
6 339,0 1,748 2,301

Таблица 2
Ингибирование соединениями формулы (1) продуцирования ВИЧ-1 в клетках Н-9
Опыт с обратной транскриптазой

Время в культуре Активность от (К/М х 1000) /мл
(Дни) Без лекарства 2 мкг/мл АЗТ 2 мкг/мл цис-XVI
5 9,117 3,346 3,077
8 438,5 3,414 5,853
11 2550 2,918 3,560
14 2002 8,320 2,872
17 584,5 2,997 2,399
21 365,2 3,111 2,907
25 436,4 15,88 4,020
29 92,38 32,08 3,756
33 111,1 612,2 3,803
37 32,28 878,2 4,193
41 384,4 994,0 4,515
45 33,64 32,91 3,441


Были также проведены испытания по опрепелению антивирусной активности для ряда соединений настоящего изобретения. Для изучения антивирусной активности в качестве контрольного образца испальзовался AZT. Испытания Dot и Southern относящиеся к ак-тивности против человеческого вируса НBV гепатита В, осуществлялись в основном, как описано в работе Е. Mathes и др., Аntimicrov. Agents. Chemothenap., 34(10), 1986-1990 (1990).
Противовирусная активность в отношении вируса HTV-1 определялась на клетках МТ-4 . Суспензия кпеток (приблизительно 10 клеток/мл) в RРM1 1640 среде роста была инфи-цирована штаммом RF вируса НTV -1 при М.O.1. в 10-3 инфицированных единиц/клетку. Суспензия термостатировалась в течение 90 минут при комнатной температуре. Испытуе-мые соединения серийно разбавлялись с десятикратным снижением от 100 мкг/мл до 0,01 мкг/мл (конечные концентрации в двух 96 -ячеечных микротитрованных чашках), 20 мкл инфицированной клеточной суспензии термостатировалось в каждой ячейке чашки. Затем, чашка термостатировалась при 37С в течение 7 дней. После термостатирования во всей ячейки было добавлено 10 мкл 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразол бромида (МТТ) при 20 мг/мл и чашки термостатировались еще 90 минут при 37С.
Затем, было добавлено 150 мкл 10% (по объему) спиртового раствора Triton Х-100 и клетки повторно суспендировались. Спустя 15 минут пребывания чашек при комнатной температуре их содержимое анализировалось на Multiskan МС с записывающим устрой-ством при 405 нм. Конверсия желтого ММТ в его формазановое производное показывает максимум в клетках, не подвергнутых инфицнрованию, и отсутствует в необработанных инфицированных клетках. Значения оптической плотности для цитотоксических кон-трольных образцов и для клеток, обработанных антивирусными веществами, вычерчива-лись графически и вычислялась доза соединений, требуемая для ингибирования конверсии МТТ в 50% по отношению к необработанным неинфицированным контрольным образцам. Таким путем могут быть определены как 50% цитотоксическая доза, СD 50%), так и 50% антивирусная доза (ID 50%).
Результаты представлены в таблице 3.
Таблица 3

Название/Структура ВИЧ (МТ-4) (мкг/мл) Человеческий НВУ вирус (мкг/мл)
ID50 CD50 ID50dot CD50dot ID50Southern
(+)-цис-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-13-оксатиолан
0,3
>100
не испыт.
не исп.
не испыт.







(-)-цис-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан
0,3
>300
<0,01
>100
<0,01

(+)-цис-2-гидроксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан
0,3
3,84
>100
100
не испыт.

цис-2-изолеуцинилокси-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан, гидрохлорид

7,5

>100
не
испыт.
не
испыт.
не
испыт.
Продолжение таблицы 3

аминоэфир соединения фор-мулы 1 цис-2-никотинилоксиметил-5-(цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан

0,06

>100

<10

>10
не
испыт.

эфир соединения формулы 1
()-цис-2-гидроксиметил-5-(фтор-цитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан

0,065

>1

<0,01

>10

не исп.

()-2S-гидроксиметил-5R-(5-фторцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан

0,065

>1

>10

>10

не исп.

(-)-2R-гидроксиметил-5S-(5’-фторцитозин-1-ил)-1,3-оксатиолан

0,14

>100

<0,1

>10

<0,01




Продолжение таблицы 3
3’-азидо-2, 3-дидеокси-
тимидин
0,033
>1
не исп.
не исп.
не исп.



Пример рецептуры 1
Таблетированные составы

А. Нижеприведенный состав получен влажным гранулированием компонентов с водным раствором повидона, высушиванием, просеиванием и последующим добавлени-ем стеарата магния и прессованием.

мг/таблетку
(а) Активный компонент 250
(в) Лактоза В.П. 210
(с) Повидон В.Р. 15
(d) Гликолят натрийкрахмала 20
(е) Стеарат магния 5 .
500
В. Нижеследующий состав получен непосредственным прессованием; лактоза отно-сится к типу, предназначенному для прямого прессования.
мг/таблетку
Активный компонент 250
Лактоза 145
Авицель 100
Стеарат магния 5 .
500
С. (Состав продленного действия). Данный состав получен влажным гранулировани-ем компонентов (приведены ниже) с водным раствором повидона, высушиванием и про-сеиванием с последующим добавлением стерата магния и прессованием.

кг/таблетку
(а) Активный компонент 500
(в) Гидроксипропилметилцуллюлоза 112
(Метоцель К4М премиум)
(с) Лактоза В.Р. 53
(d) Повидон В.Р. 28
(е) Стеарат магния 5 .
700

Пример рецептуры 2
Капсулированный состав

Капсулированный состав получают смешиванием нижеприведенных и заполнением полученной смесью твердых желатиновых капсул, состоящих из двух частей.



мг/капсулу
Активный компонент 125
Лактоза 72,5
Авицель 50
Стеарат магния 2,5 .
250

Пример рецептуры 3
Состав для инъекций

Активный компонент 0,2 г
Раствор гидроксида натрия; 0,1 МgS до рН 11
Стерильная вода - достаточное кол-во до 10 мл.

Активный компонент суспендируют в некотором количестве воды (которая может быть подогрета) и добавлением раствора гидроксида натрия устанавливают рН около 11. Полученную смесь затем доводят до необходимого объема и фильтруют через стерилизо-ванный мембранный фильтр в стерильные стеклянные пузырьки на 10 мл, которые заку-поривают стерильными крышками с уплотнением.

Пример рецептуры 4
Свечи
мг/свечу
Активный компонент 250
Твердый жир 1770
2020

Одну пятую часть твердого жира расплавляют в кастрюле с рубашкой для пара при максимальной температуре 45°С. Активный компонент просеивают через сито на 200 мкм и при перемешивании добавляют к расплавленной основе с помощью мешалки с вы-сокой сдвиговой деформацией до момента образования ровной дисперсии. При темпера-туре смеси 45°С добавляют остальную часть твердого жира и перемешивают до образова-ния гомогенной смеси. Полученную суспензию целиком пропускают через сито из не-ржавеющей стали на 250 мкм и при непрекращающемся перемешиванни охлаждают до 40°С. При температуре 38-40°С смесью в количестве 2,02 г заполняют соответствующие пластиковые формы на 2 мл. Полученные свечи оставляют охлаждаться до комнатной температуры.

1. B.Townsend, “Chemistry of Heterocyclic moiel of Purine nucleosides and fome closeley Re-latea analogues” Plenum Press. стр. 193-209 (1979).
2. “Синтез и свойства Пуриновых Нуклеозидов и Нуклеотидов”, Химия Нуклеозидов и Нуклеотидов (L.B.Townsend Plemun Press) стр. 214-225, 1988.