Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к получению штамма Clostridium chauvoei, пригодного для использования в вакцинах против болезни Эмкар сельскохозяйственных животных.
Болезнь известна с древнейших времен. Первое научное описание ее дано в 1872 г. Ф. Шабером, дифференцировавшим Эмкар от сибирской язвы.
Возбудитель эмкара обнаружили и описали О. Болли-гер в 1875 г. и Фезер в 1876 г. Они же впервые воспроизвели болезнь. Эмфизематозный карбункул крупного рогатого скота распространен во всех странах мира независимо от географического расположения и почвенно-климатических условий.
В неблагополучных хозяйствах причиняет большой ущерб из-за гибели животных и затрат на проведение противоэпизоотических мероприятий.
Несмотря на применение высокоэффективных вакцин и проведение плановых профилактических прививок в Республики Таджикистан заболеваемость болезнью Эмкар остается серьезной проблемой.
Задачей изобретения является получение штамма рода Clostridium chauvoei для приготовления вакцины.
Предложенный штамм депонирован, регистрационный номер – «Штамм Clostridium chauvoei №01 /2016/ CICHTJ – 01» в ГУ «Институт проблем биологической безопасности» Таджикской академии сельскохозяйственных наук.
Возбудитель Эмкара Clostridium chauvoei представляет собой прямые или слегка изогнутые, с закругленными концами палочки, располагающиеся одиночно, парами, реже короткими цепочками, в молодых культурах грамположительные.
Клетки отличаются полиморфизмом, особенно в животных тканях. Хорошо растут на анаэробных питательных средах. Старые культуры имеют запах прогорклого масла.
Споры возбудителя Эмкара очень устойчивы: несколько лет сохраняют жизнеспособность в почве, в гниющих мышцах, навозе - до 6 мес, на дне водоемов - свыше 10 лет, в солонине - более 2 лет, в высушенном состоянии споры теряют жизнеспособность при нагревании до 100-105°С от 2-12 мин, прямые солнечные лучи убивают их за 24 ч.
При благоприятных условиях в почве возбудитель может вегетировать и размножаться.
Наиболее эффективными дезинфектантами являются 3-4%-ный раствор формальдегида, 10%-ный раствор гидроксида натрия, Virkon S (1:100).
Культурально-морфологические свойства штамма и генетические особенности штамма. Патогенный анаэробы имеют форму крупных палочек от 5 до 10-12 мк в длину и от 1,5 до 2мк в ширину. Они грамположительны, образуют круглые или овальные споры, расположенные в теле микроба центрально, терминальное или субтерминально. Некоторые виды приобретают форму веретена (от лат. Clostеr) в связи с чем весь род получил название Clostridium. Эти микробы являются строгими анаэробами, хорошо растут на простых питательных средах при термидоре 37°С образуют экзотоксин. Часто обнаруживаются в кишечнике здоровых животных и человека, с испражнениями которых попадают в почву, где могут сохраняться в виде спор многие годы.
Растёт в анаэробных условиях в мясопептонном печёночном бульоне, мясопептонном печёночном агаре и среде Китта-Тароции при температуре 37-39°С. В среде Китта-Тароции дает обильный рост через 16-20 часов.
В глюкозно-кровяном агаре плоские колонии с холмообразным возвышением имеют вид перламутровой пуговицы.
Физико - биохимические свойства. Штамм ферментирует глюкозу, лактозу, левулезу, мальтозу, галактозу, сахарозу и сбраживает с выделением газа
Способом и условиями для размножения штамма являются среда Китта-Тароции, мясопептонный печёночный бульон, мясопептонный печёночный агар с добавлением 5-10% стерильной дефибринированной крови барана, рН 7,0-7,4, при 37оС 18-24 часа
Периодичность пересевов на питательных средах. Один раз в 6 месяц при хранении на среде Китта-Тароции и раз в 3 года при хранении в лиофилизированном виде.
Вакцина, изготовленная с использованием предложенного штамма предназначена для профилактической иммунизации крупного рогатого скота и овец против эмфизематозного карбункула. При этом сохранность поголовья может быть обеспечена на 90-95%