Изобретение относится к фармацевтической, а именно к области создания наноэмульсионных систем, используемых в качестве носителей активных веществ в фармацевтических композициях, обладающие антибактериальной активностью.
Различные типы белков, полисахаридов и синтетических эмульгаторов используются для наноформулировки эфирных масел или их составляющих. В последние несколько лет технология наноформулирования получила широкое распространение, особенно при разработке микро- или наноэмульсий [1].
Известна наноэмульсию («масло в воде» – O/W), полученная с использованием микрофлюидизатора высокого давления (Nano Vater NV 200), в составе которой содержится непрерывная фаза, содержащая 1% водного додецилсульфата натрия, а дисперсная фаза, содержащую 70% эфирное масла тимьяна шишковидного (Thymus capitatus) и 30% соевого масла. Наноэмульсия со средним диаметром капель 110 нм (определили на лазерном дифракционном анализаторе LS 13320) при 40 C сохраняла стабильность в течение 12 дней [1].
Прототипом заявленного изобретения является наноэмульсия, содержащее эфирное масло апельсиновой корки (1%) – масляная фаза и смеси Твина 80 (2%) и деионизированной воды (97%) – водная фаза [2].
Недостатком прототипа является наличие в составе наноэмульсии дорогостоящего сырья- эфирное масло апельсина.
Целью изобретения является получение наноэмульсии с использованием местного сырья, обладающее антибактериальной активностью.
Поставленная цель достигается наноэмульсией типа масло в воде, обладающее антибактериальной активностью, содержащее натуральное эфирное масло, Твин-80 и деионизированную воду в качестве водной фазы, причем в качестве натурального эфирного масла содержит эфирное масло полыни однолетней (Artemisia annua L.), которое в смеси с Твином - 80
образует масляную фазу, дополнительно содержит растворимые фракции персидской жевательной резинки, которое в сочетание с деионизированной водой образует водную фазу при следующем соотношение компонентов, % :
Эфирного масло полыни однолетней
(Artemisia annua L.) 1%
Твина 80 2%
Растворимые фракции персидской
жевательной резинки 0,25%
деионизированной воды остальное
Твин - 80 в составе наноэмульсии выступает в качестве ПАВ (поверхностно активных веществ) в масляной фазе, а растворимые фракции персидской жевательной резинки выступают в качестве ПАВ в водной фазе.
Заявленную наноэмульсию получают путем смешивания масляной и водной фаз. Масляная фаза содержит: 1% эфирного масла полыни однолетней (Artemisia annua L.) и 2% Твина 80, а водная фаза 0,25% растворимые фракции персидской жевательной резинки и 96,75% деионизированной воды. Эмульсии готовят двухстадийным способом. Вначале, масляную и водную фазу помещают в стеклянный стакан и перемешивают при комнатной температуре с помощью магнитной мешалки (700 об/мин в течение 15 мин). Затем обработку продолжают ультразвуком на приборе Sonicator 4000 (20 кГц, цилиндрический титановый сонотрод с высоким коэффициентом усиления диаметром 19,1 мм, Misonix, Inc, Нью-Йорк) в двухстенной цилиндрической стеклянной ячейке, в которую погружают сонотрод на 1 см под поверхностью эмульсии.
Обработку ультразвуком проводят при различных амплитудах в течение 3 ч при температуре 40оC, которую поддерживают циркуляцией охлаждающей жидкости через рубашку камеры.
Пример 2.
Стабильность наноэмульсии оценивали (визуально по центробежному стрессу), оказывая в центрифуге Kudos центробежную нагрузку на образец (2 мл) в пробирке Эппендорфа при различных скоростях (80 – 5000 g) в течение 15 мин. Затем образец охлаждали при комнатной температуре в течение 30 мин, осторожно перемешивали, после чего оценивали. Результаты оценки стабильности представлены в таблице 1.
Пример 3.
Заявленная наноэмульсию является новой фармацевтической субстанцией, стабильность которой также изучили в реальных условиях: пробирки с образцами (2 мл) наноэмульсии хранили при температуре 4, 25 и 37оC (Keelrein DYG-9070A), визуально оценивая результаты (табл. 2) через 7, 14, 21 и 28 дней.
Стабильность наноэмульсии определяли однородностью и дисперсностью, результаты оценки которой представлены на рисунке 2.
Пример 4.
Антибактериальные свойства заявленной наноэмульсии изучали методом диффузии в агаре: в стерильные чашки Петри разливали мясопептонный агар, на который после застывания помещали цилиндры, затем свободную поверхность заливали мясопептонным агаром, засеянным культурой испытуемого микроба. Цилиндры вынимали после застывания засеянного агара, а в образовавшиеся лунки помещали испытуемое масло (Чашки Петри инкубировали в термостат при 37оС в течение 24 – 48 ч. Степень чувствительности испытуемых микроорганизмов к препарату определи по диаметру зоны задержки роста вокруг лунки. Результаты определения представлены в таблице 3.
