Изобретение относится к области медицины, в частности к мягким лекарственным формам которые могут быт использованы для лечения воспалитель-ных процессов кожи инфицированных ран и ожогов.

Известна мазь для лечения ожогов, включающая воск пчелиный и жировых веществ, также спирт этиловый, глицерин и гидрофобную углеводородную структуру [1]. Недостатком аналога является наличие в мази спиртосодержащих компонентов с отрицательными свойствами при ожогах, которые вызывают раздражение различных язв.

Известен способ лечения ожогов путем применения 5%-ной   левомеколевой мазью при свежих  инфицированных ран, нагноившихся  ран, при острых гнойно-воспалительных заболеваниях (карбункулы, фурункулы, гидрадениты и др.), также в случаях  гнойно – воспалительных ран после ожогов 1 и III степени [2].

Недостатком левомеколевой мази  является, то, что его состав состоит из дорогостоящих компонентов, которые не производятся на территории нашей Республики и, как известно антибиотики способны вызвать грибковые и  аллергические  реакции.

Наиболее близкими по техническим признакам и достигаемому результату к заявленному изобретению является мазь для лечения ожогов, гнойных и инфицированных ран различной этиологии, включающая воск пчелиный, жировую основу и канифоль [3].

Недостатком прототипа является недостаточно высокий терапевтический эффект.

Целью настоящего изобретения является получение лекарственного средство, которое устранит вышеуказанные недостатки и может быт использовано для лечения воспалительных процессов кожи различного генеза. Поставленная цель достигается тем, что в качестве средство для лечение воспалительных кожи используется «Нимфеиновая мазь», состоящая из следующих компонентов в %-ном соотношении;

Сухой экстракт корней кувшинки                       - 2– 2,5

Воск пчелиный                                    33,4  – 32,9

Твёрдый жир                                           - 6,6 - 6,0

Ланолин                                                   - 9,4  - 9,7

Оливковое масло                                              - 29,6 - 29,9

Пропиленгликоль                                               -11,5 - 11,5

Лаурилсульфат натрия                         -7,5 - 7,5

Способ получения мази: в фарфоровой посудепри помощи водяной бане при температуре 55-60°С расплавляют воск, твёрдый жир и безводный ланолин и смешивают до образования однородной массы. В другой фарфоровой посуде наливают оливковое масло и сухой экстракт корней кувшинки, для того чтобы экстракт и остатки нерастворенных частиц растворились до конца в смесь добавляют лаурилсульфат натрия. Полученную смесь помещают и смешивают в ультразвуковом аппарате марки KUDOS 165-HZ при температуре 50-55⁰С по действие 53кг Гс (кг грес) и смешивая добавляют малыми порциями пропиленгликоль. После полного растворения готовую смесь из второй посуды добавляют в первый сосуд и смешивают до получения однородной массы и поддерживают при температуре 55-60⁰С 35-40 минут. Полученное средство для окончательного охлаждения содержат в лабараторном условии в течении 1 часа после чего фасуют в алюминиевые тубы с лакированной внутренной поверхности или фасуют в тёмных стеклянных посудах с этикеткой где указана название, дата выпуска, срок хранения и адрес предприятия выпускающий продукт, а также надпись “Для наружного применения”.

Примеры составов предлагаемого фармацевтического средство, масс.%:

Пример 1.

Сухой экстракт корней кувшинки              - 2

Воск пчелиный                                              33,4

Твёрдый жир                                                 - 6,6

Ланолин                                                           - 9,4

Оливковое масло                                                        - 29,6

Пропиленгликоль                                                        -11,5

Лаурилсульфат натрия                   -7,5

Пример 2.

Сухой экстракт корней кувшинки           - 2,3

Воск пчелиный                                               - 33

Твёрдый жир                                                  - 6,4

Ланолин                                                           - 9,5

Оливковое масло                                         - 29,7

Пропиленгликоль                                                        -11,5

Лаурилсульфат натрия                  -7,5

Пример 3.

Сухой экстракт корней кувшинки           - 2,5

Воск пчелиный                                            - 32,9

Твёрдый жир                                                  - 6,0

Ланолин                                                           - 9,7

Оливковое масло                                                        - 29,9

Пропиленгликоль                                                        -11,5

Лаурилсульфат натрия                   -7,5

Установлено что состав кувшинки богато биологическими активными веществами. В том числе выявили фенольные кислоты, флаваноиди среди фенольных кислот, выделены бревифолин-карбоновая кислота, пумароильвинная кислота, неазенин В, лалиозит, три-ферулоилхиновая кислота и галовая кислота- О- рутинозит. А таже флаваноиди (элефанторизоль, апигенин-6-С-галактозит, 8-С- арабинозит и витценин -2), сиаловая кислота (2-дезокси- 2,3-дегидро-нацетилнейраминовая кислота) и терпеноид (оноцерадиендион). Кроме того в составе различных видов кувшинки обнаружены следуюшие важние фитохимические вещества фитаты, танин, сапонины и липакин. Состав кувшинки также богато минеральными веществами как фосфор, калий, натрий, магний, кадмый, свинец и мед. Также в составе кувшинки обнаружены витамини А, С, В1, В2 и Е.(МурталаНамадина Мухаммед2019).

Согласно литературным данным препараты из различных видов кувшинок обладают гепатопро-текторными, антиоксидантными, иммуномодулирую-

щими и противовоспалительными свойствами (МурталаНамадина Мухаммед2019).

Экспериментальными исследованиями на фоне интоксикации СС14 установлено что метаноловый экстракт кувшинки улучшает показателей печёночных проб и защитные функции печени путём ингибирование окислительного стресса. (Ифеолува Т. 2016)

Наряду с этим также установлено что кувшинка снижает концентрацию сахара крови, улучшает антиоксидантную функцию печени и оказывает противовоспалительный эффект. (NayabIshrat 2021, Рихам Омар Бакр 2017, Gurvirender Singh 2020, Jacob Jesurun RS 2013).

Михаелом Кудальбеану и соавторами (2019) были установлены противомикробные, противогрибковые, противоопухолевые и антиокси-дантные свойства экстракта кувшинки белой. Противоопухолевая активность экстракта кувшинки были исследованы в отношении клетки рака яичников, ракапредстательной железы и рака молочной железы.

Материалы и методы исследования

Исследование проводились на 30 белых беспородных крысах массой 210 – 220 гр в условии вивария. Животные были распределены на 4 группы по 6 крыс.

Формалиновый отек лапок у белых крыс вызывали путем введения под плантарный апонервоз задней лапки 0,1мл 2,5%-ного р-ра формалина. Величину воспалительного отёка определяли онкометрическим методом (Николаев,1941) через 0,5,3,24,48,76,96,120 часов от начала опыта.  Об интенсивности воспалительного процесса судили по увеличению объёма стопы.

2%-и мазь Нимфеина за 40минут до введения формалина и в последующий 1 раз в день в течение 5 суток наносили на поверхность воспалённой голеностопный сустав ежедневно.

 Серотониновый и гистаминовый отек лапок у белых крыс вызывали путём инъекции под плантарный апонервоз задней лапки 0,1мл 0,05%-ного раствора. О величине воспалительного отека судили по увеличению объема стопы по отношению к исходному. Онкометрировали через 40 мин, 1,5 и3 часа после введения флогогенных агентов. 2% мазь Нимфеина наносили на поверхность воспалённой лапки до инъекции серотонина и гистамина.

 Ожоговые воспаление задних лапок у белых крыс вызывали путём погружения правой конечности в горячую воду(Т=80⁰) на 30 сек. Л.С.Салямон (1950). Обём обожжённой лапки измеряли онкометрическим методом ежедневно. О характере течения ожогового воспаления судили по приросту обёма обожжённой лапки в процентах через 1,3, 6, 24, 48, 72, 96, 120, 168, 178 часаот начало ожога.2% мазь Нимфеина наносили на ожоговую поверхность ежедневно в течение 8 суток.В качестве стандарта использовали метилурациловую мазь и5%левомеколовую мазь.

Пример 1.Влияние Нимфеина 2% на течение гистаминового артрита у белых крыс

Согласно результатам приведенных в таблице 1,у контрольных крыс объём воспалённого голеностопного сустава по отношению к исходным даным через 2 ч от начало введения флагогенного агента увеличивается на 53,77 % а через 3ч на 34%. В сериях получивших Нимфеина 2%объём лапки через 2 ч по сравнению с исходными увеличивается на 17,6% и через 3 ч на 11,11 %.

В сериях леченных левомеколовой мазью величена отёка через 2ч по отношению к исходным данным составило 32%и через 3ч 25,24% в тоже время под действие индометациновой мазью величена отёка по отношению к исходным увеличиласьчерез 2ч на 16,8 и через 3ч на 9,34%.Полученные результаты свидетельствуют отом, что по эффективности 2% мазь Нимфеин превосходит аналогичные противовоспалительные свойства левомеколя и незначительно уступает противовоспалительной эффективности индоме-тацина. Однако известно что длительное применение синтетических мазей содержащейся синтетические компоненти могут оказать побочные и аллергические воздействие на кожу и организм. Нимфеиновая  мазь разработанный на основе природных соединений при длительном применении не оказывает побочные вляние на организм что является его основным преимуществом.

Пример 2. Влияние Нимфеина 2% на течение серотонинового отёка .

Для подтверждение антифлагогенных свойств, противовоспалительных свойствНимфеина 2% в дальнейшем исследовании были проведены на модели сератонинового артрита на белых крысах.

Согласно результатам приведенных в таблице 2 на фоне сератонинового артрита величена воспалённой лапки у контрольных животных по отношению к исходному увеличивается через 2ч 66,3% и через 3ч 47,3% а в сериях леченных 2% Нимфеином объём воспалённой лапки по отношению к исходным данным увеличивается через 2ч на 33,63% и через 3ч на 19,0%, что 32,73% и 28,3% меньше чем у контрольных крыс. В сериях получавших препараты  сравнения бутадиеновую и индометациновую мазь также оказали выраженное противовоспалительные свойства. При сравни-тельном анализе установлено что нимфеиновая мазь по эффективности превосходит аналогичные свойства бутадиеновой мази и незначительно уступает индометациновой мази.

Таким образом полученные результати свидетельствуют отом, что 2% Нимфеиновая мазь по эффективности неуступает препаратам сравнения бутадиеновой и индометоциновой мази.

Пример 3. Влияние Нимфеина 2% на течение формалинового артритана белых крысах .Влияние Нимфеиновой мази на течение формалинового артрита изучено на 25 белых крысах массой 190-200гр.Животные были распределены на 5 групп: 1-контрольная, 2-животные леченные  2%-ой Нимфеиновой мазью, 3-животные леченные 5% бутадиеновой мазью, 4-животные леченные 10% индометоциновой мазью. 

После введения под апоневроз 2,5% раствора формалина в первых 2 суток объём воспалённой голеностопного сустава по отношению к исходным показателям принятыми за 100%  увеличилась на  90,9%, на 4 сутки объём воспалённой лапки был в среднем на 109% выше, чем объём исходной лапки.

В сериях леченных 2% Нимфеиновой мазью в первых 2 суток противовоспалительные свойства испытуемого средства проявилось несколько слабо, объём  воспалённого сустава только на 39,2% было меньше чем в контроле а всериях леченных бутадиеновый мазью  величена отёка уменьшилось на 46,5% а в группе леченных индометацином на 62,46% на 4 сутки величена объёма воспалённой лапки по отношению к контрольным в сериях леченых 2% Нимфеиновой мазью уменьшилось на 75,1%.Бутадиеновой мазью на 82,9%и под влияние 10% индометоциновой мази величена отёка уменьшилось на 93,4% .

При сравнительном анализе полученных результатов было установлено что 2% Нимфеиновая мазь по эффективности незначительно уступал аналогичным свойствам бутадиеновой и значительно уступил индометоциновой мазью.

Установлено что на фоне пролиферативной фазе воспалении происходит нарушение показателей форменных элементов крови гемоглобина и СОЭ исходя из этого нами было изучено изменение данных показателей на фоне формалиного артрита.Согласно результатам приведенных в таблице 4 в контрольных сериях уровен эритроцитов по сравнению с интактными животными  снижается до 6,5±0,9, лейкоцити повыщаются на 49,50% гемоглобин снижается на 2,8% а показатель СОЭ увеличивается 53,8% .

В сериях леченных 2%Нимфеиновой мазью уровень эритроцитов по отношению к контрольным животным востанавливается на 23% лейкоцити снижаются на 32,5% гемоглобин повышается на 7,90% и уровен СОЭ по сравнению с контрольными снижается на 26,25%.

А в сериях леченных левомеколовой и индометациновой мазями гемотологические показа-тели были аналогичны показателям  испытуемой 2% Нимфеиновой мази.

Пример 4. Противоожоговые свойства 2% Нимфеиновой мази на фоне ожогового воспаления на белых  крысах.

Влияние 2% Нимфеиновой мази на течении термического ожога лапок изучено на 24 крысах массой 200,0- 210гр на 4 группах по 6 крыс в каждой: 1. Контрольные–животные.2. Животные, леченные 2% Нимфеиновой мазью. 3. Животные, леченные 5% левомеколевой мазью.4.Животные, леченные 10% индометциновой мазью. Лечение проводилось путём ежедневного однократного смазывания обожженной лапки.

У подопытных и контрольных животных среднюю величину  отёка определяли в процентах по отношению к первоначальному объёму, принятому за 100%. После нанесения термического раздражения, обожженные лапки становились отёчными и почти во всех случаях появились серозные пузырьки различной величины. В контрольной серии объём отёчной лапки через  3 ч составлял 68,5% и наиболее объём отёчное лапки наблюдались через 48 и 96 ч когда объём ожогового воспаления увеличивался соответственно до 166%, 159% и на 6 сутки объём уменьшилось на 83,5% .

2% Нимфеиновая мазь при местном применении активнотормозила развитие ожогового процесса. Через 3ч после нанесения мази объём обожженной лапки в среднем составлял около 54,8% против 68,5% в контроле. Под влиянием 2% Нимфеиновой мази через 48 и 96 ч объём обожённой лапки в среднем уменьшился до 77,0 и 71 % против 166 и 159,3% в контроле. На 6 сутки объём обожженной лапки в сериях леченных 2% Нимфеиновой мазью уменьшилось на 36,28 против 83,5% в контроле.

Пример  5. Влияние2% Нимфеиновой мази на показателей печёночных ферментов на  фоне формалинового артрита у белых крыс.

Известно что, при  экспериментальных воспалительных процессах и ожогах наблюдается нарушения показателей ферментов переаминирования,аланин -аминотрансфераза (АЛТ), аспартатаминотрансфераза (АСТ), которые используются придиагностики острых и хронических  воспалительных заболеваниях,  данные показатели имеют важное диагностическое значение.  В связи с этим нами были изучена активность данных показателей на фоне  формалинового артрита на белых крысах.

Согласно результатам приведенных в таблице 5 активность АЛТ и АСТ у контрольных животных  по сравнению с интакными животными через 48ч  повышается на 42% и 29,4 %,  а через 96 ч на 34, 5 и 45,45%, в сериях леченных 2%Нимфеиновой мазью активность АЛТ и АСТ по сравнению с контрольными животными снижается на 19%, 16%  соответственно и через 96 ч активностиуказанных  ферментов снижается на 20,5%, 27,0%. В тоже время в сериях леченных  5% левомеколовой мазью активность указанных ферментов через 48 ч  по отношению к контрольным животным снижаются на 13,5%, 11,4%соответственно, а через 96ч активность данных ферментов снижается соответственно на 10,25%,16,66%. Показатели индометациновой мази при сравнительном анализе по эффективности  были значительно лучше, чем левомеколовоймази, однако по эффективности уступали аналогичному эффекту 2%Нимфеиновой мази.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют,о том что, Нимфеиновая мазь на фоне формалинового артрита нормализует показатели ферментов переаминирования и по эффективности превосходит аналогичные свойства препаратов сравнения.

Пример 6. Влияние 2% Нимфеиновой мази на состояние периферической кровы  на фоне термического ожога задних лапок белых крыс.

Известно, что при ожогах происходят заметные изменение показателей форменных элементов состава крови.

Согласно результатам приведенных в таблице 7 на фоне ожогового воспаления у контрольных крыс по отношению к интактнымна 3 сутки исследования 

наблюдается  снижение показателей эритроцитов на 32.1% гемоглобина на 1,42% в тоже время показатели лейкоцитов и СОЭ повышаются на 58,9% и 69,2% соответственно. В серияхлеченных  2% Нимфеиновой мазью на данном этапе наблюдается восстановление   показателей эритроцитов на 59,2% и гемоглобина на 7,70% а уровень лейкоцитов и показатель СОЭ по отношению к контрольным сериям снижаются соответственно на 7,47% и 7,7%. В тоже время на фоне препаратов сравнения 5% левомеколевой и 10% метилурациловой мазей количество эритроцитов и гемоглобина по сравнению с контрольной повышаются на 13,7%, 11,6%, 6,7% и 11,6% соответственно, а количество лейкоцитов  и показатель СОЭ снижаются соответственно на 13,5% и 3,84%. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что испытуемое средство 2% Нимфеиновая мазь по эффективности неуступает известным  противовоспалительным и противоожоговым  мазям левомеколь и метилурацил.

Пример 7. Влияние 2% Нимфеиновой мази на активность ферментов переаминирования на фоне ожогового воспаления у белых крыс

Согласно результатам  приведенные в таблице 5 активности АЛТ и АСТ у контрольных животных  по сравнению с интакными  животными через 48 ч  повышается на 87,5% и 62,5 %, а через 168 ч на 61,53 и 58%, в сериях леченных 2% Нимфеиновой мазью активность АЛТ и АСТ по сравнению с контрольными животными снижается на 17,77%, 15,4%  соответственно, и через 96 ч активность указанных ферментов снижается на 16,66%, 20,4%. В тоже время в сериях леченных 5% левомеколевой мазью активность указанных ферментов через 48 ч  по отношению к контрольным животным снижаются на 13,33%, 9,6%  соответственно, а через 168 ч активность данных ферментов снижается соответственно на 9,52%,10,2%. Показатели индометациновой мази при сравнительном анализе по эффективности  были значительно лучше, чем левомеколевой мази однако по эффективности уступали аналогичному эффекту 2%  Нимфеинеовой мази.

Таким образом,  получении результаты свидетельствуют, а том что, Нимфеиновая мазь на фоне ожогового воспаления  нормализует показатели ферментов переаминирования и по эффективности превосходит аналогичные свойства препаратов сравнения.

Пример 8. Изучение местно-раздражающего действия 2% Нимфеиновой мази в эксперименте

Для того чтобы выяснит местно раздражающего действия 2%  Нимфеиновой мази ежедневно в течение одного месяца  наносили на поверхность кожных покровов, конъюктиву глаз и слизистую носа  при помощи стерильной салфетки. Эксперименты были проведены на 15 крысах и 15 кроликов массой (220-260г;2,0-2,3кг). Как показано в таблице 9 смазывание испытуемой мазью кожного покрова в течение одного месяца не вызвало  каких либо изменений токсического характера. Температура кожи во всех случаях было идентично с показателями интактных групп животных.  Шелушение  и другие признаки раздражающего эффекта отсутствовали. На несение 2% Нимфеиновой мази на конъюктиву глаз кроликам и белым крысам в течение месяца также не оказало  раздражающего  действия. Состояние зрачков у под опытных и интактных  животных во всех случаях были идентичными. Отёк слезотечения птоз отсутствовали. Нанесение 2% Нимфеиновой мази не вызывало насморка, чихания, отёка, слизистых и гнойных выделений, что свидетельствует об отсутствии раздражающего эффекта в отношении слизистой оболочки носа. Таким образом, результаты проведенных исследовании показывают, что 2% Нимфеиновая мазь не обладает раздражающим действием.

Пример 9. Влияние  2% Нимфеиновой мази  на пролиферативную фазу воспаления

Изучали  на модели с имплантированными под кожу животных стерильных ватных шариков одинаковой массы (15 мг). У крыс находящихся  под теопенталовым наркозом (теопентал 50 мг/кг внутрибрюшинно), в области спины очищенной от шерсти  на площади 3 см² после асептической обработки при помощи хирургического скальпеля делали разрез кожи и подкожной клетчатки длиной 1,5 см, пинцетом через разрез формировали полость, в которую помещали предварительно взвешенный стерильный ватный шарик, после этого рану зашивали. С первого дня эксперимента ежедневно  смазывали  место разреза 2% Нимфеиновой, левомеколевым и бутадионовым мазями.  Контрольную серию оставили на самоизлечения.

На 8 сутки под гексиналовым наркозом делая надрез  извлекали имплантированный шарик с образовавшейся вокруг него грануляционной тканью, взвешивали масса влажной гранулемы, затем гранулемы высушивали в сушильном шкафу при t 55-60°С до постоянного веса и определяли массу сухой гранулемы в  мг с последующим расчетом изменения массы, что соответствует фазам экссудации и пролиферации. 

Результаты исследования показали, что 2% Нимфеиновая и бутадиеновая мазь по сравнению с контрольными тормозили образование  грануляционной ткани на 15%,14,7% и15,53%.

Данный эффект также проявляется как в фазе экссудации, так и в фазе пролиферации хронического пролиферативного воспаления. При сравнительном анализе выяснилось, что 2% Нимфеиновая мазь по эффективности  превосходят аналогичные свойства левомеколевой мази и на 0,5% уступает бутадиеновой мази.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что испытуемые мази оказывают  выраженный  противовоспалительный  эффект как при экссудативном,так и при пролиферативном  фазах воспаления.

Согласно полученным результатам можно сделать следующие заключение;

1. Средство «Нимфеин» на фоне гистаминового и сератонинового артрита на белых крысах оказывает выраженное противовоспалительное дейс-твие.