СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ СТЕРОИДОВ

Изобретение касается производных стероидов, в частности соединений общей формулы


где R1- -C1-C4 – алкилдигидроиндолил, пиридинил, фенил, замещенный ди -C1-C4- - алкиламиногруппой или ди-C1-C4 – алкиламино -C1-C4 – алкильной группой (в которых азот может быть окислен), пирролидинилом, ди -C1-C4 – алкиламино - -C1-C4 – алкилтио -, ди - -C1-C4 – алкилно-C1-C4 – алкилокси – или триметилсилильной группой; R2 - CH3, C2H5; R3 – OH, CH3O, этинил, карбонил, -C-NOH; R4 – H; С2-C4 – алкенил, С3-С6 – алкадиен, С2-С6 – алкинил (может быть замещен галогеном, C6H5, (CH3)3Si, низшим алкенилом); В и С образуютдвойную связь или эпоксидную группу, которые обладают фармакологически ценными свойствами. Цель изобретения – создание новых веществ с нехарактерной для данного класса активностью. Синтез ведут из соответствующего кеталя (А – кетальная группа, которая может быть циклической или нециклической), который дегидратируют катионообменной сульфосмолой или НС1. полученный продукт при необходимости обрабатывают гидроксиламином или, если R1 – ди - -C1 – C4 – алкиламино –C1-С4 – алкилфенил, окисляют, например, мета-хлорнадбензойной кислотой с получением целевого соединения, содержащего группу, окисленную по азоту, и 9,10 – эпоксигруппу. Новые вещества проявляют ярко выраженный аффинитет к глюкокортикоидному и прогестогенному рецепторам, без проявления активности на минералокортикоидном и эстрогенном рецепторах при токсичности ЛД50 100 мг/кг. 3 табл.

Изобретение относится к способу получения новых производных стероидов общей формулы

(1)

где R1 - фенил, замещенный ди - (С1 – С4) – алкиламиногруппой, возможно окисленной по по азоту, ди – (С1 - С4) – алкиламино – (С1 – С4) - алкилгруппой, возможно окисленной по азоту, пирролидинильной группой, ди- - (С1 – С4) - - алкилтиогруппой, ди - - (С1 – С4) алкиламино –(С1 – С4) - - алкилоксигруппой, триметилсилильной группой,
или R1 – N-(C1 – C4) алкилдигидроиндолил;
R2 - метил, этил;
R3 - гидроксигруппа, метоксигруппа, этинил, группа С = А - - С = 0 или =С NOH-rpyппa;
R4 - водород, С2 – С4 - алкинил, С3 – С6 - алкадиен, С2 – С6 - алкинил, в некоторых случаях замещенный галогеном, фенильной группой, триметилсилильной группой, или низшей алкенильной группой.
В и С. вместе образуют двойную связь или эпоксидную группу, обладающих ценными фармакологическими свойствами.
Цель изобретения - получение новых стероидных соединений, обладающих антипрогестомиметической и антиглюко-кортикоидной активностью, что является неожиданным для соединений аналогичной структуры.
Пример 1. 17β – Гидрокси 17α - - (проп – 1 - инил) - 11β - (4-пиридил) – эстра - 4,9 –диен – З - он.
Стадия А. 11β - (4 - Пиридил) – 3, 3 - - [1,2 – этандиил – бис - (окси)] -17α -(проп - -1 - инил) – эстра – 9 – ен – 5α, 17β - диол.
При 20°С к раствору, содержащему 6,16 г комплекса диметилсульфида и монобромид меди в 40 см3 тетрагидрофурана, прибавляют 100 см3 раствора бромида 4 -хлорпиридинилмагния в тетрагидрофуране (раствор 0,5 - 0,6 М, полученный, исходя из 15г. 4-хлорпиридина и 6г. магния). Перемешивают 20 мин. при комнатной температуре в инертной атмосфере и прибавляют в течение 10 мин. раствор, содержащий 3,7г. 3,3 - [1,2 –этандиил – бис - (окси)] - -5α, 10α - эпокси-17α - (проп -1 - инил) - - эстра - 9(11)-ен-17β -oлa. Перемешивают в течение 1ч. при комнатной температуре и выливают в смесь холодной воды и хлорида аммония. Реакционную смесь перемешивают 0,5ч. при комнатной температуре и выливают в смесь холодной воды и хлорида аммония. Реакционную смесь перемешивают 0,5ч. при комнатной температуре и экстрагируют эфиром. Промывают насыщенным раствором хлорида натрия, сушат и концентрируют досуха под уменьшенным давлением. Получают 6г. продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетон (1:1), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Выделяют 3,15г. продукта, который сушат в вакууме в 0,1мм ртути при 6О°С. Таким образом получают целевой продукт. [α]D= - 52 ± 1,5º (к = 1% СНСl3).
Стадия Б. 17β – Гидрокси – 17α - (проп – 1 – инил) – 11β – (4-пиридил) - эстра-4,9 - - диен-3-он. I
В течение 3ч при комнатной температуре и в инертной атмосфере перемешивают раствор, содержащий 2,9г. полученного в стадии А продукта, 14см метанола и 7 см3 2 н. соляной кислоты. Затем прибавляют раствор, содержащий 200см эфира и 90см3 насыщенного раствора бикарбоната натрия. Перемешивают в течение 15 мин при комнатной температуре, декантируют и экстрагируют эфиром. Промывают экстракты насыщенным водным раствором хлорида натрия, а затем сушат и концентрируют досуха под уменьшенным давлением. Получают 2,3г. продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетон (6:4). Выделяют 1,7г. продукта, который сушат под давлением в 0,1мм ртути в течение 24ч, из которых 8ч - при 80°С. Таким образом получают целевой продукт [α]D= - 52 ± 1,5º (к = 1% СНСl3).
Таким же образом получают 17β-гидрокси – 17α - (проп - 1 - инил) – 11β - (3 - пиридил) – эстра - 4,9 – диен - 3-он, [α]D = + 14° (к = 1% СНСl3), и 17β – гидрокси – 17α - (проп – 1 - инил) – 11β - (2 - пиридил) - - эстра - 4,9 – диен – 3 - он, [α]D = -2° (к = 1% СНС13).
Пример 2. 17β – Гидрокси – 11β - [3 - (N, N - диметиламино) пропил] – 17α - (пропил – 1 - ил) – эстра - 4,9 – диен – З - он.
Стадия А. 11β - [3-(N,N - Диметиламино) пропил] - 3,3 –[1,2 - этандиил-бист - (окси)] 17α - (проп – 1 - инил) – эстра – 9 – ен – 5α, 17β-диол.
При 0°С в течение 5мин. 12,33г. комплекса диметилсульфидмонобромида меди прибавляют к 141см3 хлорида 3 - - (N,N - диметиламино) пропилмагния (раствор 0,85 М, полученный исходя из 42г. хлop – 3 - N,N – диметиламинопропана и 10,5г. Магния). Перемешивают в течение 25мин. При 0ºС и прибавляют по каплям 3,70г. 3,3 – [1,2 – этандиил – бис – (окси)] – 5α, 10α – эпокси – 17α – (1 – пропинил) –эстра – 9(11) – ен – 17β – ола в 50см3 тетрагидрофурана. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании 3ч. при 0ºС и выливают в смесь, содержащую 40г. хлористого аммония и 200см³ ледяной воды. Перемешивают в течение 15мин при комнатной температуре, а затем экстрагируют эфиром. Промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и концентрируют досуха под уменьшенным давлением. Получают 4,6г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен – метанол (8:2). Выделяют 2,55г продукта.
[α]D= - 86 ± 1,5º (к = 1% в СНСl3).
Стадия Б. 17β – Гидрокси – 11β – [3 – (N,N – диметиламино) – пропил] -17α – (проп -1 –инил_ - эстра – 4,9 – диен – 3 – он.
При комнатной температуре перемешивают в течение 4ч в инертной атмосфере 2,4г полученного в стадии А продукта, 14см³ метанола и 7см³ 2 н. соляной кислоты. Затем прибавляют 200см³ изопропилового эфира и 90см³ насыщенного раствора бикарбоната натрия. Перемешивают 0,5ч при комнатной температуре, декантируют и экстрагируют эфиром. Промывают насыщенным раствором хлористого натрия и сушат. Концентрируют досуха под уменьшенным давлением и получают 1,8г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлороформ – метанол (8:2). Получают 1,30г продукта, который сушат при 30-40ºС под уменьшенным давлением в 0,1мм ртути. Таким образом получают 1,25г целевого продукта.
[α]D= - 114 ± 2,5º (к = 1% СНСl3).
Пример 3. 11β – [4 –(N,N – Диметиламиноэтокси) фенил] – 17β – гидрокси – 17α – (проп – 1 – инил) – эстра – 4,9 – диен – 3 –он.
Стадия А. 3,3 – Этандиил – бис – (окси) – 11β – [4 – (N,N – диметиламиноэтилокси) фенил] – 17α – (проп – 1 – инил) –эстра – 9 –ен – 5α, 17β – диол.
а) Магнийорганическое соединение 4 – (N,N – диметиламиноэтилокси) бромбензола.
В течение 45мин вводят по каплям раствор, содержащий 24г 4 – (N,N – диметиламиноэтилокси) бромбензола в 90см³ безводного тетрагидрофурана. Реакцию катализируют добавлением 0,2см³ 1,2 – дибромэтана, затем перемешивают еще 1ч при 25ºС. Таким образом получают раствор в 0,7 М, который употребляют в данном виде.
б) Конденсация.
Приготовленный раствор прибавляют к раствору, содержащему 6,16г комплекса диметилсульфида и монобромид меди в 20см³ тетрагидрофурана. Перемешивают 20мин при комнатной температуре и прибавляют по каплям в течение нескольких минут 3,7г 3,3 –[1,2 – (этандил –бис – (окси)] -5α, 10α – эпокси – 17α – (проп – 1 –инил) эстра – 9(11) – ен – 17β – ола в 50см³ тетрагидрофурана. Перемешивают 20мин при комнатной температуре и прибавляют по каплям в течение нескольких минут 3,7г 3,3 – [1,2 – (этандиил – бис –(окси)] – 5α, 10α – эпокси – 17α – (проп – 1 – инил) эстра – 9(11) – ен – 17β – ола в 50см³ тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 1ч в инертной атмосфере, а затем выливают реакционную смесь в раствор, содержащий 15г хлористого аммония в 200см³ ледяной воды. Экстрагируют эфиром и промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия. Сушат и концентрируют под уменьшенным давлением. Таким образом получают 18,3 г масла, которое хроматографируют на гидроокиси алюминия, элюируя хлороформом, и получают 4,5г целевого продукта. [α]D= - 44 ± 1,5º (к = 1% СНСl3).
Стадия Б. 11β – [4 – (N,N – Диметиламиноэтилокси) фенил] – 17β – гидрокси – 17α-(проп – 1 – инил) – эстра – 4,9 – диен – 3 – он.
К 4,5г полученного в стадии А продукта в 20см³ метанола прибавляют 9,5см³ 2 н. соляной кислоты. Выдерживают раствор при перемешивании в течение 2ч при комнатной температуре и прибавляют 260см³ эфира и 110см³ насыщенного раствора бикарбоната натрия. Выдерживают при перемешивании в течении 15мин при комнатной температуре, декантируют и экстрагируют эфиром. Сушат и концентрируют досуха под уменьшенным давлением. Получают 3,3г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен – метанол (92,5:7,5). Таким образом получают 1,8г целевого продукта, который находится в аморфном виде. [α]D= + 71º (к = 1% СНСl3).
Пример 4. 17β – Гидрокси – 11β –(4 – диметиламинофенил) – 17α – (проп – 1- инил)-эстра – 4,9 – диен – 3 – он.
Стадия А. 11β – (4 – Диметиламинофенил) – 3,3 – [1,2 – этандил – бис – (окси)] – 17α – (проп – 1 инил) эстра – 9 – сн – 5α, 17β – диол.
Раствор, содержащий 38 ммоль бромида п - диметиламинофенилмагния в тетрагидрофуране прибавляют к суспензии, содержащей 4,1г комплекса монобромида меди и диметилсульфида в 20 см тетрагидрофурана. Затем прибавляют 2,45г 3,3 – [I,2 – этaидиил - биc-(oкcи)] - эстр-9(11) – ен – 17α - ола в растворе тетрагидрофурана. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании в течение 10мин, гидролизуют при помощи 50см³ насыщенного раствора хлористого аммония. Декантируют, экстрагируют эфиром, промывают органический слой водой и сушат. Выпаривают растворители под уменьшенным давлением и получают 11г сырого целевого продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью циклогексан - этиловый эфир уксусной кислоты (6:40). Таким образом получают 1,8 г целевого продукта (11β) и 750мг продукта 11α. Перекристаллизуют в изопропиловом эфире и этиловом эфире и этиловом эфире уксусной кислоты. Т. пл. = 210°С, [α]D = - 66,5° (к = 1% СHСl3).
Стадия Б. 17β – Гидрокси – 11β - (4 - диметиламинофенил) -17α - (проп - 1 - инил) -эстра - 4,9 – диен – 3 - он.
2см³ концентрированного раствора соляной кислоты прибавляют к раствору, содержащему 1,53г полученного в стадии А продукта в 60см³ метанола. Перемешивают 30мин при комнатной температуре и прибавляют 150см³ эфира, а затем 50см³ 1 н.водного раствора едкого натра. Реакционную среду перемешивают в течение 15 мин и декантируют, сушат органический слой. Отгоняют растворители под уменьшенным давлением и получают 1,4г сырого продукта, который очищают на двуокиси кремния, элюируя смесью циклогексан - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3). Получают 0,932г целевого продукта. Т. пл. = 150°С, [α]D = + 138,5° (к = 0,5% СHСl3).
Пример 5. 17β – Гидрокси – 17α - (проп – 1 - инил) - 11β - [(4 -триметилсилил) фенил] – эстра - 4,9 – диен – З – он.
Стадия А. 11β [(4 - Триметилсилил) фенил] – 3,3 [l,2 – этандиил – бис - (окси)] – 17α – (проп – 1 - инил) – эстра – 9 – ен – 5α, 17β - диол.
При – 30ºС в инертной атмосфере к 45см³ 0,65 М раствора бромида 4 - триметилсилилфенилмагния в тетрагидрофуране прибавляют 200мг монохлорида меди, а затем по каплям выдерживая температуру -20°С, прибавляют раствор 3,3г 3,3 – [1,2 –этандиил – бис - (окси)] - 5 α, 10α – эпокси – 17α (проп - 1 -инил) – эстра - 9(11) – ен – 17β - ола в 25см³ тетрагидрофурана. По истечении 1ч гидролизуют при помощи водного раствора хлористого аммония, затем экстрагируют эфиром, сушат и отгоняют растворители под уменьшенным давлением. Хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетон (94:6), содержащей 0,1% триэтиламина. Выделяют. 2,87г 20 целевого продукта, который очищают перекристаллизацией в изопропиловом эфире, а затем - в этиловом эфире уксусной кислоты. Т. пл. = 226°С,
[α]D = - 60°±1,5º (к = 0,9% СHСl3).
Стадия Б. 17β – Гидрокси – 17α - (проп-1-инил) - 11β - [(4 -триметилсилил) фенил] – эстра - 4,9 – диен – 3 - он.
1,7г сульфоновой смолы Редекс прибавляют к раствору, содержащему 1,68г полученного в стадии А продукта в 17см³ кипящего спирта при 90°С. Нагревают с обратным холодильником в течение 30мин, отсасывают смолу, прополаскивают ее хлористым метиленом и упаривают фильтрат под уменьшенным давлением. Таким образом полученный остаток забирают в хлористый метилен, сушат и отгоняют растворитель под уменьшенным давлением. Полученный остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (85:15). Таким образом получают 1,217г целевого продукта. Т. пл. 212°С, [α]D = +94° (к = 0,9% СНСl3).
Таким же образом получают 17β - гидрокси 17α - (проп - 1 -инил) – 11β - [(3 – триметилсилил) фенил] – эстра - 4,9 - диен - З – он. [α]D = +52,5 ± 2° (к = 1% СНСl3).
Приготовление 3,3 - [1,2 - этандиил - бис - (окси)] - 17α - (проп – 1 - инил) – эстр - 9(11) - ен - 5,10 - эпокси - 17β-ол.
Стадия А. 3,3 - [1,2 - Этандиил - бис- (окси)] - 17α - (проп - 1 - инил) – эстра -5(10)9(11) - диен - 17β - ол.
При перемешивании охлаждают до 0°С 207см³ раствора в 1,15% бромида этилмагния в тетрагидрофуране, пропускают в течение 1ч 30мин при 0°С газ пропин, предварительно высушенный на хлористом кальции. Дают температуре дойти до комнатной и перемешивают еще Iч, выдерживая все это время барботаж. Затем прибавляют при 20-25°С в течение 0,5ч раствор, содержащий 30г 3,3 - (1,2 - этандиил-бис-(окси)] -эстра-5(10)9(11)-диен-17-она в 120см³ безводного тетрагидрофурана и одну каплю безводного триэтиламина. Перемешивают при комнатной температуре в течение 2ч и выливают в смесь дистиллированной воды, хлористого аммония и льда. Перемешивают, экстрагируют три раза этиловым эфиром. Промывают водой органический слой, сушат его и концентрируют под уменьшенным давлением. Остаток сушится в вакууме. Получают 35,25г целевого продукта.
ЯМР-спектр (СDСl³),ч, на млн.:
0,83 Н метила в 18 позиции
1,85 Н метила с С C – CH3
5,65 Н углерода в 11 позиции
4 Н этилена кеталя
Стадия Б. 3,3-[1,2-Этилендиокси-бис-(окси)]-17α-(проп-1-инил)-эстр-9(11)-ен-5α, 10α-эпокси-17α-ол.
При перемешивании и при барботаже азота вводят 30г приготовленного в стадии А продукта в 150см³ хлористого метилена. Охлаждают до 0°С, а затем прибавляют за один раз 1,8см³ полуторной гидроокиси гексафторацетона и при перемешивании 4,35см 85%-ной перекиси водорода. Реакционную смесь выдерживают при перемешивании и при барботаже азота при 0 С в течение 72ч. Затем выливают реакционный раствор в смесь, содержащую 250г льда и 500см³ 0,2 н.раствора тиосульфата натрия. Перемешивают некоторое время, а затем экстрагируют хлористым метиленом. Органический слой промывают дистиллированной водой, сушат его на сернокислом натрии в присутствии пиридина, а затем концентрируют под уменьшенным давлением. Остаток сушат под уменьшенным давлением. Получают 31,6г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (90:1.0). Таким образом, получают целевой продукт.
ЯМР-спектр (CDCl3),ч. на млн.
0,82 Н метила в 18 позиции
1,83 Н метила радикала С C – CH3
6,1 Н углерода в 11 позиции
3,92 Н кеталя
Пример 6. 17β - Этинил - 17α – гидрокси - 11β - (4-диметиламинофенил) - эстра - 4,9-диен-З-он
Стадия Л. 3,3-Диметокси-5α-17α-гидрокси-11-β-(4-диметиламинофенил)-17β-этинил-эстра-9-ен.
В инертном газе перемешивают 2,8г 3,3-диметокси-5α-10α-эпокси-17βр-этинил-17β-гидрокси-эстра-9(11 )-ена, 56см³ безводного тетрагидрофурана и 80мг безводного монохлорида меди. Перемешивают в течение 5мин при комнатной температуре, а затем ставят на баню ледяной воды и прибавляют по каплям 33см³ 0,95 М раствора бромида (4-диметиламинофенил) магния в тетрагидрофуране. Затем дают температуре подняться до комнатной.
К суспензии комплекса бромид меди - диметилсульфид (6,15г) в 30см³ безводного тетрагидрофурана прибавляют 63см³ бромистого (4-диметиламинофенил) магния так,что температура остается ниже 28,5°. Оставляют при перемешивании в течение 30мин, затем прибавляют по каплям полученный раствор. Выдерживают в течение 18ч при перемешивании и при комнатной температуре, выливают в.насыщенный раствор хлорида аммония, перемешивают в течение 10мин, экстрагируют хлороформом, промывают водой органический слой сушат его и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), содержащей 0,5 на тысячу триэтиламина, получают 1,28г продукта. Этот продукт заново очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя той же смесью, и получают 0,84г целевого продукта.
Стадия Б. 17β-этинил-17α-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-3-он.
0,76г полученного в стадии А продукта смешивают с 15см³ метанола и 1,6см³ 2 н.соляной кислоты. Перемешивают в течение 1,5ч, а затем выливают в насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, экстрагируют хлороформом, сушат органический слой и отгоняют растворитель. Таким образом получают 0,76 г сырого продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), а затем элюируя смесью этиловый эфир - петролейный эфир (3:1). Получают 0,435г целевого продукта, который кристаллизуют в изопропиловом эфире. Т. пл. = 142°С, [α]D = +235,5 ± 4,5° (к = 0,45% СНСl3).
Исходный продукт стадии А получают следующим образом.
Стадия А. 3,3-Диметокси-17α-гидрокси-17β-этинил-эстра-5(10)9(11)-диен.
При комнатной температуре в течение 5мин перемешивают 16,8г 3,3-ди-метокси-17β-гидрокси-17α-этинил-эстра-5(10)9(11)-диена, 175см³ безводного тетрагидрофурана, 4,35г бромида лития, а затем охлаждают до -60°С и прибавляют 37см³ раствора 1,35 М бутиллития в гексане. Перемешивают в течение 30мин, а затем прибавляют 3,9см3 хлористого метансульфонила оставляют в течение,1ч при -60°С и при перемешивании. Затем выливают в 500см³ насыщенного водного раствора хлористого аммония, перемешивают в течение 10мин, экстрагируют хлористым метиленом, сушат органический слой, прибавляют 2,5см³ пиридина, потом упаривают досуха под уменьшенным давлением при 0ºС. Прибавляют 75см³ тетрагидрофурана к полученному остатку, а затем 12,5см³ воды, содержащей 0,75г нитрата серебра. Выдерживают 18ч при -30°С, а затем 4ч - при комнатной температуре. Выливают в 500см³ в водный, полунасыщенный раствор хлористого аммония, содержащий 5г цианида натрия. Перемешивают в течение 30мин при 20°С, экстрагируют хлороформом, промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (9:1). Получают 3г целевого продукта. Т. пл.≈ 150°С [α]D = +125 ±2,5° (к = 1% СНСl3).
Стадия б. 3,3-Диметокси-5α-эпокси-17β-этинил-17α-гидрокси-эстр-9(11)-ен.
Смешивают 2,6г полученного в стадии а продукта, 12см³ хлористого метилена и одну каплю пиридина. Охлаждают до 0°С, прибавляют 0,12см³ гексахлорацетона и 0,65см³ перекиси водорода (200 объемов). По истечении 1ч перемешивания прибавляют 13см³ хлороформа, а затем продолжают перемешивание в течение 18ч. Выливают в 100см³ насыщенного раствора тиосульфата натрия, перемешивают в течение 10мин, экстрагируют хлороформом, промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия органический слой, сушат и отгоняют растворитель. Получают 2,8г целевого продукта, применяемого в данном виде в следующей стадии. (Продукт содержит малое отношение эпоксида β).
Пример 7. 17β-Гидрокси-17α-фенил-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-11β (4-диметиламинофенил)-эстра-9-ен-5α-гидрокси-17-он.
а)Приготовление магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 29г стружек магния и 50 см безводного тетрагидрофурана. Выдерживая при 35 ± 5°С, вводят в течение 2,5ч смесь 200г 4-диметиламинобромбензола в 950см³ безводного тетрагидрофурана. Таким образом получают 0,8 М раствор целевого магнийорганического соединения.
б)Прибавка магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 25г 3,3-[1,2-этандиил-бис- (окси)]-5α-10α-эпокси-эстра-9(11)-ен-17-она, 500см³ безводного тетрагидрофурана и 0,757г монохлорида меди. Охлаждают до 0 - (+5)°С, по каплям прибавляют в течение 1ч 15мин 284см³ полученного раствора магнийорганического соединения. Затем перемешивают в течение 15 мин, выливают в насыщенный раствор хлористого аммония, экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, органический слой промывают насыщенным раствором хлористого аммония, а затем насыщенным раствором хлористого натрия. Сушат органический слой и упаривают досуха под уменьшенным давлением. Получают 46г сырого продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:3), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Получают 17,76г целевого продукта. Т. пл. = 178°C.
Нечистые фракции полученного продукта заново хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - ацетон (8:2), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Заново получают 6,35г целевого продукта. Т. пл. = 176ºС. Таким образом полученный продукт используют в следующей стадии.
Стадия Б. 3,3-[l,2-Этандиил-бис-(oкси)]-5α-17β-дигидрокси-11β-(4-ди-метиламинофенил)-17α-фенил-эстра-9-ен.
При +25°С и в течение 30мин к раствору 33,3см³ фениллития (I,5 М) прибавляют 4,51г полученного в стадии А продукта в 45,1см безводного тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 4ч при комнатной температуре, выливают в насыщенный водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат, и отгоняют растворитель. Получают 5,6г сырого продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетон (9:1), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Получают 1,16г целевого продукта, который кристаллизуют в смеси хлористый метилен - изопропиловый эфир. Т. пл. = 240°С, [α]D+53±2,5° (к = 0,5% СНСl3).
Стадия В. 17β-Гидрокси-17α-фенил-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-3-он.
В инертном газе смешивают 1,5г полученного в стадии Б продукта в 45см³ метанола. Охлаждают до 0 - (+5)°С и вводят 3см³ 2 н.соляной кислоты. Перемешивают в течение 1ч при 0-(+5)°С, а затем прибавляют 90см³ эфира и 90см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия. Перемешивают в течение 5мин, декантируют, экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Получают 1,30г продукта, который очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1). Получают 0,93г целевого продукта, который кристаллизуют в смеси хлористый метилен - изопропиловый эфир. Т. пл.=226°C, [α]D=151,5° (к = 0,4% СНСl3).
Исходный продукт стадии А получают следующим образом.
Смешивают 11,18г 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)] -эстра-5(10)9(11)-диен-17-она и 56см³ хлористого метилена, прибавляют 2 капли пиридина, охлаждают до 0°С и вводят 4,3см³ полуторного гидрата гексафторацетона, а затем прибавляют 1,6см³ 85%-ной перекиси водорода. Выдерживают при перемешивании и в инертном газе при 0ºС в течение 23ч. Затем выливают в смесь, содержащую 200см³ 0,5 М раствора тиосульфата натрия и 200г льда. Выдерживают 30мин при перемешивании, а затем экстрагируют хлористым метиленом, содержащим следы пиридина. Органический слой промывают водой, сушат его и отгоняют растворитель. Получают 11,4г целевого продукта, используемого в следующей стадии.
Пример 8. 11β-(4-Диметиламинофенил)-17β-гидрокси-23-метил-[17α]-I9,21-динорхола-4, 9, 23-триен-20-ин-З-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-диметиламинофенил) 23-метил-[17α]-19,21-динорхола-9,23-диен-20-ин-5α-17β-диол.
В инертном газе смешивают 4,5г третбутилата калия с 90см³ безводного тетрагидрофурана. Охлаждают до -10°С и прибавляют 10,61см³ 2-метил-1-бутен-З-ина. Перемешивают в течение 15мин при -10°С, а затем прибавляют в течение 15 мин раствор 4,5г полученного в стадии А примера 7 продукта в 45см³ безводного тетрагидрофурана. Перемешивают 30мин при -10°С, а затем 4ч при 0 - (+5)°С. Выливают в 500см³ насыщенного, водного раствора хлористого аммония, экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и упаривают досуха.
Получают 5,56 г сырого целевого продукта. Т. пл. = 205°С. Продукт используется в продолжении синтеза.
Сырой продукт, хроматографированный на двуокиси кремния, элюированный смесью хлористый метилен - этиловый эфир уксусной кислоты (9:1) с 1 на тысячу триэтиламина, а затем перекристаллизированный в этиловом эфире уксусной кислоты.
Т. пл. = 215°С.
Стадия Б. 11β-(4-Диметиламинофенил)-17β-гидрокси-23-метил-[17α]-19, 21-динорхола-4,9,23-триен-20-ин-3-он.
В инертной атмосфере смешивают 5г полученного в стадии А продукта с 300см³ метанола и 10см³ 2 н.соляной кислоты. Перемешивают 15мин при 20°С, прибавляют 300см³ хлористого метилена, а затем 300см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия. По истечении 10 мин перемешивания декантируют, экстрагируют, хлористым метиленом промывают органический слой водой, сушат и упаривают досуха. Получают 4,5г сырого целевого продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1). После перекристаллизации продукта в окиси диизопропила получают 2,01г целевого продукта. Т. пл.= 185ºС, [α]D = +88,5 ± 1,5° (к = 1% СНСl3).
Пример 9. 11β-(4-Диметиламинофенил)-17β-метокси-23-метил-[17α]-19,21-динорхола-4, 9, 23-триен-20-ин-З-он. •
В инертном газе смешивают 4,5г третичного бутилата калия в 90см безводного тетрагидрофурана. Суспензию охлаждают до -10°С, а затем прибавляют по каплям 10,61см³ 2-метил-1-бутен-З-ина. Перемешивают в течение 15мин при -10 С, а затем прибавляют в течение 15мин 4,5г полученного в стадии А примера 7 продукта в 45см³ безводного тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 30мин при -10°С, а затем 4ч при 0 - (+5)°С. Затем прибавляют 7,5см³ метилйодида и выдерживают при перемешивании в течение 30мин на ледяной ванне. Затем выливают смесь в 500см³ 0,1 н.соляной кислоты. Перемешивают в течение 30мин при комнатной температуре, экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, промывают органический слой насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, а затем насыщенным водным раствором хлористого натрия.
Сушат и отгоняют растворитель. Хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен-этиловый эфир уксусной кислоты (95:5). Получают 2,7г целевого продукта, который перекристаллизуют в метаноле. Т. пл.= 105°С.
Пример 10. 21-Хлор-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-[17α]-19-норпрегна-4,9-диен-20-ин-3-он.
Стадия А. 21-Хлор-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-диметиламинофенил)-х17α]-19-норпрегна-9-ен-20-ин-5α-17β-диол.
Приготовление литийорганического соединения.
Смешивают в инертном газе 77,5см³ 1 М раствора бутиллития в гексане с 310см³ безводного этилового эфира. Охлаждают до 0 - (+5)ºС и прибавляют в течение 45мин раствор 7см³ трихлорэтилена в 28см³ безводного этилового эфира. Перемешивают 1ч, давая температуре подняться до 20°С.
Конденсация.
Полученную смесь охлаждают до 0 - (+5)ºС и прибавляют по каплям, в течение 30мин, раствор 7г полученного в стадии А продукта примера 7 в 70см³ тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 30мин при 0 - (+5)°С, а затем дают температуре подняться до 20ºС, медленно выливают в насыщенный водный раствор хлористого аммония, декантируют, экстрагируют хлористым метиленом, промывают водой, органический слой, сушат его и отгоняют растворитель. Получают 8,5г сырого продукта (Т. пл. = 220°С), который вводят в 42,5см окиси диизопропила. Перемешивают в течение 30мин, отсасывают и получают 6,38г целевого продукта, Т. пл. = 230°С.
Можно очистить продукт хроматографическим способом на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Растворением этого продукта в хлористом 45 метилене и прибавкой окиси диизопропила получают кристаллизованный продукт. При т.пл. 240ºС, [α]D = -83,5 ± 1,5° (к = 1% СНСl3).
Стадия Б. 21-Хлор-17-β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-[17α] l9-1-норпрегна-4,9-диен-20-ин-3-он.
В инертном газе смешивают 6.38г полученного в предыдущей стадии продукта, и 191,4см³ 95%-ного этанола. Прибавляют 15см³ 2 н.соляной кислоты, перемешивают в течение 1ч, прибавляют 300см³ хлористого метилена, а затем 200см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия. Декантируют, экстрагируют хлористым метиленом, промывают водой органический слой, сушат и отгоняют растворитель. Получают 6г сырого продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3). Получают 3,95г целевого продукта, который кристаллизуют в этиловом эфире уксусной кислоты, Т. пл. = 240°С [α]D=+111 ± 2° (к = 1% СНСl3).
Пример 11. N-Окись 21-хлор-I7β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-[17α]-19-норпрегна-4,9-диен-20-ин-3-она.
В инертном газе смешивают 1,2г полученного в примере 10 продукта в 24см³ хлористого метилена. Охлаждают до 0 - (+5)°С и прибавляют смесь 0,54г 85%-ной метахлорнадбензойной кислоты в 10,8см³ хлористого метилена. Перемешивают в течение 1ч при 0 - (+5),С, выливают в 2 н.раствор тиосульфата натрия, экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, а затем водой, сушат и отгоняют растворитель. Получают 1,3г сырого продукта. Этот продукт очищают хроматографией на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - метанол (7:3). Получают 1,15г целевого продукта. [α]D=+47,5 + 2,5° (к = 0,7% СНСl3).
Пример 12. N-Окись 21-хлор-9α-10α-эпокси-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-[17α]-19-норпрегн-4-ен-20-ин-3-она.
1,18г полученного в примере 10 продукта растворяют в 23,6см³ хлористого метилена, охлаждают до 0 -(+5)ºС и прибавляют в течение 15мин смесь 1,17г метахлорнадбензойной кислоты (85%-ной) в 23,4см³ хлористого метилена. Перемешивают в течение 2ч при 20°С, опять прибавляют ;0,117г метахлорнадбензойной кислоты, перемешивают еще в течение 1ч, выливают смесь в 0,2 н. раствор тиосульфата натрия, экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой насыщенный водным раствором бикарбоната натрия, а затем водой, сушат и упаривают досуха. Получают 1,14г сырого продукта. Т. пл.= 220°С.
Продукт очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - метанол (8:2) и получают 1г целевого продукта.
Т. пл. = 270ºС, [α]D=+39,5±2,5º (к=0,5%CHCl3).
Пример 13. 21-Хлор-9α-10α-эпокси-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-[17α]-l9-норпрегн-4-ен-20-ин-3-он,
В инертном газе смешивают 0,63г полученного в примере 12 продукта с 6,3см³ уксусной кислоты. Прибавляют 0,34г трифенилфосфина, перемешивают в течение 45мин при комнатной температуре, выливают в воду, экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой водой, сушат его и отгоняют растворитель. Получают 0,9г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1). Таким образом, полученный продукт кристаллизуют в смеси хлористый метилен - изопропиловый эфир и получают 0,346г целевого продукта. Т. пл. = 265°С, [α]D=+45 ± 2° (к = 0,8% СНCl3).
Пример 14. 17β-Гидрокси-11β - (4-диметиламинофенил)-21-фенил-[17α]-19-норпрегна-4,9-диен-2О-ин-3-он.
Стадия А. 21-Фенил-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-диметиламино-фенил)5α-17β-дигидрокси-[17α]-19-норпрегн-9-ен-20-ин.
В инертном газе смешивают 4,17г третичного бутилата калия в 83см³ безводного тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 5мин, а затем охлаждают до -10°С и прибавляют по каплям 4,5см³ фенилацетилена. Перемешивают суспензию в течение 5мин, а затем прибавляют по каплям при -10°С раствор 4,17г продукта, полученного в стадии А примера 7, в 41см³ безводного тетрагидрофурана. В конце введения доводят температуру до 0°С, затем по истечении 1ч, смесь выливают в насыщенный раствор хлористого аммония. Экстрагируют эфиром, промывают органический слой при помощи насыщенного водного раствора хлористого натрия, сушат, концентрируют досуха и получают 4,7г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируют смесью хлористый метилен - ацетон (95:5). Получают 3,71г целевого продукта. Т. пл. = 168ºС, [α]D=-119,5±2º (к=1% CHCl3).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-17β-(4-диметиламинофенил)-21-фенил-[17α]-19-норпрегна-4,9-диен-20-ин-3-он.
3,49г полученного продукта растворяют в 68см³ метанола, а затем прибавляют 6,3см³ 2 н. соляной кислоты. По истечении 30мин перемешивания выливают в смесь 180см³ этилового эфира и 90см³ 0,25 М раствора бикарбоната натрия. Перемешивают в течение 5мин, декантируют, экстрагируют эфиром, промывают органические слои 0,25 М раствором бикарбоната натрия, а затем насыщенным раствором хлористого натрия. Сушат, отгоняют растворитель и получают 4,35г продукта, который очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен – ацетон (95:5). Получают 2,13г целевого продукта после кристаллизации в изопропиловом эфире. [α]D=+22,5 ±1° к = 1%CHCl2).
Пример 15. 17β-Гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(пропа-1,2-диенил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 11β-(4-Диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси]-17α-(пропа-1,2-диенил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол и 11β-(4-диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-17α-(проп-2-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
Приготовление литийорганического соединения.
В 50см³ безводного тетрагидрофурана при 0 - (+5)°С барботируют аллен до поглощения 2,1г. Охлаждают до -70°С и прибавляют в течение 15 минут 23,9см³ 1,3 М раствора бутиллития в гексане. Полученную смесь перемешивают в течение 15мин при -70ºС
Конденсация.
К полученному раствору литийорганического соединения прибавляют при -70°С в течение 25мин, раствор 3,5г продукта, полученного в стадии А примера 7, в 35см³ безводного тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 1ч при -70°С, медленно выливают в насыщенный ледяной водный раствор хлористого аммония. Экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель.
Получают 3,4г, который хроматографируют на двуокиси кремния элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1) с 1 на тысячу триэтиламина. Таким образом выделяют:
а)1,73г изомера 17α-(пропа-1,2-диснил), т. пл. = 178°С [α]D= -32 ± 2° (к=0,7%CHCl3);
б)1,5г изомера 17α-проп-2-инил, т. пл. = 150°С, [α]D=-15 ± 2°(к = 0,9% СНСl3).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-[17α]-(пропа-1,2-диенил)-эстра-4,9-диен-З-он. В инертном газе смешивают 1,73г полученного в стадии А изомера 17α-(пропа-1,2-диенил), 51,8см³ 95%-ного этанола и 3,5см³ 2 н.соляной кислоты. Перемешивают 1ч при 20°С, прибавляют 50см³ хлористого метилена, а затем 50см³ 0,25 М раствора бикарбоната натрия, декантируют, экстрагируют хлористым метиленом, промывают водой, сушат и отгоняют растворитель. Получают 1,51г продукта, который растворяют в 10см³ горячего хлористого метилена. Прибавляют 15см³ изопропилового эфира, концентрируют и оставляют в покое. Таким образом выделяют 1,23г целевого продукта, который кристаллизуют заново в смеси хлористый метилен – изопропиловый эфир. Окончательно получают 1,11г целевого продукта. Т. пл. т 228°С,
[α]D=+139,5 ± 3° (к = 0,8% СНСl3).
Пример 16. 17β-Гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(проп-2-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
Смешивают 0,94г полученного в стадии А примера 15 изомера 17α - (проп-2-инил), 28,2см³ 95%-ного этанола и 2 см³ 2 н.соляной кислоты. Перемешивают 1ч при 20°С, прибавляют 50 .см хлористого метилена и 50см³ 0,25 М раствора бикарбоната натрия, перемешивают в течение 5мин, декантируют и экстрагируют хлористым метиленом. Органический слой промывают водой, сушат его и отгоняют растворитель. Полученный продукт хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир -этиловый эфир уксусной кислоты (1:1). Таким образом, получают 0,42г целевого продукта в аморфном виде. [α]D =+143±3° (к = 0,8% СНСl3).
Пример 17. 17α-Этинил-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-3-он.
Стадия А. I7β-Циано-11β-(4-диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-17α-(триметилсилилокси)-эстра-9-ен-5-ол.
При комнатной температуре и в инертном газе к суспензии 2,05г комплекса бромид меди - диметилсульфид в 10см³ безводного тетрагидрофурана прибавляют раствор 18 ммоль бромида (4-диметиламинофенил) магния в безводном тетрагидрофуране. Затем прибавляют 0,95г 17β-циано-17α-(триметилсилилокси)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-10α-эпокси-эстр-9(11)-ена в безводном тетрагидрофуране, перемешивают в течение 15ч при комнатной температуре, выливают в 50см³ насыщенного раствора хлористого аммония, декантируют, экстрагируют эфиром, промывают водой органический слои, сушат его и отгоняют растворитель. Очищают остаток хроматографическим способом на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (8:2). Получают 1,1г целевого продукта, который перекристаллизуют в изопропиловом эфире, Т. пл. = 247°С, [α]D = -12,5°(к = 1% СНС13).
Стадия Б. 17α-Этинил-3,3-[этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-диметиламинофенил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
К 0,8г полученного в стадии А продукта в 8см³ этилендиамина, прибавляют 1г комплекса ацетиленистого лития этилендиамина, а затем выдерживают при перемешивании и в инертном газе при-50°С в течение 1,5ч. Охлаждают до 20° С, а затем выливают в раствор хлористого аммония. Экстрагируют эфиром и хлористым метиленом. Сушат органический слой и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3), полученный продукт перекристаллизуют в изопропиловом эфире и получают 0,43г целевого продукта. Т. пл.= 199°С. [α]D =-43 ± 1,5° (к = 1% СНСl3).
Стадия В. 17α-Этинил-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-3-он.
К раствору 0,25г полученного в стадии Б продукта в 6 см³ метанола прибавляют 1см³ 2 н. соляной кислоты. Перемешивают в течение 40мин при 20°С, выливают в воду, содержащую 2,5см³ 1 н. гидроокиси натрия, экстрагируют эфиром, сушат органический слой и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3), и получают 0,25г целевого продукта.
Вычислено, %: С 80, 92; Н 8,00; N 3,37.
C28H33NO2 (415, 54).
Найдено, %: С 80,7; H 8,1;
N 3,1.
Пример 18. 17α-Этинил-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 11β-(4-Диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-17β-дигидрокси-17α-этинил-эстр-9-он.
В инертном газе растворяют 6г продукта, полученного в стадии А примера 7, в 180см³ тетрагидрофурана, а затем прибавляют 12,25г комплекса ацетиленистый литий - этилендиамин. Нагревают до 55ºС, перемешивают в течение 4ч, охлаждают, а затем выливают в 600см³ насыщенного ледяного раствора хлористого аммония. Экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Полученный остаток очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3), содержащей 1 на тысячу триэтиламина, и получают 4,5г целевого продукта, который перекристаллизуют в смеси хлористый метилен - окись, диизопропила. Т. пл. 202°С, [α]D=-47,5±1,5°(к = 1% СНСl3).
Стадия Б. 17α-Этинил-17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Смешивают 2г полученного в стадии А продукта в 50см³ 95%-ного этанола. К суспензии прибавляют 5см³ 2 н. соляной кислоты. При перемешивании выдерживают в течение 1ч при 20 С, прибавляют 100см³ этилового эфира, а затем 100см³ 0,25 М раcтвора бикарбоната натрия. Декантируют экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и упаривают досуха. Хроматографируют полученный остаток на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (6:4), и выделяют 1,52г целевого продукта, который перекристаллизуют в окиси диизопропила. Т. пл. = 172ºС, [α]D= +182 ± 2,5° (к = 1% СНСl3).
Пример 19. 17β-Гидрокси-11β-(3-диметиламинофенил)-17α-(проп-1-инил-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 11β-(3-Диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-17α-(проп-1-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол. Приготовление магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 1,46г магния и 5см³ безводного тетрагидрофурана. Выдерживая температуру около 50°С, вводят в течение 45мин 10г метабромдиметиланилина в 45см³ безводного тетрагидрофурана. Выдерживают в течение 1ч при перемешивании и получают раствор в 0,95 М целевого магнийорганического соединения.
Конденсация.
В инертном газе смешивают 3,7г 3,3-[1,2-этилендиокси-бис-(окси)] -17α-(проп-1-инил)-эстр-9(1 I )-ен-5α-10α-эпокси-17β-ола, 74см³ безводного тетрагидрофурана и 99мг монохлорида меди. Охлаждают до 0 - (+5)ºС, а затем прибавляют в течение 30мин 42,2см³ полученного раствора магнийорганического соединения. Перемешивают в течение 30мин при 0 - (+5)°С, выливают в насыщенный водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетон (9:1), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Получают 3,5г целевого продукта. Т. пл. = 262ºC, [α]D= -64 ±1,5°
(к = 1% СНСl3).
Также выделяют 0,66г соответствующего изомера 5β ОН. Т. пл. = 210ºС,
[α]D=+32,5±1° (к = 0,8% СНСl3).
Стадия Б.
17β-Гидрокси-11β-(3-диметиламинофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
В инертном газе смешивают 3,3г полученного в стадии А продукта с 100см³ метанола, охлаждают до 0 - (+5)°С и прибавляют 10см³ 2 н. соляной кислоты. Перемешивают в течение 1ч при 0 - (+5)ºС, прибавляют 200см³ окиси диэтила, а затем 200см³ 0,25 М раствора бикарбоната натрия. Перемешивают 5мин, декантируют, экстрагируют окисью диэтила, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Получают 3г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3). Выделяют 1,43г аморфного целевого продукта. [α]D=+43±2,5° (к = 1% СНСl3).
Пример 20. N-Окись 17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-она.
Смешивают 1,5г полученного в примере 4 продукта с 30см³ хлористого метилена. Охлаждают до 0,5ºС и прибавляют в течение 10мин, раствор 0,71г метахлорбензойной кислоты (85%-ной) в 14,2см³ хлористого метилена. Перемешивают при 0 - (+5)°С в течение Iч, выливают в 100см³ 0,2 н. раствора тиосульфата натрия, декантируют, экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой 0,5 М раствором бикарбоната натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток растворяют в 20см³ хлористого метилена и прибавляют 20см³ окиси диизопропила. Затравляют кристаллизацию, оставляют в покое, отсасывают кристаллы и сушат их. Получают 1,4г целевого продукта. Т. пл. = 210°С, [α]D=+73,5 ± 2° (к = 1% CHCl3).
Пример 21. 11β-(4-Диметиламинофенил)-17β-гидрокси-эстра-4,9-диен-3-ол.
Смешивают 1г продукта, полученного в стадии А примера 7, в 20см³ тетрагидрофурана, содержащего 10% воды. После растворения прибавляют 106мг борогидрида натрия, перемешивают в течение 1ч, выливают в 200см³ воды, экстрагируют хлористым метиленом, органический слой промывают насыщенным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Получают 1,3г продукта 5α-17β-дигидрокси.
0,63г полученного продукта вводят в смесь 12см³ метанола и 2,4см³ 2 н. соляной кислоты. Перемешивают 1ч 30мин при комнатной температуре, выпивают в раствор бикарбоната натрия, экстрагируют эфиром, органический слой промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (6:4). Растирают остаток в петролейном эфире, отсасывают и получают 0,39г целевого продукта, Т. пл. = - 130°С, [α]D=+277 ± 5° (к = 0,5% CHCl3).
Пример 22. 17β-Гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(проп-2-енил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(oкси)]-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(проп-2-енил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
В 55,5см³ 0,7 М раствора аллилмагнийбромида в эфире вводят в инертном газе при 20ºС в течение 15мин 3,5г продукта, полученного в стадии А примера 7, в 35см³ тетрагидрофурана. Перемешивают при 20°С в течение 1ч, выливают в насыщенный водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным, раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Полученный остаток растворяют в 10см³ хлористого метилена. Прибавляют 14см³ окиси диизопропила, концентрируют, а затем оставляют в покое. Отсасывают образованные кристаллы, прополаскивают их окисью диизопропила, сушат и получают 2,76г целевого продукта. Т. пл. 198°С.
Вычислено, %: С 74,42; Н 8,87; N 2,83.
C3,H43NO4 (493,69) •
Найдено, %: С 74,0; Н 8,7; N 2,9.
Стадия Б. 17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(пропил-2-енил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Вводят в суспензию 2,2г полученного в стадии А продукта в 66см³ метанола, а затем прибавляют 4,5см³ 2 н.соляной кислоты. Перемешивают в течение 30мин при 20°С. Прибавляют 132см³ окиси диэтила, а затем 132см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия. Декантируют, экстрагируют окисью диэтила, промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3), полученный продукт вводят в смесь 15см³ окиси диизопропила и 15см³ хлористого метилена, концентрируют, а затем оставляют в покое. Отсасывают и прополаскивают полученные кристаллы окисью диизопропила и получают I,365г.целевого продукта, Т. пл. = 182°С, [α]D = +206,5 ± 3° (к = 1% СНСl3).
Пример 23. 17β-Гидрокси-11β-[4-(N,N-Диметиламинометил) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β-[4- (N, N-диметиламинометил) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
Приготовление магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 5,5г магния и 10см³ безводного тетрагидрофурана. Выдерживая температуру 45-50ºС, вводят в течение 1ч 30мин, 42,8г 4-(N,N-диметиламинометил)-бромбензола в 190см³ безводного тетрагидрофурана. Реакция затравляется прибавкой дибромэтана. После окончания введения выдерживают перемешивание в течение 1ч. Таким образом получают целевой раствор 0,85 М магнийорганического соединения.
Прибавка эпоксида.
В инертном газе смешивают 10г 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-17α-(проп-1-инил)-эстр-9(11)-ен-5α-10α-эпокси-17β-ола, 200см³ безводного тетрагидрофурана и 0,27г монохлорида меди. Охлаждают, до 0 - (+5)°С и вводят в течение 1ч 127см³ приготовленного раствора магнийорганического соединения. Затем перемешивают 15мин, выливают в насыщенный водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, органический слой промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - метанол (9:1); содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Получают 10,1г продукта, который кристаллизуют растворением в хлористом метилене и прибавкой нескольких см³ метанола, а затем окиси диизопропила. После концентрации и покоя в течение 6ч полученный продукт отсасывают и получают 7,37г целевого продукта. Т. пл. = 186°С, [α]D = -63±2,5° (к = 0,5% СНСl).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-1lβ-[4-(N,N-диметиламинометил)фенил]-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
В инертном газе смешивают 7,37г полученного в стадии А продукта в 147,4см³ метанола и 15см³ 2 н. соляной кислоты. Перемешивают в течение 1ч при 20°С, прибавляют 300см³ окиси диэтила и 300см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия, декантируют, экстрагируют окисью диэтила, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Полученный продукт перекристаллизуют, растворяя ее в смеси окиси диизопропила и хлористого метилена, а затем концентрируют раствор и оставляют его в покое. Отсасывают и сушат полученные кристаллы. Таким образом получают 3,74г целевого продукта. Т. пл. = 190°С. [α]D= +84,5 ± 2° (к = 0,8% СНСl3).
Пример 24. 17β-Гидрокси-11β-(4-пирролидинилфенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-пирролидинилфенил)-17α-(проп-1-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
Приготовление магнийорганического соединения.
Смешивают в инертном газе 4г магния и 10см³ безводного тетрагидрофурана. Выдерживая температуру 45 -50°С, вводят в -течение 1ч 34г 4-пирролидинилбромбензола в 140см³ безводного тетрагидрофурана. Реакция затравливается прибавкой дибромэтана. Получают таким образом 1 М раствор целевого магнийорганического соединения.
Конденсация на эпоксиде.
В инертном газе смешивают 8г 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-10α-эпокси-17α-(проп-1-инил)-эстр-9(11)-ен-17β-ола, 160см³ безводного тетрагидрофурана и 216мг монохлорида меди. Охлаждают до 0-(+5)°С и вводят в течение 1ч 30мин 86,4см³ приготовленного раствора магнийорганического соединения.
Перемешивают в течение 1ч, выливают в водный раствор хлористого аммония, экстрагируют окисью диэтила, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого аммония, а затем, насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетон (95:5), содержащей 1 на тысячу триэтиламина. Таким образом получают 8,3г целевого продукта, который перекристаллизуют в смеси хлористый метилен - изопропиловый эфир.
Т. пл. = 185°С, [α]D= -67 ±1,5 (к = 1% СНCl3).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β-(4-пирролидинилфенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
6,4г полученного в стадии А продукта растворяют в 128см³ метанола, а затем прибавляют 13см³ 2 н. соляной кислоты. Перемешивают при 20°С в течение 1ч, а затем прибавляют 256см³ окиси диэтила и 256см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия. Декантируют, экстрагируют окисью диэтила, промывают органический слой 0,25 М водным раствором бикарбоната натрия, а затем насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), и получают 5,25г целевого продукта, который перекристаллизуют в смеси хлористый метилен – окись диизопропила.
Т. пл.=190ºС, , [α]D=+120º±2,5º (к=1,2% СHСl3).
Пример 25. 17β-Гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-этенил-эстра-4,9-диен-3-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-этенил-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
3г продукта, полученного в стадии Б примера 17, смешивают с 60см³ безводного пиридина и прибавляют 0,6г 5%-ного палладия на углекислом кальции. Пропускают водород в эту смесь при комнатной температуре в течение 1ч. Отсасывают катализатор, упаривают досуха фильтр, вводят в толуол осадок и опять упаривают досуха. Таким образом получают 2,94г целевого продукта, используемого в продолжении синтеза. Т.пл. =181ºС. Продукт может быть перекристаллизован в смеси хлористый метилен – окись диизопропила. Т.пл.=182ºС, [α]D=-6,5±2º (к=0,7%CHCl3).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-этенил-эстра-4,9-диен-3-ен.
В инертном газе смешивают 2,94г полученного в стадии А продукта с 60см³ 2 н. соляной кислоты. При 20ºС и в течение 1ч перемешивают этот раствор, прибавляют 120см³ эфира и 120см³ 0,25 М водного раствора бикарбоната натрия, выдерживают перемешивание 10 мин, декантируют и экстрагируют эфиром. Промывают органический слой 0,25 М водным раствором бикарбоната натрия, а затем насыщенным водным раствором хлористого натрия. Сушат и отгоняют растворитель. Промывают органический слой 0,25 М водным раствором бикарбоната натрия, а затем насыщенным водным раствором хлористого натрия. Сушат и отгоняют растворитель. Получают 2,65г продукта, который хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол - этиловый эфир уксусной кислоты (7:3), а затем кристаллизуют в смеси окись диизопропила - хлористый метилен. Наконец получают 1,51г целевого продукта. Т. пл.=150ºС, [α]D=+243±3º (к=0,8%CHCl3).
Пример 26. 17β-Гидрокси-11β-1-(4-диэтиламинофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
Стадия A. 3,3-[l,2-этандиил-бис-(окси)]-11β-(4-диэтиламинофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
Образование магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 3,9г магния в 10см³, тетрагидрофурана. По каплям прибавляют 34,2г 4-(N,N-диэтиламино) бромбензола в 110см³ тетрагидрофурана, выдерживая температуру около 35°С. Получают раствор целевого магнийорганического соединения.
Конденсация.
7,4г 3,3- 0,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-10α-эпокси-17α-(проп-1-инил)-эстр-9(11)-ен-17β-ола растворяют в 150см³ безводного тетрагидрофурана. Прибавляют 0,25г монохлорида меди. Перемешивают при 0 - (+5)°С в инертном газе и медленно прибавляют 80см³ полученного раствора магнийорганического соединения. Выдерживают в течение 17ч при перемешивании и при 20°С, выливают в водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, промывают органический слой водным раствором бикарбоната натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток сгущают в петролейном эфире, а затем обрабатывают активированным углем в 10 эфире и перекристаллизуют в изопропиловом эфире. Таким образом получают 4г целевого продукта. [α]D=-61±2,5º (к=0,7%CHCl3).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β(4-диэтиламинофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
К раствору 3,12г полученного в стадии А продукта в 45см³ метанола прибавляют 8см³ 2 н.соляной кислоты и перемешивают при 20°С в инертном газе в течение 45 мил. Выливают в воду, нейтрализуют прибавкой 2 н. гидроокиси натрия, экстрагируют хлористым метиленом, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью бензол этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), и получают 1,34г целевого продукта. [α]D=+144,5±3º (к=0,8% хлороформ).
Вычислено, %: С 81,36; Н 8,59; N 3,06.
С31Н39NO2 (457,63)
Найдено, %: С 81,7; Н 8,8; N 2,09.
Используемый в стадии A 4-(N,N-диэтиламино) бромбензол получают следующим образом.
К раствору 86г N,N-диэтиланилина в 400см³ уксусной кислоты прибавляют по каплям 93г брома. После окончания прибавления выливают в смесь вода-лед, экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой водным раствором бикарбоната натрия, сушат и отгоняют растворитель. Получают 125г целевого, продукта. Т. кип. (0,6) = 97°С.
Пример. 27. 17β-Гидрокси-11β-[4-[метил(3-метилбутил)амино]-фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-ди-, ен-3-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β -[4-[метил(3-метилбутил) амино] фенил]-17α-(проп-l-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
Приготовление магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 4,12г магния и 10см³ тетрагидрофурана. Вводят несколько см³ N-метил-(3-метилбутил)-4-бромбензоламина в тетрагидрофуране и затравляют реакцию прибавкой 0,2см³ 1,2-дибромэтана. Затем прибавляют в течение 40мин остаток раствора N-метил-N-(3-метилбутил)-4-бромбензоламина в безводном тетрагидрофуране (32,6г в 90см³). Дают температуре дойти до комнатной, а затем выдерживают при перемешивании в течение 1ч. Таким образом получают 0,9 М раствор целевого магнийорганического соединения.
Конденсация.
Смешивают 8г 3,3-[l,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-10α-эпокси-17α-(проп-1-инил)-эстр-9(11)-ен-17β-ола с 90см³ безводного тетрагидрофурана и 3,77г монохлорида меди. Перемешивают в течение 20мин при +5°С в инертном газе, а затем прибавляют 100см³ приготовленного раствора магнийорганического соединения. Затем выливают смесь в водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, содержащим триэтиламин, а затем хлористым метиленом, содержащим триэтиламин. Соединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия 1,1 сушат и упаривают досуха. Получают 31,2г целевого продукта, используемого в следующей стадии. Продукт можно очистить хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - ацетонтриэтиламин (96,5 : 4,5 : 0,5).
[α]D=-59,5±2,5º (к=0,7%CHCl3).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β-[4-[метил (3-метилбутил) амино] фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он. 26г полученного в стадии А продукта растворяют в 200см³ метанола, а затем прибавляют 52см³ 2 н. соляной кислоты. После 1ч перемешивания выливают смесь в водный раствор бикарбоната натрия, экстрагируют эфиром, а затем хлористым метиленом, промывают соединенные органические слои насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Продукт очищают хроматографически на двуокиси кремния, элюируя смесью толуол - этиловый эфир уксусной кислоты (92:8) и получают 3,23г целевого продукта. [α]D=+125±3,5º (к=0,6%CHCl3).
Вычислено, %: C 81,6; H 8,92; N 2,88.
С33Н43NO2 (485,71)
Найдено, %: C 81,4; H 9,0; N 2,7.
Амин, используемый в стадии А, получают следующим образом.
Стадия а. N-Метил-N-(З-метилбутил)-анилин.
Смешивают 86г N-метиланилина, 500см³ безводного бензола и 81г безводного триэтиламина. По каплям прибавляют 121г изоамилбромида, нагревают с обратным холодильником в течение 100ч. Фильтруют смесь, промывают фильтрат водой, сушат и отгоняют растворитель. Остаток перегоняют и получают 90г целевого продукта.
Т. кип.=132°С.
Стадия б. N-Метил-N-(3-метилбутил)-4-броманилин.
64г полученного в стадии а продукта смешивают с 300см³ уксусной .
25 кислоты, а затем прибавляют по каплям в течение 1ч при 15°С 58г брома в 60см³ уксусной кислоты. Нагревают до 80°С, перемешивают в течение 8ч, затем выливают в ледяную воду,
30 экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой раствором бикарбоната натрия, а затем водой, сушат и отгоняют растворитель. Перегоняют остаток и получают.70г целевого продукта. Т. кип. (0,5) = 119°С.
Пример 28. 17β-Гидрокси-11β-[4-(N,N-диметиламиноэтилтио) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β-[4-(N,N-диметиламиноэтилтио) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстр-9-ен-5-17β-диол.
Приготовление магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 2г магния и 15см³ безводного тетрагидрофурана. Затем, в течение 45мин, давая температуре подняться до 56°С, вводят раствор 20г 4-(N,N-диметиламиноэтилтио)-1-бромбензола в 40см³ безводного тетрагидрофурана. Затравляют реакцию прибавкой I,2-дибромэтана. Затем дают температуре опуститься до 20ºС, а потом выдерживают перемешивание в течение 45мин в инертном газе. Таким образом, получают 1,05 М раствор целевого магнийорганического соединения.
Конденсация.
В инертном газе охлаждают до -20°С 38см³? полученного раствора магнийорганического соединения, прибавляют 1,730г монохлорида меди, выдерживают при перемешивании в течение 20мин, а затем прибавляют 5г 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-10α-эпокси-17α-(проп-1-инил)-эстр-9(11)-ен-17β-ола в 50см³ безводного тетрагидрофурана. Выдерживают при 20°С в инертном газе в течение 2ч 45мин. Выливают смесь в 600см³ ледяной воды, содержащей 60г хлористого аммония. Выдерживают при перемешивании в течение 45мин, декантируют, экстрагируют водный слой окисью диэтила, содержащей триэтиламин, промывают соединенные органические слои насыщенным водным, раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на окиси алюминия, элюируя смесью хлористый метилен-ацетон (95:5) и получают 10,3г целевого продукта. Спектр-ИК: поглощение при 3600см-1 (ОН); 2240см-1 (С С); 1705 и 1670см-1 (СО и СО сопряженный); 1615 и 1490см-1 (ароматические полосы).
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β-[4-(N,N-диметиламиноэтилтио) фенил]-17-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
В инертном газе смешивают 10,3г полученного в стадии А продукта с 72см³ метанола, а затем прибавляют 20,6см³ 2 н.соляной кислоты. Выдерживают при перемешивании при 20°С в течение 1ч 15мин, нейтрализуют прибавкой насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, прибавляют 200см³ окиси диэтила, декантируют, экстрагируют окисью диэтила, промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия соединенные органические слои, сушат и концентрируют досуха. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью хлористый метилен - метанол (9:1) и получают 3г целевого продукта, который кристаллизуют, сгущая в окиси диизопропила. Т. пл.= 145°С, [α]D=+125 ±2° (к = 1% . хлороформ)
Используемый в стадии А амин получают следующим образом.
20г едкого натра в таблетках растворяют в 500см³а этанола. С другой стороны растворяют 23,5г хлоргидрата хлорэтилдиметиламина в 75см³5 этанола, а затем прибавляют 160см³ полученного раствора едкого натра. Растворяют 30г парабромтиофенола в 100см³ этанола, а затем прибавляют 160см³ полученного раствора едкого натра. Затем прибавляют в течение 2 мин при 20°С полученный раствор амина. Нагревают с обратным холодильником в течение 3ч, отгоняют растворитель, прибавляют воду, экстрагируют хлористый метиленом, промывают органический слой 0,1 н.водным раствором едкого натра, а затем водой, сушат и отгоняют растворитель. Перегоняют остаток и получают 35,5г целевого продукта. Т. кип. (0,1) = 110°С.
Пример 29. 11β-(4-Диметиламинофенил)-17β-гидрокси-21-(триметилсилил)-[17α]-19-норпрегна-4,9-диен-20-ин-З-он.
Стадия А. 11β-(4-Диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(oкси)-21-(триметилсилил)-[17α]-19-норпрегн-9-ен-20-ин-5-α-17β-диол.
В инертном газе смешивают 13см³ 1,6 М раствора этилмагнийбромида в тетрагидрофуране с 13см³ безводного тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 5мин при 0 - (+5)°С, а затем по каплям прибавляют 3,4см³ триметилсилилацетилена. Дают температуре подняться до 20°С и продолжают перемешивание в течение 20мин, а затем вводят по каплям раствор 1,12г продукта, полученного в стадии А примера 7, в 10см³ безводного тетрагидрофурана. Выдерживают 16ч при комнатной температуре при перемешивании, выливают в водный раствор хлористого аммония, перемешивают в течение 20мин при комнатной температуре, экстрагируют хлористым метиленом, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси, кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (6:4) и получают 680 мг целевого продукта. [α]D=-76,5±3°(к=0,5% CHCl3).
Стадия Б. 1Iβ-(4-Диметиламинофенил)-17β-гидрокси-21-(триметилсилил)-[17α]-19-норпрегна-4,9-диен-20-ин-3-он.
Смешивают 562 мг полученного в стадии А продукта с 15см³ метанола и 1см³ 2 н.соляной кислоты. Выдерживают при перемешивании при комнатной температуре в течение 40мин, выливают в водный раствор бикарбоната натрия , экстрагируют эфиром, промывают органический слой насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью петролейный эфир - этиловый эфир уксусной кислоты (6:4) и поручают 364 мг целевого продукта. [α]D=+97,5±3º (к = 0,35% CHCl3).
Вычислено, %: С 76,33; Н 8,47; N 2,87.
C31H41N02Si (487,76)
Найдено, %: С 76,4; Н 8,7; N 2,8.
Пример 30. N-Окись 17β-гидрокси-11β-[4-(N,N-диметиламинометил) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-она.
1,4г полученного в примере 23 продукта растворяют в 28см³ хлористого метилена, а затем вводят в течение 15мин при 0-(+5)°С раствор 0,64 метахлорнадбензойной кислоты в 12,8см³ хлористого метилена. Перемешивают в течение 1ч при 0-(+5)ºС, а затем выливают в 0,2 н. водный раствор тиосульфата натрия, декантируют экстрагируют хлористым метиленом, промывают водным раствором бикарбоната натрия, сушат и упаривают досуха. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния элюируя смесью хлористый метилен-метанол (8:2) и получают 1,28г целевого продукта, который растворяют в смеси хлористый метилен-окись диизопропила. Отсасывают образовавшиеся кристаллы, сушат их и получают 1,075г целевого продукта. Т. пл. = 215°С, [α]D=+74,5 ± 2,5° (к = 0,35% CHCl3).
Пример 31. Полуфумарат 17β-гидрокси-11β-[4-(N,N-диметиламинометил) фенил] 17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-она.
Смешивают 1,44г полученного в примере 23 продукта в 2,88см³ этанола, а затем прибавляют смесь 0,378г фумаровой кислоты в 4,54см³ этанола. Эту суспензию перемешивают в течение 30мин при 60ºС, дают температуре спуститься до 20°С и выдерживают перемешивание. Отгоняют растворитель, забирают остаток в эфир, отсасывают, сушат и получают I,70г целевого продукта. Т. пл. = 160ºC,
[α]D= +70,5±2,5°(к = 0,8% CHCl3).
Пример 32 . 17-β-Гидрокси-11-β-[4-(N,N-дипропиламино)-фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-11β-[4-(N,N-дипропиламино)-фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
Приготовление магнийорганического соединения.
В инертном газе смешивают 5г магния и 15см³ безводного тетрагидрофурана. По каплям прибавляют раствор 52г 4-бром-N,N-дипропиланилина в 110см³ тетрагидрофурана, выдерживая температуру при 40 С. Таким образом получают 1,1 M раствор целевого магнийорганического соединения.
Конденсация.
В инертном газе смешивают раствор 5,55г полученного в стадии А примера 73
3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-5α-10α-эпокси-17α-(проп-1-ииил)-эстр-9(11)-ен-17β-ола с 200 мг дихлорида меди.. Перемешивают при 0+5°С, а затем прибавляют в 15минут 50см³ полученного выше раствора магнийорганического соединения. Затем перемешивают при 20°С в течение 1часа, выливают в насыщенный водный раствор хлористого аммония, экстрагируют эфиром, сушат органический слой и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью толуол - этиловый эфир уксусной кислоты (7-5) и получают 6,3г целевого продукта. [α]D=-56±2° (к=0,8% CHCl3).
Вычислено, %: С 76,74; Н 9,02; N 2,56.
C35H49N044 (547,75)
Найдено, %: С 76,6; Н 9,2; N 2,5.
Стадия Б. 17β-Гидрокси-11β-[4-(N,N-дипропиламино)-фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
К раствору 5,83г полученного в стадии А продукта в 80см³ метанола прибавляют 10см³ 2 н. соляной кислоты и перемешивают при 20 С в течение 50мин. Нейтрализуют добавкой 1 н. раствора едкого натра, отгоняют растворитель под уменьшенным давлением и забирают остаток хлористым метиленом. .Промывают водой органический слой, сушат и отгоняют растворитель. Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируя смесью толуол - этиловый эфир уксусной кислоты (75:25),. и получают 3,81г целевого продукта.
ИК-спектр (хлороформ): поглощение при 3600см-1(ОН); 1654см-1(С=О); 1610-1595-1558 и 1517см-1(4,9 + ароматические полосы); 2240см-1 (С=С).
Следующие продукты могут быть пол лучены по предлагаемому способу:
11β-[4-(N-этил-N-метиламино) фенил]-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он, т. пл, = 174°С; [α]D=+149±2° (к=1% CHCl3).
17β-гидрокси-11β-[N-метил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он, т. пл. = 176°С, [α]D=+133±3° (к = 0,8% СНС13) (А);
11β-(4-диметиламинофенил)-3-гидроксиимино-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-17β-ол (изомер Z); т. пл. = 260°С, [α]D= 141±3,5ºС(к=0,8% СНСl3) (В);
11β-(4-диметиламинофенил)-3-гидроксиимино-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-17β-ол (изомер Е), т. пл.=220°С,
[α]D=+164±3,5° (к=0,8% СНС13) (С);
N-окись 17β-гидрокси-11β-(4-пирродидилфенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-она, т. пл. = 220°С, [α]D=+88±2,5° (к=0,75% СНС13) (С);
17β-гидрокси-11β-[4-N-мeтил-N-(1-метилэтил)-аминофенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он. [α]D=+140 + 3,5° (к=0,5% СНС13);
N-окись 11/а-[4-(N,N-диметиламиноэтилокси) фенил]-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-она, [α]D=+60,5° (к = 1,2% СНС13);
N-окись 17β-гидрокси-1lβ-[N-метил-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-она, [α]D=+103±2,5° (к = 0,8% СНС13);
17β-гидрокси-1lβ-[4-(N-метил-N-триметилсилилметил) аминофенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он;
17β-гидрокси-11β-[4-метил-N-диметиламиноэтил) аминофенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он;
17β-гидрокси-11β-[4-(N-метилпиперазин-1-ил) фенил]-I7α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он;
17-гидроксиимино-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-З-он,
[α]D=+207,5±3,5° (к = 1% СНС13);
3(Е)-гидроксиимино-17-гидроксиимино-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-З-он, [α]D=+195±3° (к=1% СНС13);
3(Z)-гидроксиимино-17-гидроксиимино-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-4,9-диен-З-он, [α]D=+163 + 2,5° (к = 0,6% СНС13);
Пример 33. 11β-[4-(Диметиламино) фенил]-17β-гидрокси-17α-(3-гидроксипроп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
В раствор 1,6 М метиллития в эфире добавляют по каплям в среде аргона при 10-15°С и при помешивании 3,1г тетрагидропиранильного эфира пропаргильного (СН=С-СН2ОН) спирта в 6см³ эфира.
Поддерживают температуру ниже 15°С, перемешивают в течение 10мин, затем добавляют в течение 15мин раствор 2г 3,3- [1,2-этандиил-бис-(окси)]-11β-[4-(диметиламинофенил)]-5α-гидроксиэстр-9-ен-17-она, приготовленного, как в примере 7А, в 15см³ тетрагидрофурана. В конце операции добавления добавляют еще 15см³ тетрагидрофурана и продолжают перемешивать в течение 30мин при температуре окружающей среды. Разбавляют среду раствором, хлористого аммония, выделяют этилацетат, промывают раствором хлористого натрия, высушивают и подвергают сухой перегонке.
Полученное масло растворяют в 20см³ метанола. Добавляют 5см³ соляной кислоты 1/2 (или примерно 5 N) и оставляют на 2ч при температуре окружающей среды. Добавляют лед, 5см³ концентрированного аммиака, выделяют этилацетат. Промывают сначала водой, а затем раствором хлористого натрия, сушат, подвергают сухой перегонке, кристаллизуют осадок в этиловом эфире. Добавляют изопропиловый эфир, фильтруют, промывают и сушат при 50°С. Получают 1,42г искомого продукта, который подвергают очистке следующим образом; растворяют продукт в хлороформе, фильтруют раствор и подвергают его сухой концентрации. Добавляют 3см³ хлороформа, растворяют с нагреванием и добавляют 3см³ изопропилового эфира. Затравляют кристаллизацию и оставляют медленно остывать. Добавляют 6см³ изопропилового спирта, оставляют на 2ч при температуре окружающей среды, затем обезвоживают. Промывают смесью хлороформа с изопропиловым эфиром (1:3) и сушат при 50ºС.
Получают 1,36г продукта, который вновь растворяют в 4см³ хлороформа и добавляют 2 раза по 4см³ изопропилового эфира. Получают 1,3г продукта, Т. пл. = 229°С, [α]D=+133±2,5° (к = 1% СНС13);
Вычислено, %: С 76,45; Н 7,57; N 2,23, С1 2,23.
C29H35N03
Найдено, %: С 76,8; Н 8,0; N 3,1; Cl 2,3.
Пример 34. N-(4-Аминофенил)-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Стадия А. 3,3-Диметокси-11β-[4-(диаллиламино) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-9-он-5α-17β-диол.
а) Получение N,N-диаллил-4-бромоанилина.
При температуре окружающей среды добавляют раствор 300см³ бензола, 11,8г бромистого тетрадецилтриметиламмония, 60,2г 4-броманилина и 60см³ бромистого аллила в 150г натрия, растворенного в 300см³ воды. Перемешивают в течение 87ч при температуре окружающей среды. Выделяют этилацетат, промывают, сушат, выпаривают при пониженном давлении и получают , 89г масла, которое очищают путем фильтрования через кремнезем (выделяя циклогексан). Отделяют путем перегонки 81,7г желтой жидкости и получают чистое соединение (Е8 = 105°С/1 х х 10-1мм Hg).
Вычислено, %: С 57,16; Н 5,59; Вr 31,69; N 5,55.
C12H14BrN.
Найдено, %: С 56,9; Н 5,7; Вr 31,9; В 5,5.
б) Получение магнийорганического соединения.
В среде азота нагревают до 55ºС 5,25г магния в 10см³ тетрагидрофурана, добавляют несколько капель бромистого этилена и добавляют по каплям раствор 15,3г N,N-диаллил-4-броманилина в тетрагидрофуране (количество, достаточное для 120см³). Поддерживают в течение 40мин температуру окружающей среды.
в) Конденсация.
Растворяют 5,6г ,3-диметокси-5α-10α-эпокси-17α-(пропаинил)-эстра-9(11)-17р-ола в 50см³ тетрагидрофурана. Добавляют 560 мг хлористой меди и охлаждают в среде азота до 0-(-5)ºС. В течение 40мин добавляют по каплям 125см³ магнийсодержащего соединения, полученного описанным способом. Оставляют реагировать в течение 18ч, вливают реакционную среду вливают реакционную среду в раствор хлористого аммония и выделяют этилацетат. Промывают, сушат и получают после выпаривания растворителя примерно 16г желтого масла, которое хроматографируют на кремнеземе, смешивают со смесью бензола и этилацетата (85:15) с 1% триэтиламина и выделяют 7,3г продукта. После кристаллизации в изопропиловом эфире 1,52г 25 продукта, полученного путем хроматографии, получают 1,04гчистого продукта.
Стадия Б. 3,3-Диметокси-11β-(4-аминофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-9-он-5α-1,7β-диол.
Растворяют 4,3г продукта, полученного на стадии А, в 80см³ этанола 5см³ воды. Добавляют 215см³ диазабициклооктана и 430 мг реактива Вилкинсона [хлороформ (трифенилфосфин) родий]. Подогревают в течение 30 мин на обратном течении, охлаждают, растворяют в воде и выделяют этилацетат. Получают искомый продукт после выпаривания органической фазы.
Стадия В. 11β-(4-Аминофенил)-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он.
Продукт, полученный на стадии Б, растворяется в 50см³ метанола 15см³ метанола и 15см³ соляной кислоты 2 N. Раствор оставляют на 1ч 15мин при температуре окружающей среды, а затем вливают в раствор бикарбоната натрия и выделяют этилацетат. Промывают, сушат, выпаривают органическую фазу и получают 4г сырого продукта, который растворяют в хлористом метилене. Очищают путем хроматографии на кремнеземе, смешивая сначала с этиловым эфиром, а затем со смесью эфира и этилацетата (9:1) и получая в результате 1,5г ожидаемого продукта. 2,4г полученного таким образом продукта растворяют в хлористом метилене. Отфильтрованный раствор разбавляют изопропиловым эфиром, а затем концентрируют с тем, чтобы отделить хлористый метилен. Охлаждают, обезвоживают и получают 2,18г кристаллизированного продукта. Очищенный продукт получают путем рекристаллизации в смеси хлористого метилена и этанола и последующего сгущения в этаноле с обратным холодильником. Т. пл. = 286°С, [α]D=+112,5±1,5° (к = 1% СНС13);
Вычислено, %: С 80,76; Н 7,78; N 3,49.
C27H31NO2
Найдено, %: С 80,6; Н 8,1; N 3,3.
Пример 35. 17β-Гидрокси-11β-[4-(метиламино) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-он,
Стадия А, 3,3-(Диоксиэтандиил)-11β-[4-(N-метил-N-аминоаллил) фенил]-17β-(проп-1-инил)-эстра-9-он-5α-17β-диол.
Получение 4-бром-М-метил-К-аллил-анилина.
а) N-Метил-4-броманилин.
В инертной среде добавляют в течение 45мин раствор, содержащий 179г брома в 120см³ уксусной кислоты, в смесь 120г N-метиланилина с 600см³ уксусной кислоты при температуре ниже 40°С. Перемешивают в течение 1ч 15мин, доводя до температуры окружающей среды, вливают в смесь воды и льда, выщелачивают натрием до рН 10, выделяют хлористый метилен, промывают хлорометиленовые фазы раствором, насыщенным хлористым натрием, просушивают их, концентрируют всухую под пониженным давлением и получают 213г .ожидаемого продукта,
б) 4-Бром-N-метил-N-аллиланилин.
В инертной среде добавляют по каплям 280см³ эфирного раствора бромистого этилмагния в 50,05г продукта, полученного на стадии а, поддерживая температуру ниже 20еС. Перемешивают в течение 30мин, затем добавляют в течение 15мин 28см³ бромистого аллила и подогревают на отливе в течение 40мин. Оставляют охладиться, добавляют по каплям 25см³ 1 N раствора бромистого этилмагния и перемешивают в течение 25мин. Вливают реакционную смесь в охлажденный раствор хлористого аммония, отстаивают водную фазу, выделяют хлористый метилен, сушат, концентрируют всухую и получают 61,35 ожидаемого продукта.
Получение магнийсодержащего соединения.
Нагревают до 40°С суспензию 1,4г магния в 10см³ тетрагидрофурана и добавляют несколько капель раствора 9,4г 4-бром-N-метил-N-аллиланилина В 26см³ тетрагидрофурана. Затравляют выделение магнийсодержащего соединения, добавляя несколько капель бромистого этилена, затем продолжают в течение 30мин добавление бромистого соединения. Поддерживают температуру 60°С при помощи масляной ванны в течение еще 30 мин. Охлаждают и титруют йодом ~ 0,93 Мо/лит.
Конденсация.
Охлаждают посредством ванны с температурой 0 С раствор 4,4г 5α-10α-эпокси-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-17α-(проп-1-инил)-эстра-9(11)-ен-17β-ола в 44см³ тетрагидрофурана, к которому добавляют 450 мг хлористой меди, а затем по каплям в течение 40 мин добавляют 34см³ магнийсодержащего соединения 0,93 М, полученного описанным способом. Оставляют на 1ч при 0°С, разбавляют 50см³ тетрагидрофурана, затем вливают в раствор хлористого аммония и экстрагируют этилацетатом. Промывают органическую фазу, сушат, выпаривают под небольшим давлением и получают 10,7г нечистого продукта. Продукт фильтруют на кремнеземе (элюант бензол - этил-ацетат, 7:3). Получают 5,2г целевого продукта, который используют на следующей стадии.
Стадия Б. 3,3-[(Этандиил-бис-(окси)]-17β-[4- (метиламино) фенил]-17α-проп-1-инил)-эстр-9-ен-5α-17β-диол.
В раствор 1г продукта, полученного на стадии А, в 10см³ этанола добавляют 100 мг реактива Вилкинсона [хлор-трис (трифенилфосфин)родий] и нагревают с обратным холодильником. После 30 мин нагревания выпаривают под небольшим давлением и фильтруют полученный продукт на кремнеземе (элюант хлорметилен, затем эфир). Соединяют элюаты, промывают, сушат и получают 805 мг кристаллов. Т. пл. . = 225°С.
Вычислено, %: С 75,44; Н 8,23; N 2,93.
С30 H39 NO4 (477,65).
Найдено, %: С 75,77; Н 8,4; N 2,9.
Стадия В. 17β-Гидрокси-11β-[4-(метиламино) фенил]-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-он.
770 мг продукта, полученного на стадии Б, растворяют в 7,7см³ метанола и 7,7см³ соляной кислоты 2 N. После 1ч реакции разбавляют 10см³ воды. Фильтруют, разбавляют раствором бикарбоната натрия, осаждают и сушат при 70ºС под небольшим давлением Получают 640 мг сырого продукта, который кристаллизуют в смеси хлористого метилена и изопропилового эфира. Получают 567 мг очищенного продукта.
Образец для анализа получают в результате очистки путем хроматографии и рекристаллизации в смеси хлороформа и изопропилового эфира. Т. пл. = 238° С.
Вычислено, %: С 79,96; Н 7,9; N 3,32; С1 1,2.
C28H33NО2 (415,58)
Найдено, %: С 80,1; Н 8,1; N 3,3; С1 1,2.
[α]D=+128,5 ± 3° (с = 1% СНС13);
Пример 36. N-[4-[17β-Гидрокси-З-оксо-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-11β-ил] фенил] ацетамид.
1,42г 11β-(4-аминофенил)-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-З-она суспендируют в 14см³ бензола и 3,5см³ тетрагидрофурана. Добавляют 0,37см³ уксусного ангидрида и перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1ч, послечего вливают в насыщенный раствор кислого карбоната натрия. Экстрагируют этилацетатом, промывают водным раствором, насыщенным хлористым натрием, затем сушат. После выпаривания растворителя получают 1,62г сырого продукта, который очищают путем хроматографии на кремнеземе, элюируя этилацетатом. Получают 1,524г очищенного продукта, который растворяют в минимальном количестве хлористого метилена, затем осаждают путем добавления изопропилового эфира. Обезвоживают, промывают изопропиловым эфиром, затем сушат под небольшим давлением. Получают 1,47гчистого продукта, Rf = 0,28 (чистый этилацетат).
ПМР (CDCl3), ррм: 0,51 (18-Mе); 1,91 (СН3-С=С-); 2,16 (СН3СО); 4,4 (Н в 11) 5,8 (Н в 4).
Пример 37. 11β-(4-Диметиламинофенил)-17β-гидрокси-3-оксо-19-нор-17α-прегна-4,9-диен-20-ин-21-карбоновая кислота.
Стадия А. 3,3-(Этандиил-бис-окси)-5α-17R-дигидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-19-нор-17α-прегна-4,9-диен-20-ен-21-этилкарбоксилат.
В раствор 10см³ тетрагидрофурана и 0,51см³ этилпропиолата добавляют в течение 30 мин при -70°С 3см³ раствора 1,68 М п-бутиллития в гексане. Полученный раствор перемешивают в течение 10мин, затем в течение 15 мин добавляют 452 мг 3,3-(этандиил-бис-окси)-5α-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-эстра-9-ен-17-она, растворенного в 4см³ тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 1ч при -70С. Затем добавляют 0,5см³ соляной кислоты. Оставляют нагреваться до температуры окружающей среды, добавляют кислый карбонат натрия, экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и получают 750 мг продукта, который хроматографируют на кремнеземе, элюируя смесью бензола и этилацетата (3:2) и 1% триэтиламиначистый продукт для анализа получают в результате растворения 470 мг продукта в 8см³ хлористого метилена, фильтрования, добавления 20см³ изопропилового эфира, концентрации до начала кристаллизации, замораживания, обезвоживания, промывки изопропиловым эфиром и сушки при небольшом давлении. Получают 370 мг и чистого продукта. Т. пл. = 255°С.
Стадия Б. 11β-[(Диметиламино) фенил]-17β-гидрокси-3-оксо-19-нор-17-прегна-4,9-диен-20-он-21-этилкарбоксилат.
Суспензируют в среде азота при температуре окружающей среды 360 мг продукта, полученного на стадии А, в 7см³ этанола и добавляют 0,7см³, соляной кислоты на половину. Нагревают полученный раствор в течение 1ч до 50°С, дистиллируют этанол, добавляют кислый карбонат натрия, перемешивают, экстрагируют этилацетатом, промывают водой, высушивают. Получают 300 мг продукта, который хроматографируют на кремнеземе, элюируя смесью петролейного эфира (т. кип.= - 60-80°С) с этилацетатом (1:1). Получают 190 мг целевого продукта.
Вычислено, %: С 76,35; Н 7,65; N 2,87.
С31 H37 NO4
Найдено, %: С 76,1; Н 7,8; N 2,9.
[α]D=+78 ± 1,5° (к = 1% СНС13);
Стадия В. 11β-[4-(Диметиламино)-фенил]-17β-гидрокси-3-оксо-19-нор-17α-прегна-4,9-диен-20-ин-21-карбоновая кислота.
Добавляют 0,4см³ натрия 211 в раствор 350 мг продукта, полученного на стадии Б, в 7см³ этанола. Нагревают до-60°С в течение 30мин, оставляют остыть до температуры окружающей среды, нейтрализуют посредством 0,4см³ соляной кислоты 2 N. Дистиллируют этанол, забирают остаток с 20см³ хлористого метилена, промывают водой, высушивают. Получают 300 мг продукта, который хроматографируют на кремнеземе (элюант: хлористый метилен - метанол, 8:2).
Высушивают фракции Rf = 0,15. получают 200 мг аморфного целевого продукта.
Пример 38. 11β-(4-Диметиламинофенил)-13β-этил-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-гона-4,9-диен-3-он.
Стадия А. 3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-13β-Этил-17α-(проп-1-инил)-гона-5(10)9(11)-диен-17β-ол.
Получение бромистого пропинилмагния.
Охлаждают до 0°С 57см³ раствора бромистого этилмагния 0,9 М в этиловом эфире и барботируют пропином в течение 0,5ч, затем еще в течение 1ч при температуре окружающей среды. В полученный раствор вводят по каплям раствор 9,28г 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-13β-этилгона-5(10)9(11)-диен-17-она в 50см³ тетрагидрофурана. Перемешивают в течение 2ч в инертной атмосфере и выливают реакционную среду на 170г льда и 20г хлористого аммония. Экстрагируют этиловым эфиром, сушат и концентрируют в.сухую под небольшим давлением. Кристаллизируют полученный осадок в изопропиловом эфире и получают 2,14г целевого продукта. Т. пл.=174°С. Очищают маточные растворы путем кристаллизации, хроматографии на кремнеземе и получают 3,61г ожидаемого продукта. Т. пл. = 176-178°С.
Стадия Б.3,3-[1,2-Этандиил-бис-(окси)]-17α-(проп-1-инил)-13β-этил-5α-10α-эпоксигона-9(11)-ен-17β-ол.
Охлаждают до 0 С 5,7г продукта, полученного на стадии А, в 27см³ хлористого метилена, и 0,2см³ пиридина и добавляют сразу 0,3см³ сесквигидрата гексафторацетона, а затем по каплям 2см³ 50-ной перекиси водорода (200 об.). В течение 48ч перемешивают при 0°С. Вливают реакционную среду в 100см³ охлажденного раствора тиосульфата натрия (0,2 М), затем добавляют очень незначительное количество триэтиламина и экстрагируют хлористым метиленом. Промывают водой органические фазы, сушат и концентрируют всухую под небольшим давлением. Хроматографируют осадок на кремнеземе, элюированном смесью бензола и этилацетата (4:1), и получают 5,3г целевого продукта.
Стадия В. 11β-(4-Диметиламинофенил)-3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-13β-этил-5α-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-гон-9(11)-ен-17-ол.
Перемешивают в инертной атмосфере при температуре 0 - 5ºС 5,3г 3,3-[1,2-этандиил-бис-(окси)]-17α-(проп-1-инил)-13β-этил-5α-10α-эпоксигона-9(10)-ен-17-β-ола в 106см³ тетрагидрофурана 0,158г хлористой меди. В течение 50мин добавляют 60см³ раствора 0,815 М бромистого (4-диметиламинофенил) магния в тетрагидрофуране. После добавления перемешивают в течение еще 15мин и вливают реакционную среду в 300см³ водного раствора, насыщенного хлористым аммонием. Промывают органическую фазу раствором хлористого аммония, высушивают под небольшим давлением. Получают 10,55г сырого целевого продукта, который используют на следующем этапе.
Получение бромистого (4-диметиламинофенил)магния.
Подогревают до 40°С 3г магниевой стружки в 5см³ тетрагидрофурана, добавляют по каплям 20г 4-бром-N,N-диметиланилина в 100см³ тетрагидрофурана в течение 0,5ч и перемешивают еще в течение 1,5ч.
Стадия Г. 11β-4-(Диметиламинофенил)-13β-этил-17β-гидрокси-17α-(проп-1-инил)-гона-4,9-диен-З-он.
Перемешивают в течение 30мин при температуре окружающей среды 10,55г продукта, полученного на стадии В, 100см³ метанола и 20см³ соляной кислоты 2 N. Добавляют 300см³ этилового эфира, затем 150см³5 раствора бикарбоната натрия 0,25 М перемешивают, отстаивают, реэкстрагируют эфиром, промывают органическую фазу раствором бикарбоната натрия 0,25 М, затем водным раствором, насыщенным хлористым натрием. Сушат, концентрируют всухую под небольшим давлением. Хроматографируют осадок на кремнеземе, элюированном смесью петролейного эфира (Т. кип. = 60-80ºС) и этилацетата (3:2), концентрируют всухую фракцию, соответствующую ожидаемому продукту, рекристаллизуют в изопропиловом эфире и получают 3,42г целевого продукта. Т. пл. = 162°С. После хроматографии и кристаллизации продукт плавится при 164ºС.
[α]D=+138±2° (с = 1% СНС13);
Пример 39. 11β-(4-Диметиламинофенил)-33-гидроксиимино-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-17β-ол в виде анти-изомеров и син-изомеров. Перемешивают с обратным холодильником в течение 1ч 4г 17β-гидрокси-11β-(4-диметиламинофенил)-17α-(проп-1-инил)-эстра-4,9-диен-3-она, полученного по примеру 4, 40 мл этанола, 7,6 мл пиридина и 1,3г хлоргидратагидроксиламина, Реакционную смесь охлаждают, выливают в ледяную воду, перемешивают в течение 0,5ч, отделяют образовавшийся осадок, промывают его в воде, выделяют и высушивают в вакууме. Получают 4,18г исходного продукта, который очищают методом хроматографии на окиси кремния, элюируя смесью метилен - ацетат этилхлорида (7:3).
Выделяют 2,34г анти-изомера заданного продукта, Rf = 0,33; 1,31г син-изомера заданного продукта, Rf = = 0,26; 925 мг смеси двух изомеров. Рекристаллизация анти-изомера с Rf = 0,33 в смеси окиси диизопропила с метиленхлоридом дает продукт с т. пл. = 220°С, [α]D=+164±3,5° (0,8% СНС13);
Рекристаллизация син-изомера с Rf = 0,26 в указанной смеси дает продукт с т. пл. 260ºС, [α]D=+141±3,5° (0,8% СНС13);
Фармакологическое исследование.
Изучение активности продуктов на гормонных рецепторах. Минералокортикоидный рецептор почки крысы.
Крысы-самцы Sprague-Dawley EOPS весом 140 - 160г, у которых удалены надпочечники за 4-8 дн. до этого, умерщвляются и в их почки вводится на месте перфузией 50 мл буферного раствора (Tris 10 мМ, сахароза 0,25 М, НС1 рН 7,4). Затем почки удаляются, декапсулируются и подвергаются гомогенизации при 0ºС методом Поттера политетрафторэтилен - стекло (1г ткани для 3 мл буферного раствора). Продукт гомогенизации центрифугируется в течение 10.мин при 800г и 0°С.
Чтобы избежать фиксации обработанного тритием альдостерона на глюкокортикоидном рецепторе, прибавляют 11β-17β-дигидрокси-21-метил-прегна-1,4,6-триен-20-ин-3-он стероид, который фиксируется только на глюкокортикоидном рецепторе, к находящемуся на поверхности продукт подвергается ультрацентрифугированию при 105000г в течение 60мин при 0°С. Аликвотные части таким образом полученного поверхностного продукта подвергаются инкубации при 0°С с обработанным тритием альдостероном постоянной концентрации (Т) в присутствии увеличивающихся концентраций (0-2500 10-9 М) холодного альдостерона или холодного изучаемого продукта. По истечении времени (т) инкубации концентрация связанного обработанного тритием альдостерона (В) измеряется техникой адсорбции с носителем уголь - декстран.
Андрогенный рецептор простаты крысы.
Крысы самцы Sprague Dawly EOPS весом 160-200г подвергаются кастрации через 24ч после кастрации животные умерщвляются, простаты взяты, взвешены и подвергаются гомогенизации при 0°С методом Поттера политетрафторэтилен - стекло в буферном растворе TS (Tris 10 мМ, сахароза 0,25 М, НС1 рН 7,4). Берут 1г ткани на 5 мл TS. Затем продукт гомогенизации подвергается ультрацентрифугированию (105000 х 60мин) при 0°С. Аликвотные части таким образом полученного поверхностного продукта инкубируются при 0°С в течение 2ч с продуктом Р (17β-гидрокси-17α-метил-эстра-4,9,11-триен-3-он) постоянной концентрации (Т) в присутствии либо холодного Р, либо холодного тестостерона, либо изучаемого продукта увеличивающейся концентрации (0 - 1000 х х 10-9 М). Концентрация обработанного тритием связанного продукта Р(В) затем измеряется в продукте инкубации при помощи техники адсорбции с носителем уголь - декстран.
Прогестогенный рецептор матки кролика.
Кролики(самки), не достигшие половой зрелости, весом около 1 кг получают подкожным путем 25 мкг эстрадиола. 5 дн. спустя животные умерщвляются, матки отбираются, взвешиваются и гомогенизируются при 0°С методом Поттера политетрафторэтилен - стекло в буферном растворе (Tris 10 мМ, сахароза 0,25 М, НС1 рН 7,4). 20 Берут 1г ткани на 50 мл раствора.
Продукт гомогенизации затем подвергается ультрацентрифугированию (1О5ООО гх 90мин) при 0°С. Аликвотные части таким образом полученного 25 поверхностного продукта подвергаются инкубации при 0ºС в течение времени (т) с насыщенным тритием продуктом R постоянной концентрации (Т) (17,21-диметил-19-нор-4,9-прегнадиен-3,20- 30-дион) в присутствии либо холодного R, либо холодного прогестерона, либо холодного изучаемого продукта увеличивающихся концентраций (0 - 2500 х х 10-9 М). Концентрация насыщенного тритием связанного продукта R(B) затем определяется в каждом продукте инкубации при помощи техники адсорбции с носителем уголь - декстран.
Глюкокортикоидный рецептор зобной железы крысы.
Через 4-8 дн. после удаления надпочечников крысы-самцы Sprague Dawley, EOPS, весящие 160-200г, умерщвляются, и зобные железы отбираются и 45 подвергаются гомогенизации при 0°С в буферном растворе (Tris 10 мМ, сахароза 0,25 М, дитиотрейтол 2 мМ, НС1 рН 7,4) методом Поттера политетрафторэтилен - стекло (1г ткани на 10 мл TS). Затем продукт гомогенизации подвергается ультрацентрифугированию (105000г х,90мин) при 0°С, Аликвотные части таким образом полученного поверхностного продукта подвергаются инкубации при 0°С в течение времени (т) с насыщенным тритием дексаметазоном постоянной концентрации (Т) в присутствии либо холодного дексаметазона, либо холодного продукта изучения увеличивающихся концентраций (0-2500·10-9 М). Концентрация насыщенного тритием связанного дексаметазона (В) измеряется затем в каждом продукте инкубации при помощи техники адсорбции с носителем уголь-декстран, Эстрогенный рецептор матки мыши. Не достигшие половой зрелости мыши (самки) в возрасте от. 18 до 21 дн. умерщвляются, матки отбираются, а затем подвергаются гомогенизации при 0ºС методом Поттера политетрафторэтилен - стекло в буферном растворе TS (Tris 10 мМ, сахароза 0,25 М, НС1 рН 7,4). Берут 1г ткани на 25 мл TS,. Продукт гомогенизации затем подвергается ультрацентрифугированию (105000гх х 90мин) при 0°С. Аликвотные части таким образом полученного поверхностного продукта подвергаются инкубации при 0ºС в течение времени (т) с насыщенным тритием эстрадиолом постоянной концентрации (Т) в присутствии либо холодного эстрадиола, либо холодного изучаемого продукта увеличивающихся концентраций (0-1000 – 10-9 М). Затем концентрация насыщенного тритием связанного эстрадиола (В) измеряемся, в каждом продукте инкубации техникой адсорбции с носителем уголь-декстран (табл. 1 и 2).

Таблица 1

Продукт примера Минералокортикоид Андроген Прогестоген Глюкокортикоид Эстроген
Время инкубации при ºС
2ч 4ч 24ч 2ч 4ч 24ч 2ч 4ч 24ч 2ч 4ч 24ч 2ч 4ч 24ч
4 - - 0 - - 20 74 - 640 - 270 265 0 - -
17 - - 0 - - 68 81 - 351 - 279 235 0 - -
14 - - - - - 0 41 - 250 - 46 94 0 - -
8 - - 0 - - 14,7 81 - 268 - 212 167 0 - -
10 - - 0 - - 32 78 - 467 - 254 292 0 - -
11 - - 0 - - 9,8 6,3 - 8,3 - 9 14 0 - -
16 - - 1,7 - - 29 129 - 166 - 283 259 0 - -
12 - - 0 - - 2,8 0,6 - 0,4 - 5,3 6,2 0 - -
6 - - 0,8 - - 7,3 10 - 4,3 - 171 118 0 - -
20 - - - - - 2,2 1,1 - 2,5 - 7,8 5 0 - -
22 - - 0,3 - - 8 175 - 843 - 178 221 0 - -
29 - - 0 - - 4,6 15,2 - 38 - 79 104 0 - -

Вычисление относительного аффинитета связи.
Вычисление относительного аффинитета связи (ОАС) одинаковое для всех рецепторов. Вычерчивают следующие кривые: 1) процент насыщенного тритием связанного гормона В/Т в зависимости от логарифма концентрации холодного контрольного гормона; 2) В/Т в зависимости от логарифма концентрации холодного изучаемого продукта.
Определяют прямую уравнения LC50 = [B/Тмакс + В/Тмакс] 2 В/Tмакс насыщенного тритием связанного гормона для инкубации этого насыщенного тритием гормона при концентрации (Т) В/Т=мин=% насыщенного тритием, связанного гормона для инкубации этого насыщенного тритием гормона при концентрации (Т) в присутствии большого избытка холодного гормона (2500 х х 10-9 М).
Пересечения прямой LC50 и кривых позволяют определить концентрацию холодного гормона (СН) и исследуемого холодного продукта (СХ), которые тормозят на 50% связь насыщенного тритием гормона на рецепторе.
Относительный аффинитет связи (ОАС) изучаемого продукта определяется уравнением ОАС = 100 (СН)/(СХ).
Результаты вычисления относительного аффинитета связи приведены в табл. 2.
Таблица 2

Продукт примера Глюкокортикоид
Инкубационное время при 0ºС
4 ч 24 ч
1 (2-Пиридинил) 130 28
3 135 170
9 57 80
23 134 129
24 135 171
28 241 227
30 84 88
38 92 117
Продукт А 613 691
Продукт В 195 278
Продукт С 207 147


Антигликортикоидная активность.

Продукт 5-10-8 дек саметазон + при-
меру исследуемый продукт
Процент торможения эффекта дексаметазона
5 10-7М 70
10-6М 84

Таким образом, изучаемые продукты (особенно продукты примеров 4, 17, 10, 16 и 22) проявляют ярко выраженный аффинитет по отношению к глюкокортикоидному и прогестогенному рецепторам, а также легкий аффинитет по отношению к андрогенному рецептору. Однако эти продукты не проявляют никакой активности на минералокортикоидном и экстрогенном рецепторах.
Из полученных результатов можно заключить, что продукты могут проявить активность агонизма или антагонизма глюкокортикоидов, прогестогенов и андрогенов.
Изучение противовоспалительных свойств продукта примера 4.
Противовоспалительная активность была изучена по классической пробе гранулема.
По известной методике условным крысам-самкам Wistar весом 100-110г вводят под кожу торакса 2 пеле ваты в 10 мг (каждое). Подкожная инъекция, которая начинается сразу после имплантации, продолжается 2 дн. по 2 инъекции в день 16ч после последней инъекции, т.е. на третий день, животные умерщвляются.
Пеле ваты, которые окружены образовавшейся тканью гранулемы, взвешиваются в свежем виде, а потом после пребывания при 60ºС в течение 18ч. Вес гранулемы определяют, вычитая первоначальный вес ваты. Зобная железа также отбирается и взвешивается, чтобы определить зобную активность продукта.
При дозе в 50 мг/кг, введенной под кожу, продукт примера 4 не проявляет никакого противовоспалительного глюкокортикоидного или зобного эффекта.
Противоглюкокортикоидная активность.
Клетки зобной железы крыс у которых удалены надпочечники, подвергаются инкубации при 37°С в течение 3ч в питательной среде, содержащей 5 х х 10-8 М дексаметазона в присутствии или в отсутствии изучаемого продукта различных концентраций. Прибавляют насыщенный тритием уридин и продолжает инкубацию в течение 1ч. Продукт инкубации охлаждают, обрабатывают его 5%-ным раствором трихлоруксусной кислоты, фильтруют на ватманской бумаге GF/A, промывают три раза при помощи 5%-ного раствора трихлоруксусной кислоты. Определяют радиоактивность, удержанную фильтром (табл. 3).
Таблица 3.
Продукт примера 5 10-8 дексаметазон + исследуемый продукт Процент торможения эффекта дексаметазона
1 2 3
4 10-8М
10-7М
10-6М 30
70
90
14 10-8М
10-7М
10-6М 18
57
*
8 10-8М
10-7М
10-6М 22
53
*
10 10-8М
10-7М
10-6М 57
85
*
11 10-8М
10-7М
10-6М 14
34
75
16 10-8М
10-7М
10-6М 28
60
99
6 10-8М
10-7М
10-6М 5
15
83
20 10-8М
10-7М
10-6М 4
21
50
22 10-8М
10-7М
10-6М 16
69
*

* При дозе в 10-6 торможение эффекта дексаметазона было полное.
Глюкокортикоиды и, в частности, дексаметазон вызывает уменьшение ассимиляции насыщенного тритием уридина. Изучаемые продукты и в особенности продукты примеров 4, 14, 8, 10, 11, 16, 6, 20 и 22 оказывают сопротивление этому эффекту. С другой стороны было отмечено, что изучаемые продукты не проявляют никакого эффекта глюкокортикоидного типа, когда они используются одни.
Изученные продукты проявляют явную противоглюкокортикоидную активность, причем одновременно эти продукты лишены глюкокортикоидной активности.
Испытание на острую токсичность.
Вещество: продукт примера 4 (продукт А); активность вещества: антипрогестерон (антиглкжокортикоид); препаративная форма: дисперсия; носитель: 0,25%-ная натрийкарбоксиметилцеллюлоза с 9,2%-ным полисорбатом 80; характер исследования: определение острой токсичности при оральном введении.
Виды подопытных животных: крыса породы Sprague Dawley CDI, лишенная специфического патогена, пол - самцы и самки по 10 животных каждого пола на дозу 0-1000 мг/кг. Период наблюдений: через 14 дн: после введения препарата.
Результаты: продукт А, диспергированный в 0,25%-ной натрийкарбоксиметилцеллюлозе с 0,2%-ным полисорбатом 80, введенный орально в организм самцов и самок крыс, не вызывал смерть животных при микронизировании соединения. Одна крыса (самец), обработанная немикронизированной формой продукта, погибала в первый день. Таким образом, летальная доза 50 превышала 100 мг/кг.

Патент Франции №2423486, кл. С07 D 301/12, 1977