ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ

Изобретение относится к химикофармацевтической промышленности, а именно к лекарственным композициям и может быть использовано в медицине для регуляции деятельности иммунной системы человека и животных. Целью изобретения является обеспечение безболезненности введения тимогара. Указанная цель достигается тем, что в состав фармацевтической композиции вводится новокаина гидрохлорид в концентрации 0,25%. Таким образом, предлагается композиция состава: дипептид изолейцил-триптофан -0,1 г, новокаина гидрохлорид - 2,5 г, воды- до 1 л. Применение указанной композиции позволяет: исключить болезненность введения препарата, понизить вероятность внешнего загрязнения препарата.

Изобретение относится к химикофармацевтической промышленности, а именно к лекарственным формам и может быть использовано в медицине для регуляции деятельности иммунной системы человека и животных.
Известна лекарственная форма препарата тимоген. представляющая собой 0,01%-ный раствор натриевой соли дипептида глутамил-триптофан в 0,9%-ном физиологическом растворе натрия хлорида [1].
Известна лекарственная форма препарата глутоксим [2], представляющая собой раствор бис - (гамма - L-глутамил)- L-цистеинил-бис-глицина динатриевой соли в 0,9%-ном физиологическом растворе натрия хлорида.
Недостатком указанных композиций является при повышенной индивидуальной чувствительности болезненность введения препарата. В таких случаях рекомендуется смешивать препарат с 1-2 мл 0.5%-ного раствора новокаина. Однако при этом повышается вероятность загрязнения препарата внешними агентами.
Прототипом заявляемой композиции является препарат тимогар. представляющий собой 0,01%-ный водный раствор дипептида изолейцил-триптофан [3]. Недостатком данной композиции является болезненность введения препарата.
Целью изобретения является обеспечение безболезненности введения тимога- ра.
Указанная цель достигается тем, что в состав фармацевтической композиции вводится новокаина гидрохлорид в концентрации 0,25%.
Таким образом, предлагается композиция состава:
дипептид изолейцил - триптофан - 0.1 г
новокаина гидрохлорид - 2.5 г вода- до 1 л.
Применение указанной композиции позволяет:
1.
Исключить болезненность введения препарата.
2.
Понизить вероятность внешнего загрязнения препарата.
Пример 1
4
В реактор помещают 0,1 г дипептида изолейцил-триптофан, 2,5 г новокаина гидрохлорида и 1 л воды для инъекций. Перемешивают до полного растворения веществ.
Пример 2.
Количественное определение новокаина.
5 мл препарата помещают в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят водой до метки и тщательно перемешивают (раствор А). 1 мл раствора А переносят в мерную колбу емкостью 50 мл, доводят водой до метки и тщательно перемешивают. Измеряют оптическую плотность полученного раствора при 290 нм. Одновременно измеряют оптическую плотность стандартного раствора новокаина, приготовленного аналогичным образом, исходя из 0,25%-ного раствора.
Содержание новокаина в процентах рассчитывают по формуле:
X = А . 0,25
Содержание новокаина в препарате должно составлять 0,242-0,258%.
Перед применением методики была проведена ее валидация.
Для проверки линейности разработанной методики готовили растворы состава с концентрациями от 80 до 120% с шагом 5% согласно [4], разбавляли согласно разработанной методике и измеряли значение оптической плотности при 290 нм.
Полученные данные приведены в таблице 1 и на Фиг.1 и 2. (См. таблица 1.)
Критерием приемлемости линейности является коэффициент корреляции. Если его величина близка единице, то совокупность данных можно описать прямой линией. Величина коэффициента корреляции должна быть не ниже 0.99. Коэффициент корреляции составил 0,999.
Для определения параметров линейности использовали методические рекомендации [4]. Методом наименьших квадратов была рассчитана регрессионная прямая У, = bXj + а, где а - свободный член для рассчитанной регрессионной прямой (отрезок, отсекаемый на оси ординат), b - угол наклона рассчитанной регрессионной прямой: b = 0,01, а = 0,058. Свободный член а согласно [4] должен удовлетворять условию
|а| < Ад = t(95%, n - 2)-sa,
где sa - стандартное отклонение для отрезка. который отсекается на оси ординат (для рассчитанной регрессионной прямой), t - коэффициент Стьюдента для одностороннего
распределения, доверительной вероятности 95% и числа степеней свободы f = п - 2.
При выражении концентрации новокаина в %:
Для нахождения уравнения прямой Y = Ь Х + а по полученным данным составляли и решали систему уравнений:
А. С использованием концентрации в анализируемом растворе после разбавления:
ZX?-b + £Х,-а = ZXi-Yj [ 0 00000229-ь + 0,0045-а = 0,001463 J ЕҲ/Ь + 9’а = £ У, J 0,0045'Ь + 9-а = 2,879
а = 2,879-0,0045 Ь
0 00000229-ь + c. r.r,d;g’g79'0’0C45b> =0.001463
О 00000229 Ь + 0 0129555-0 00002025 Ъ - 0,001463
9
0 00000229 Ь + 0 0014395 - 0 00000225’Ь = 0,001463
0 00000004-Ь = 0,001463 - 0 0014395 = 0 0000235
Ь = 587,5
а= 2.879 - 0,0045 b = 2.879 - 0,0045 587.5 2,879 - 2.64375 _ 0 23525 = 0.0261
7 9 9 ” 9
D = 587,5‘С + 0,0261
В нашем случае Да = 2,13‘0,05 = 0.1065, рассчитанное значение свободного члена а = 0,0261, что ниже Да, следовательно соблюдается критерий статистической незначимости.
Б. С использованием концентрации в составе:
УХ?-Ь + LXi-a = SXl,Yi ! 0.571875'Ь + 2,25’а = 0,731738
XXi-b + 9-a = IY1 ’ 2,25-Ь + 9-а = 2,379
I
а = 2,879-2,25-b
9
0.571875-Ь + 2 25 (2,879 -2,25 Ь) = 0,731738
9
0.571875 b + 6.47775 -5 0625-Ь =0,731738 о
0.571875-Ь + 0.71975 - 0.5625'Ь = 0,731738 0.009375-Ь = 0,731738 - 0 71975 = 0 011988 Ь= 1,279
а= 2,879-2,25 1,279 = 2,879 - 2.87775 _ 0.00125 =0.000139 9 р ӯ
D= 1,279-С + 0,000139
Для определения повторяемости методики проводили количественное определение новокаина в одном образце препарата в 10 повторностях. Критерий приемлемости выражался величиной относительного стандартного отклонения, которое не должно превышать 2% и составил 0,282% (табл. 2), что свидетельствует о прецизионности методики в условиях повторяемости. (См. таблица 2.)
Определение воспроизводимости методики определения новокаина проводили 2 аналитика в 5 повторностях на 5 образцах препарата (табл.З). (См. таблица 3.)
Критерий приемлемости выражался величиной относительного стандартного отклонения, которое не должно превышать 10%. Среднее его значение находилось в пределах 0.216-0,337%, что указывает на прецизионность методики в условиях воспроизводимости.
Правильность методики устанавливали путем измерения количественного содержания новокаина в растворах, полуденных путем добавления необходимого количества стандарта к исследуемому раствору до получения концентрации 0.25% (таблица 4). Критерий приемлемости - средний процент восстановления при использовании растворов заданных концентраций, должен находиться в пределах 100±5%. (См. таблица 4.)
Данные таблицы 4 показывают, что средний процент восстановления находится в пределах от -102,01 до +101.19, среднее его значение составляет 100,0%.
Таким образом, методика легко воспроизводима. доступна, занимает минимум рабочего времени, не требует дорогостоящих реактивов. Она позволяет объективно оценивать количественное содержание новокаина в присутствии дипептида изолейцил-триптофан.
Пример 3.
Количественное определение дипептида изолейцил-триптофан.
15 мл препарата подщелачивают до pH И 0,1 н раствором натрия гидроксида и 4 раза (4x10 мл) экстрагируют эти л ацетатом. У четвертой порции этилацетата измеряют оптическую плотность при 290 нм. Если значение оптической плотности на уровне фоновых значений, обработку этилацетатом прекращают. Этил ацетатный слой отделяют. Водный слой переносят в мерную колбу емкостью 25 мл и доводят водой до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора при 278 нм. Концентрацию дипептида в мкг/мл рассчитывают по формуле:
Х= ■ 100
А
Перед применением эту методику также было необходимо валидировать. Валидация была проведена в соответствии с требованиями [4].
Первым этапом валидации методики было изучение линейности метода. Для этого готовили растворы дипептида с концентрациями от 80 до 120% с шагом 5% согласно [4] и измеряли значение оптической плотности. Полученные данные приведены в таблице 5 и на Фиг.З.
Критерием приемлемости линейности является коэффициент корреляции. Если его величина близка единице, то совокупность данных можно описать прямой линией. Величина коэффициента корреляции должна быть не ниже 0.99. Коэффициент корреляции составил 0,999.
Для определения параметров линейности использовали методические рекомендации [4]. (См. таблица 5.)
Методом наименьших квадратов была рассчитана регрессионная прямая
Yj = bXi + а,
где а - свободный член для рассчитанной регрессионной прямой (отрезок, отсекаемый на оси ординат), b - угол наклона рассчитанной регрессионной прямой: b = 0,01, а = 0,058. Свободный член а согласно [4] должен удовлетворять условию
|а| < ДА = t(95%, n - 2)’sa, где sa - стандартное отклонение для отрезка, который отсекается на оси ординат (для рассчитанной регрессионной прямой), t - коэффициент Стьюдента для одностороннего распределения, доверительной вероятности 95% и числа степеней свободы f - п — 2.
А. При выражении концентрации тимога- ра в мкг/мл:
Для нахождения уравнения прямой Y = Ь'Х + а по полученным данным составляли и решали систему уравнений:
Yx?‘b + LXi'a = IXl'Y, f91500'Ь + 900'1 = 920,325
J Z&'b + 9-a = ZY, J 900-Ь+ 9-а = 9.052
14 9.052 - 900 1: ]
- 9 I
91500-Ь + 9nn<9-05; -93C b) = 920,325
9
91500'b + 8146,8-810000 b = 920 325
9
91500'b + 905,2 - 90000‘b = 920,325 1500‘b = 920,325 - 905,2 = 15,125 b = 0,01
, = 9,052-900 b _ 9.052 -900 0.01 = 9.052 -9 = 0.052 = 0 005B
9 9 9 Ci
D = 0,0.1-C+ 0,0058
В нашем случае ДА = 2,13’0,05 = 0.1065. рассчитанное значение свободного члена а = 0,0058, что ниже Дд, следовательно соблюдается критерий статистической незначимое™.
Для определения повторяемости методики проводили количественное определение одного образца препарата в 10 повторностях. Критерий приемлемости выражался величиной относительного стандартного отклонения, которое не должно превышать 2% и составил 0,66% (табл. 6), что свидетельствует о прецизионности методики в условиях повторяемости. (См. таблица 6.)
Определение воспроизводимости методики определения тимогара проводили 2 аналитика в 5 повторностях на 5 образцах препарата (табл.7).
Критерий приемлемости выражался величиной относительного стандартного отклонения, которое не должно превышать 10%. Среднее его значение находилось в пределах 0,41-0,59%, что указывает на прецизионность методики в условиях воспроизводимости.
Правильность методики устанавливали путем измерения количественного содержания тимогара в растворах, полученных путем добавления необходимого количества стандарта к исследуемому раствору до получения концентрации 100 мкг/мл (таблица 8). Критерий приемлемости - средний процент восстановления при использовании растворов заданных концентраций, должен находиться в пределах 100±5%. (См. таблица 7.)
Данные таблицы 8 показывают, что средний процент восстановления находится в пределах от -101,71 до +101.39, среднее его значение составляет 100.0%. (См. таблица 8.)
Таким образом, методика легко воспроизводима, доступна, занимает минимум рабочего времени, не требует дорогостоящих реактивов. Она позволяет объективно определять количество дипептида при его совместном присутствии в препарате.
Пример 4
Стабильность разработанного состава.
После разработки методик количественного определения компонентов были проведены исследования стабильности разработанного состава. Полученные результаты приведены в таблице 9. (См. таблица 9.)
Как показывают полученные результаты новая композиция достаточно стабильна в условиях длительного хранения.
Как показывают полученные данные. разработанная композиция стабильна в условиях длительного хранения при температурах 4 и 35°С.

1. Тимоген. Инструкция по медицинскому применению.
2. Глутоксим. Инструкция по медицинскому применению.
3. Бобиев Г.М. Способ получения иммуностимулирующего препарата тимогара и его состав. Патент Республики Таджикистан № TJ 283. Опубл. Бюл.; 4(20) 13.12.2000 г., приоритет 23.10.1998 г.
4. Руководство для предприятий фармацевтической промышленности /Методические рекомендации. М.: - Издательство «Спорт и культура - 2000», 2007, 192 с.