Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, диагностики псориаза.
Целью изобретения является неинвазивная, ранняя диагностика псориаза, отказ от химреактивов, сокращение времени диагностики и разработка более доступного метода для стандартизации.
Для достижения поставленной цели, во время обращения пациентов с узелковым высыпанием на поверхности кожи, с мест очага собирается определенное количество соскобы элементов кожи (чешуйки). Затем полученная проба смешивается с определенным количеством монокристаллом КВг и прессуется в виде таблетки, затем реги-стрируются инфракрасные (ИК) спектры. Полученные ИК спектры сопоставляются с эталонным в качестве которого используют ИК спектры чешуйки больных, с традиционно установленными методами. При совпадении ИК спектров ставится диагноз псориаз.
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ПСОРИАЗА
(51) МПК: 8 G01N 21/35, G 01N 33/483
Сведения о документе ▾
- (11) Номер документа
- 435
- (13) Код типа документа
- P
- (51) МПК
- 8 G01N 21/35, G 01N 33/483
- (45) Дата публикации
- 05.06.2007
- Статус
- Прекратил действие
Заявка ▾
- (21) Рег. номер заявки
- 05000866
- (22) Дата подачи заявки
- 02.08.2005
Лица ▾
- (71) Заявитель(и)
- Шукуров Т. (TJ); Дадабаев Р.Д. (TJ); Зоиров П.Т. (TJ); Сохибова З.Н. (TJ) Мухидинова Г.М. (TJ)
- (72) Автор(ы)
- Шукуров Т. (TJ); Дадабаев Р.Д. (TJ); Зоиров П.Т. (TJ); Сохибова З.Н. (TJ) Мухидинова Г.М. (TJ)
- (73) Патентообладатель(и)
- Шукуров Т. (TJ); Дадабаев Р.Д. (TJ); Зоиров П.Т. (TJ); Сохибова З.Н. (TJ) Мухидинова Г.М. (TJ)
Реферат
Формула изобретения
1. Способ диагностики псориаза включающий взятие пробы с пораженных участков кожи для проведения анализа, отличающийся тем, что в качестве пробы используют соскоб чешуек кожи пациента в количестве 5-8 мг, который размельчают, смешивают с 700 мг монокристалла КВr, полученную смесь прессуют в таблетки, и реги-стрируют ИК спектр в диапазоне частот 2200-4000 см -1, полученный спектр сопоставляют со спектром эталонного образца, при совпадении которых ставят диагноз-псориаз.
Описание
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии для диагностики псориаза.
Известны ряд способов диагностики псориаза, среди которых более близким к предлагаемому, является ла-бораторный способ диагностики псориаза (Довжанский С.И., Псориаз, Саратов, 1976).
Особенности данного способа заключается в следующем, делается срез кожи на пораженных участках и бе-рется кусочек ткани для исследования. Материал обрабатывается, фиксируют на предметном стекле и смотрят под микроскопом. При обнаружение значительного акантоза, наличие удлиненных тонких и несколько утолщен-ных в нижней части эпидермальных выростов над вершинам сосочков дермы эпидермис истончен, иногда состоит из 2 - 3 рядов клеток. Характерен паракетроз, а в старых очагах - гиперкератози, нередко роговой слой частично или полностью отшелушен.
Зернистый слой выражен неравномерно, под участками паракератоза, как правило, отсутствует. В период прогрессирования в шипатовом слое отмечается меж -и внутриклеточный оттек, экзоцитоз с образованием очаго-вых скоплений нейтрофильных гранулоцитов, которые мигрируя в роговой слой или паракератотические участки, образуют микроабцессы Мойро.
В базальном и в нижних рядах шипатового слоя часто обнаруживают митозы. Соответственно удлинению эпидермальных отростков сосочки дермы увеличены, колбообразно расширены, отечны, капилляры в них изви-тые, переполненные кровью. В подсосочковом слое, кроме расширенных сосудов, отмечается небольшой перевас-кулярный инфильтрат из лимфоцитов, гистиоцитов с наличием нейтрофильных гранулицитов. Исходя, из всех пе-речисленных факторов можно ставит диагноз псориаз. Недостатком прототипа являются вторжение в организм пациента: во-первых, делается срез кожи на пораженных участках и берется для исследования, которые в даль-нейшем могут привести к осложнениям;
во-вторых, он трудоемкий и является инвазивным способом, часто заканчивается образованием различных рубцовых изменений на местах среза кожи;
в-третьих, она не всегда может быть использована для ранней диагностики.
Поэтому, нами был разработан способ использования метода ИК спектроскопии, позволяющий исследуя со-скобы элементов кожи (чешуйки), ставить диагноз на ранней стадии проявления очагов болезни и без вторжения в организм пациента.
Целью изобретения является ранняя диагностика псориаза на молекулярном уровне, не ожидая появлении элементов - папулы на поверхности кожи и отказ от вторжения в организм пациента. Предлагаемый способ не требует химреактивов, более прост, быстро и достоверно можно установить диагноз.
Поставленная цель достигается следующим образом. При осмотре пациентов проводится исследование феномена «стеаринового пятна», т.е. проводится поскабливание поверхности кожи в местах очага, в результате чего полу-чается мелкоотрубевидное шелушение рогового слоя, которое собирается в очень незначительном количестве. Собранные таким способом элементы кожи, являются объектом для исследования методом ИК спектроскопии.
Для регистрации ИК спектров взвешиваются 0,005÷0,008 г (5,0÷8,0) мг собранные выше описанным методом элементы кожи и размельчаются в агатовой ступке в виде порошка. Полученный порошок смешивается с 0,7 г (700 мг) также размельченного в порошок, спектрально чистого монокристалла КВг, и прессуется в специальной пресс-форме, подключенный с вакуумным насосом, для получения таблетки. Затем регистрируется ИК спектры полу-ченной таблетки в диапазоне частот 4000 - 2200 см -1. Время подготовки проб занимает около 20 - 25 мин, записи спектра 10 - 15 мин. Общее время для диагностик, около 40 мин.
Для установления диагноза, полученные ИК спектры соскоба чешуйки впервые обратившихся пациентов, со-поставляются с ИК спектром эталонного образца. В качестве эталонного образца используются соскобы чешуйки собранные у больных пациентов, состоявших на учете у врача дерматолога, которым известными в клинической практике достоверно установлены диагноз псориаза. Записываются также ИК спектры чешуйки данной группы больных выше описанным методом, которые служат эталонным спектром.
На фигуре приведены ИК спектры эталона (кривая 1), больных пациентов впервые обратившихся, с узелко-вым высыпанием на коже (кривая 2) и для сравнения, спектры чешуйки при себорейном дерматите (кривая 3). Как видно в приведенной фиг, (кривая 1), эталонному ИК спектру псориатических чешуек характерна широкая и ин-тенсивная полоса поглощения с частотой максимумом (νmах) при 3280 см -1, на низкочастотном крыле которой проявляется слабая структурная триплетная полоса поглощения с νmах при 2910 см -1. Аналогичные полосы харак-терны и спектрам чешуйки, впервые обратившим больным (кривые 2). Для удобства сопоставления все спектры нормированы по площади.
Пример 1. Пациентка А, болеет в течение 6 месяцев, впервые обратилась к дерматологам с первичным узелко-вым высыпанием на коже. Были собраны чешуйки и записаны ИК спектры, фиг, (кривая 2). Полученные ИК спек-тры показывают, что пики характеристических полос совпадают с пиками спектра эталона. Диагноз, распростра-ненная форма вульгарный псориаз, «весенняя форма», последующие наблюдения подтвердили диагноз.
Пример 2. Пациент Б, впервые обратился к дерматологам с жалобами на наличие единичных пятнистых вы-сыпаний на коже волосистой части головы, сопровождающиеся зудом. Традиционным методами не удалось уста-новить точный диагноз. Были собраны чешуйки и записаны ИК спектры по вышеописанному способу. Получен-ные ИК спектры сопоставлены со спектром эталона, полосы поглощения абсолютно идентичны. Выставлен диа-гноз ограниченная форма псориаза волосистой части головы. Последующие наблюдения подтвердили правиль-ность диагноза.
Пример 3. Пациентка С, впервые обратилась к дерматологам с жалобами высыпания на коже волосистой ча-сти головы и груди, зуд, при осмотре заметны пятна, инфильтрация, отрубевидное шелушение и единичные че-шуйки - корки. Известным лабораторным методом не удалось точно установить диагноз. Были собраны элементы кожи и записаны ИК спектры, вышеописанным способом, полученные спектры не совпали со спектром эталона. Назначается пробное лечение, пациентка находится под наблюдением врача, диагноз - себорейный дерматит, фиг, (кривая 3).
Были проведены анализы соскоба псоариатической чешуйки более 45 пациентов, впервые обратившиеся к дерматологам, с первичным признаками, высыпаниями и зудом на разных участках кожи. Были собраны чешуйки и записаны ИК спектры вышеописанным методом. В 32 случаях, полученные ИК спектры совпадали со спектром эталона, т. е. диагностировался псориаз, последующие наблюдение подтвердили правильность диагноза.
Таким образом, предлагаемый способ анализа элементов кожи (чешуйки) больных методом ИК спектроскопии, в диапазоне частот 4000 - 2200 см -1 и их сопоставления с ИК спектром эталона, при их совпадении устанавливается диагноз псориаза, определяется критерий «новизна», которые до настоящего времени не использовался в медицинской практике. Преимущество предлагаемого способа, от известных способов диагноза псориаза состоит в том, что он технически более прост, неинвазивный, точный, более экономичный, эффективный для ранней диа-гностики и быстрый. С момента сбора чешуйки, записи спектра и установления диагноза требуется около 40 мин.
Известны ряд способов диагностики псориаза, среди которых более близким к предлагаемому, является ла-бораторный способ диагностики псориаза (Довжанский С.И., Псориаз, Саратов, 1976).
Особенности данного способа заключается в следующем, делается срез кожи на пораженных участках и бе-рется кусочек ткани для исследования. Материал обрабатывается, фиксируют на предметном стекле и смотрят под микроскопом. При обнаружение значительного акантоза, наличие удлиненных тонких и несколько утолщен-ных в нижней части эпидермальных выростов над вершинам сосочков дермы эпидермис истончен, иногда состоит из 2 - 3 рядов клеток. Характерен паракетроз, а в старых очагах - гиперкератози, нередко роговой слой частично или полностью отшелушен.
Зернистый слой выражен неравномерно, под участками паракератоза, как правило, отсутствует. В период прогрессирования в шипатовом слое отмечается меж -и внутриклеточный оттек, экзоцитоз с образованием очаго-вых скоплений нейтрофильных гранулоцитов, которые мигрируя в роговой слой или паракератотические участки, образуют микроабцессы Мойро.
В базальном и в нижних рядах шипатового слоя часто обнаруживают митозы. Соответственно удлинению эпидермальных отростков сосочки дермы увеличены, колбообразно расширены, отечны, капилляры в них изви-тые, переполненные кровью. В подсосочковом слое, кроме расширенных сосудов, отмечается небольшой перевас-кулярный инфильтрат из лимфоцитов, гистиоцитов с наличием нейтрофильных гранулицитов. Исходя, из всех пе-речисленных факторов можно ставит диагноз псориаз. Недостатком прототипа являются вторжение в организм пациента: во-первых, делается срез кожи на пораженных участках и берется для исследования, которые в даль-нейшем могут привести к осложнениям;
во-вторых, он трудоемкий и является инвазивным способом, часто заканчивается образованием различных рубцовых изменений на местах среза кожи;
в-третьих, она не всегда может быть использована для ранней диагностики.
Поэтому, нами был разработан способ использования метода ИК спектроскопии, позволяющий исследуя со-скобы элементов кожи (чешуйки), ставить диагноз на ранней стадии проявления очагов болезни и без вторжения в организм пациента.
Целью изобретения является ранняя диагностика псориаза на молекулярном уровне, не ожидая появлении элементов - папулы на поверхности кожи и отказ от вторжения в организм пациента. Предлагаемый способ не требует химреактивов, более прост, быстро и достоверно можно установить диагноз.
Поставленная цель достигается следующим образом. При осмотре пациентов проводится исследование феномена «стеаринового пятна», т.е. проводится поскабливание поверхности кожи в местах очага, в результате чего полу-чается мелкоотрубевидное шелушение рогового слоя, которое собирается в очень незначительном количестве. Собранные таким способом элементы кожи, являются объектом для исследования методом ИК спектроскопии.
Для регистрации ИК спектров взвешиваются 0,005÷0,008 г (5,0÷8,0) мг собранные выше описанным методом элементы кожи и размельчаются в агатовой ступке в виде порошка. Полученный порошок смешивается с 0,7 г (700 мг) также размельченного в порошок, спектрально чистого монокристалла КВг, и прессуется в специальной пресс-форме, подключенный с вакуумным насосом, для получения таблетки. Затем регистрируется ИК спектры полу-ченной таблетки в диапазоне частот 4000 - 2200 см -1. Время подготовки проб занимает около 20 - 25 мин, записи спектра 10 - 15 мин. Общее время для диагностик, около 40 мин.
Для установления диагноза, полученные ИК спектры соскоба чешуйки впервые обратившихся пациентов, со-поставляются с ИК спектром эталонного образца. В качестве эталонного образца используются соскобы чешуйки собранные у больных пациентов, состоявших на учете у врача дерматолога, которым известными в клинической практике достоверно установлены диагноз псориаза. Записываются также ИК спектры чешуйки данной группы больных выше описанным методом, которые служат эталонным спектром.
На фигуре приведены ИК спектры эталона (кривая 1), больных пациентов впервые обратившихся, с узелко-вым высыпанием на коже (кривая 2) и для сравнения, спектры чешуйки при себорейном дерматите (кривая 3). Как видно в приведенной фиг, (кривая 1), эталонному ИК спектру псориатических чешуек характерна широкая и ин-тенсивная полоса поглощения с частотой максимумом (νmах) при 3280 см -1, на низкочастотном крыле которой проявляется слабая структурная триплетная полоса поглощения с νmах при 2910 см -1. Аналогичные полосы харак-терны и спектрам чешуйки, впервые обратившим больным (кривые 2). Для удобства сопоставления все спектры нормированы по площади.
Пример 1. Пациентка А, болеет в течение 6 месяцев, впервые обратилась к дерматологам с первичным узелко-вым высыпанием на коже. Были собраны чешуйки и записаны ИК спектры, фиг, (кривая 2). Полученные ИК спек-тры показывают, что пики характеристических полос совпадают с пиками спектра эталона. Диагноз, распростра-ненная форма вульгарный псориаз, «весенняя форма», последующие наблюдения подтвердили диагноз.
Пример 2. Пациент Б, впервые обратился к дерматологам с жалобами на наличие единичных пятнистых вы-сыпаний на коже волосистой части головы, сопровождающиеся зудом. Традиционным методами не удалось уста-новить точный диагноз. Были собраны чешуйки и записаны ИК спектры по вышеописанному способу. Получен-ные ИК спектры сопоставлены со спектром эталона, полосы поглощения абсолютно идентичны. Выставлен диа-гноз ограниченная форма псориаза волосистой части головы. Последующие наблюдения подтвердили правиль-ность диагноза.
Пример 3. Пациентка С, впервые обратилась к дерматологам с жалобами высыпания на коже волосистой ча-сти головы и груди, зуд, при осмотре заметны пятна, инфильтрация, отрубевидное шелушение и единичные че-шуйки - корки. Известным лабораторным методом не удалось точно установить диагноз. Были собраны элементы кожи и записаны ИК спектры, вышеописанным способом, полученные спектры не совпали со спектром эталона. Назначается пробное лечение, пациентка находится под наблюдением врача, диагноз - себорейный дерматит, фиг, (кривая 3).
Были проведены анализы соскоба псоариатической чешуйки более 45 пациентов, впервые обратившиеся к дерматологам, с первичным признаками, высыпаниями и зудом на разных участках кожи. Были собраны чешуйки и записаны ИК спектры вышеописанным методом. В 32 случаях, полученные ИК спектры совпадали со спектром эталона, т. е. диагностировался псориаз, последующие наблюдение подтвердили правильность диагноза.
Таким образом, предлагаемый способ анализа элементов кожи (чешуйки) больных методом ИК спектроскопии, в диапазоне частот 4000 - 2200 см -1 и их сопоставления с ИК спектром эталона, при их совпадении устанавливается диагноз псориаза, определяется критерий «новизна», которые до настоящего времени не использовался в медицинской практике. Преимущество предлагаемого способа, от известных способов диагноза псориаза состоит в том, что он технически более прост, неинвазивный, точный, более экономичный, эффективный для ранней диа-гностики и быстрый. С момента сбора чешуйки, записи спектра и установления диагноза требуется около 40 мин.
(56) Документы, цитированные в отчёте
1. Псориаз. Под ред. С.И. Довжанского. Из-во Саратовского ун-та, 1976, с. 195-198.
2. RU 2233122 С1 (Московский областной научно- исследовательский иститут), 27.07.2004 ф-ла.
3.RU 2187116 С2 (Нижегородский научно-исследовательский кожно-венерологический институт), 10.08.2002 ф-ла.
4. Гончаренко М.С. и др. Дифференцировка, электростимулируемая подвижность ядер и ультраструктура клеток в соскобах буккального эпителия в норме и при псориазе. Архив патологии, 1992, Москва, «Медицина». т.54, №9, с. 29-33.
5. Wohlrab J et al, Noninvasive characterization of human stratum corneum of undiseаsed skin of patients with atopic dermatitis and psoriasis as studied by Fourier transform Raman spectroscopy. Biopolymers, 2001, 62/3, p/141, PMID: 11343282, реф., (он-лайн).
2. RU 2233122 С1 (Московский областной научно- исследовательский иститут), 27.07.2004 ф-ла.
3.RU 2187116 С2 (Нижегородский научно-исследовательский кожно-венерологический институт), 10.08.2002 ф-ла.
4. Гончаренко М.С. и др. Дифференцировка, электростимулируемая подвижность ядер и ультраструктура клеток в соскобах буккального эпителия в норме и при псориазе. Архив патологии, 1992, Москва, «Медицина». т.54, №9, с. 29-33.
5. Wohlrab J et al, Noninvasive characterization of human stratum corneum of undiseаsed skin of patients with atopic dermatitis and psoriasis as studied by Fourier transform Raman spectroscopy. Biopolymers, 2001, 62/3, p/141, PMID: 11343282, реф., (он-лайн).
📎 Прикреплённые файлы
-
435 .pdf⬇ Скачать