Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии и может быть использовано для профилактики бруцеллеза животных.
Способ включает выращивание бактериальной массы на твердой питательной среде, которую отмывают от балластных веществ физиологическим раствором. Дважды проводят центрифугирование при 6 тыс. об/мин в течение 30 мин, осуществляют ресуспендирование дистиллированной водой и смешивание клеточной суспензии с 0,1 н. уксусной кислоты. Затем выдерживают при комнатной температуре. Полученную взвесь промывают дистиллированной водой, центрифугируют при 6 тыс. об/мин в течение 30 мини осаждают этиловым спиртом.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ БРУЦЕЛЛЕЗА
(51) МПК: A61K 39/10
Сведения о документе ▾
- (11) Номер документа
- 686
- (13) Код типа документа
- PP
- (51) МПК
- A61K 39/10
- (45) Дата публикации
- 30.03.2015
- Статус
- Прекратил действие
Заявка ▾
- (21) Рег. номер заявки
- 1500922
- (22) Дата подачи заявки
- 10.03.2015
Лица ▾
- (71) Заявитель(и)
- Муминов А. (TJ); Саттори И. (TJ); Маҳмудов К.Б. (TJ); Сулаймон Х.Н. (TJ); Сатторов Г.М. (TJ); Кашкулоев М.Ш. (TJ).
- (72) Автор(ы)
- Муминов А. (TJ); Саттори И. (TJ); Маҳмудов К.Б. (TJ); Сулаймон Х.Н. (TJ); Сатторов Г.М. (TJ); Кашкулоев М.Ш. (TJ).
- (73) Патентообладатель(и)
- Муминов А. (TJ); Саттори И. (TJ); Маҳмудов К.Б. (TJ); Сулаймон Х.Н. (TJ); Сатторов Г.М. (TJ); Кашкулоев М.Ш. (TJ).
Реферат
Формула изобретения
Способ получения вакцины для профилактики бруцеллеза, включающий выращивание бактериальной массы на твердой питательной среде, которую отмывают от балластных веществ физиологическим раствором, центрифугирование при 6 тыс. об/мин в течение 30 мин, ресуспендирование дистиллированной водой в соотношении 1:5, под-готовку гидролизата и смешивание с нимполученной клеточной суспензии, выдерживание при температуре 2-6°С, промывание полученной взвеси дистиллированной водой и центрифугирование при 6 тыс. об/мин в течение 30 мин, отличающийся тем, что после отмывания бактериальной массы от балластных веществ центрифугирование проводят дважды при 6 тыс. об/мин в течение 30 мин, в качестве гидролизата используют 0,1 н. р-р уксусной кислоты, с которой смешивают полученную клеточную суспензию, выдерживают при комнатной температуре и полученную взвесь после центрифугирования осаждают этиловым спиртом.
Описание
Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии и может быть использованодля профилактикибруцеллеза животных.
В настоящее время для профилактики бруцеллеза животных широко применяют живые вакцины из штаммов В.abortus 19 и В.abortus 82.
Однако использование живых вакцин является опасным из-за длительного бактерионосительства, возможности проявления остаточной вирулентности у иммунодефицитных и ослаб-ленных особей, а также у взрослых животных, не вакцинированных в раннем возрасте. Неоднократное применение живых вакцин способствует развитию патоморфологических изменений.
В качестве прототипа принят способ получения протективного антигенного комплекса бруцелл(патент Российской Федерации № 2398597).Способ предусматривает выращивание бактериальной массы на твердой питатель-ной среде, которую отмывают от балластных веществ физиологическим раствором и центрифугируют при 6 тыс.об./мин в течение 30 мин. После чего бактериальную массу ресуспендируют дистиллированной водой в соотношении 1:5. Подготавливают раствор для проведения гидролиза (содержащий щелочь и поликатион). Полученную клеточную суспензию смешивают с подготовленным раствором, выдерживают при температуре 2-6°С.Затемполученную взвесь промывают дистиллированной водой и центрифугируют при 6 тыс. оборотов в течение 30 мин.
Указанный способ имеет ряд недостатков, к числу которых относитсяиспользование химического вещества (поли-N,N-диметил-N-N-диаллиламония хлорид), которая может разрушать белковые полисахариды. Кроме того одно-кратное центрифугирование не позволяет достаточно разделять смесь на составные части и полностью отделять балластные вещества.
Целью является разработка способа приготовления более эффективной вакцины для про-филактики бруцеллеза.
Способ осуществляется следующим образом. На твердой питательной среде выращивают бактериальную массу, которую отмывают от балластных веществ физиологическим раствором и дважды центрифугируют при 6 тыс.об/мин в течение 30 мин. После чего бактериальную массу ресуспендируют дистиллированной водой в соотношении 1:5. Для проведения гидролиза подготавливают 0,1 н. уксусной кислоты. Полученную клеточную суспензию смешивают с 0,1 н. уксусной кислоты, выдерживают при комнат-ной температуре. Затем полученную взвесь промывают дистиллированной водой, центрифугируют при 6 тыс. оборотов в течение 30 мин с последующим осаждением этиловым спиртом.
ПРИМЕР. Профилактическую эффективность изготовленной вакцины изучали на молодняке крупного рогатого скота. Опытных животных сформировав их на 3 группы телят в возрасте 3-5 мес. по 5 голов в каждой группе. Полученную вакцину из протективного антигена рас-творили в 20 млстерильногофизиологического раствора, которую вводили однократно внутримышечно 1группе, 2 группе– подкожно, а контрольным животным 3 группы - физиологический раствор.
Установлено, что введение вакцины из протективного антигена вызывает незначительные-местные и общие реакции, которые исчезли че-рез 1,5-2 суток.
Таким образом, использование в заявленном способе вакцины способствует созданию защиты от бруцеллеза на уровне коммерческих вакцин.
В настоящее время для профилактики бруцеллеза животных широко применяют живые вакцины из штаммов В.abortus 19 и В.abortus 82.
Однако использование живых вакцин является опасным из-за длительного бактерионосительства, возможности проявления остаточной вирулентности у иммунодефицитных и ослаб-ленных особей, а также у взрослых животных, не вакцинированных в раннем возрасте. Неоднократное применение живых вакцин способствует развитию патоморфологических изменений.
В качестве прототипа принят способ получения протективного антигенного комплекса бруцелл(патент Российской Федерации № 2398597).Способ предусматривает выращивание бактериальной массы на твердой питатель-ной среде, которую отмывают от балластных веществ физиологическим раствором и центрифугируют при 6 тыс.об./мин в течение 30 мин. После чего бактериальную массу ресуспендируют дистиллированной водой в соотношении 1:5. Подготавливают раствор для проведения гидролиза (содержащий щелочь и поликатион). Полученную клеточную суспензию смешивают с подготовленным раствором, выдерживают при температуре 2-6°С.Затемполученную взвесь промывают дистиллированной водой и центрифугируют при 6 тыс. оборотов в течение 30 мин.
Указанный способ имеет ряд недостатков, к числу которых относитсяиспользование химического вещества (поли-N,N-диметил-N-N-диаллиламония хлорид), которая может разрушать белковые полисахариды. Кроме того одно-кратное центрифугирование не позволяет достаточно разделять смесь на составные части и полностью отделять балластные вещества.
Целью является разработка способа приготовления более эффективной вакцины для про-филактики бруцеллеза.
Способ осуществляется следующим образом. На твердой питательной среде выращивают бактериальную массу, которую отмывают от балластных веществ физиологическим раствором и дважды центрифугируют при 6 тыс.об/мин в течение 30 мин. После чего бактериальную массу ресуспендируют дистиллированной водой в соотношении 1:5. Для проведения гидролиза подготавливают 0,1 н. уксусной кислоты. Полученную клеточную суспензию смешивают с 0,1 н. уксусной кислоты, выдерживают при комнат-ной температуре. Затем полученную взвесь промывают дистиллированной водой, центрифугируют при 6 тыс. оборотов в течение 30 мин с последующим осаждением этиловым спиртом.
ПРИМЕР. Профилактическую эффективность изготовленной вакцины изучали на молодняке крупного рогатого скота. Опытных животных сформировав их на 3 группы телят в возрасте 3-5 мес. по 5 голов в каждой группе. Полученную вакцину из протективного антигена рас-творили в 20 млстерильногофизиологического раствора, которую вводили однократно внутримышечно 1группе, 2 группе– подкожно, а контрольным животным 3 группы - физиологический раствор.
Установлено, что введение вакцины из протективного антигена вызывает незначительные-местные и общие реакции, которые исчезли че-рез 1,5-2 суток.
Таким образом, использование в заявленном способе вакцины способствует созданию защиты от бруцеллеза на уровне коммерческих вакцин.
(56) Документы, цитированные в отчёте
1.Патент РФ № 2398697
2. Мирзоев Д.М. Балышев В.М., Назаров С.К., Каримов Б., Тураев Р.А., Мирзоев Д.М., Способ изготовления вирусвакцины оспы коз. Малый па-тент TJ 189.
3. Турдиев Ш.А., Сатторов И.Т., Муминов А.М., Идиев К.У. Комплексная иммунизация овец против бруцеллёза, сальмонеллёза и пастереллёза. Ма-лый патент TJ 50
4. Мирзоев Д.М., Каримов Б., Назаров С.К., Спо-соб изготовления бивалентной гидроокисьалюми-ниевой формолвакцины из местных штаммов па-стереллы для мелкого рогатого скота. Малый патент TJ 55
5. Бадалов Э.Т. Способ получения вакцины против тейлериоза. Патент РТ TJ 307
6. Муминов А., Шодмонов И., Мухаммади А. Спо-соб получения гидроокисьалюминиевой вакцины для профилактики ценуроза овец. Патент РТ TJ 408
7. Махмудов К.Б., Саттори И., Ахмедджанова Л. Способ приготовления ассоциированной вакцины для профилактики сальмонеллёза и пастереллёза сельскохозяйственных животных. Малый патент TJ 677
2. Мирзоев Д.М. Балышев В.М., Назаров С.К., Каримов Б., Тураев Р.А., Мирзоев Д.М., Способ изготовления вирусвакцины оспы коз. Малый па-тент TJ 189.
3. Турдиев Ш.А., Сатторов И.Т., Муминов А.М., Идиев К.У. Комплексная иммунизация овец против бруцеллёза, сальмонеллёза и пастереллёза. Ма-лый патент TJ 50
4. Мирзоев Д.М., Каримов Б., Назаров С.К., Спо-соб изготовления бивалентной гидроокисьалюми-ниевой формолвакцины из местных штаммов па-стереллы для мелкого рогатого скота. Малый патент TJ 55
5. Бадалов Э.Т. Способ получения вакцины против тейлериоза. Патент РТ TJ 307
6. Муминов А., Шодмонов И., Мухаммади А. Спо-соб получения гидроокисьалюминиевой вакцины для профилактики ценуроза овец. Патент РТ TJ 408
7. Махмудов К.Б., Саттори И., Ахмедджанова Л. Способ приготовления ассоциированной вакцины для профилактики сальмонеллёза и пастереллёза сельскохозяйственных животных. Малый патент TJ 677
📎 Прикреплённые файлы
-
М.пат. 686.pdf⬇ Скачать