СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МАКРОЦИКЛИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ

Использование в сельском хозяйстве в качестве нематодов для лечения животных и людей, пораженных эндопаразитарной и/или грибковой инфекцией и в качество пе-стицида. Сущность изобретения продукт – макроциклические соединения формулы I приведенной в описании, где R1=СН3,С2Н5 или изо- С3Н7, R2 и R3 = Н, ОR4 = ОН, ОСН3, С1-С6= алканоилоксигруппа, необязательно замещенная феноксигруппой или -ОСООR5, где R5 –С1-С6- алкил. Реагент 1: соединение формулы 1, где R2 и R3 вместе образуют L-группу, где L = R” ОСОSО-группа, где R”-(С1–С6)=алкил) фенил или фе-нил, ОR4 =ОН. Реагент 2: оловогидроалкил, как например трет -n-бутилоловогидрида. Условия реакции: в присутствии инициатора радикалов, как например, азобисизобу-тиронитрила, или под действием света, и полученное соединение формулы I, где ОR4 = ОСН3 или С1–С6 -алканоилоксигруппа, необязательно замещенная феноксигруппой, и в случае необходимости переводят его в соединение формулы I, где ОR4 -ОН, кото-рое в случае необходимости действием галоидангидрида кислоты переводят в соеди-нение формулы I, где ОR4 = ОСООR5 группа. Соединение формулы I в дозе 10 мг/кг уменьшает количество глистов на 80%. 2 табл.

Изобретение относится к способу получения новых соединений антибиотика.
Известно получение антибиотиков S541, которые можно выделит из продуктов ферментации вида Streptomyces. Антибиотики S541 представляют собой группу род-ственных соединений, имеющих неполную формулу I



Итак, была выявлена дополнительная группа соединений, обладающих антибио-тической активностью, которые можно получить посредством химической модифика-ции антибиотиков S541 или путем выделения их из культуры микроорганизмов рода Streptomyces.
Новые соединения предлагаемого способа обладают антибиотической активно-стью и/или применяются как промежуточные продукты при получении других актив-ных соединений и/или при выделении или очистке соединений антибиотиков S541.
Соединения данного изобретения представляют собой 23-деокси 23-гидроксил или замещенные гидроксильные аналоги антибиотиков S541, которые имеют гидрок-сильную или замещенную гидроксильную группу в положении 5.
Таким образом, данным изобретением предлагается, в частности, соединения формулы II



где R1 - метильная, этильная или изопропильная группа.
R2 и R3 - атом водорода.
ОR4 - гидроксильная группа, метокси, алканоилокси-группа, имеющая С1 – С6 –алкильный фрагмент, необязательно замещенный фенокси-группой или группу ОСООR5, где R5- С1–С6-алкил.
Как указывалось ранее, соединения предлагаемого изобретения могут приме-няться в качестве антибиотиков и/или как промежуточные соединения для получения других активных соединений и/или при выделении и очистке соединений антибиоти-ков S541. В том случая, когда предлагаемые соединения приходится использовать как полупродукты, R2 и/или –ОR2 могут быть защищенными гидроксильными группами. Ясно, что такая группа должна иметь минимальное количество дополнительных функциональных групп, чтобы избежать дополнительных реакционных цепей и долж-на бить такого, чтобы стало возможным избирательно восстанавливать из нее гидрок-сильную группу. Примеры защитных гидроксильных групп известны и описаны.
Заявленные соединения обладают антибиотической активностью, например ан-тигельминтной активностью, например против нематодов, и в частности антиэндопа-разитарной и антиэктопаразитарной активностью.
Эктопаразиты и эндопаразиты заражают людей и целый ряд животных, и особен-но имеют широкое распространение среди сельскохозяйственных животных, таких как свинец, овец, крупного рогатого скота, коз и домашней птицы, лошадей, и домаш-них животных, например собак и кошек. Паразитарная инфекция домашнего скота, приводящая к анемии, недостаточности питания и потери веса, является основной причиной экономических потерь во всем мире.
К представителям эндопаразитов, заражающих указанных животных и/или лю-дей относятся Ancylostoma, Ascarida, Ascaris, Aspicularis, Brugia, Bunostomum, Capil-laria, Chabertia, Cooperia, Dictyocaulus, Dirofilaria, Dracunculus, Enterobius, Haemon-chus, Heterahis, Loa, Necator, Nematodirus, Nematospiroides (Heligopmoroides), Nip-postronqylus, Oesophagostomum, Onchaceroa, Ostertagia, Oxyuris, Parascaris, Stronqylus, Stronqyloides, Syphacia, Toxascaris, Toxocara, Irichonema, Irichostrongylus, Irichinella, Irichuris, Uncinaria и Wucharecia.
Примерами эктопаразитов, заражающих животных и/или людей, являются чле-нистоногие эктопаразиты, например жалящие насекомы, падальная мух, блохи, вши, клещи, сосущие насекомые, искодовые клещи и другие двукрылые насекомые-вредители.
К примерами такого рода эктопаразитов, заражающих животных и/или людей, относятся Ambylomma, Boophilus, Chorioptes, Culliphore, Demodex, Haematobia, Nae-matopinus, Naemophysalis, Hyalomma, Hyperderma, Ixodes, Linognathus, Lucilia, Melophagus, Oestrus, Otobius, Otodectes, Psoregates, Psoroptes, Rhipicephalus, Sarcoptes, Stomoxys и Tabanus.
Обнаружено, что предлагаемые соединения эффективно действует как in vivo, так и in vivo против широкого ряда эндопаразитов и эктопаразитов. В частности, об-наружено, что соединения настоящего изобретения активно действует против немато-дов таких как Haemonchus contortus, Ostertagia cieumeineta, Irichostrongylus colu-biformis, Dictyocaulus, viviparis, Cooperia, oncophera, Ostertagia, ostertagia, Nemato-spitoides dubius и Nippostrongylus braziliensis и паразитарных клещей, как например Sarcoptes и Psoroptessp.
Таким образом, предлагаемые соединения находят применение при лечении жи-вотных и людей с эндопаразитарной и/или экзопаразитарной инфекциями.
Виды паразитов меняются в соответствии с хозяином (животным) и доминирую-щим местонахождением инфекции. Следовательно, например, возбудители Haemon-chus contortus, Ostertagia circumcineta и Trichostrongylus culubi Pormis обычно пора-жают овец и преимущественно локализуются в желудке и тонкой кишке, в то время как Dictyocaulus viviparous, Cooperia oncophora и Ostertagia ostertagi обычно поража-ют крупный рогатый скот и локализованы, главным образом в легким, кишечнике или желудке, соответственно.
Антибиотическая активность предлагаемых соединений может быть продемон-стрирована, например, своей активностью in vitro против свободно живущих немато-дов, например Caenerhabiditis elegans.
Кроме того, заявленные соединения имеют применение в качестве противогриб-ковых веществ, например, против штаммов Candida, как например Candida albicans и Candida glabrata и против дрожжей, таких как Saceharomyces carlsbegensis.
Соединения предлагаемого способа, кроме того, могут найти применение в борьбе с вредителями-насекомыми, клещами и нематодами в сельском хозяйстве, са-доводстве, лесоводстве, здравоохранении и хранении продуктов. Ими можно успешно обрабатывать вредителей почвы и сельскохозяйственных культур, включая хлебные злаки, например пшеницу, ячмень, маис, рис, овощи, например сою, фрукты, напри-мер яблоки, виноград и цитрусовые, наряду с корнеплодами. Например сахарную свеклу, картофель. Характерными примерами таких вредителей являются фруктовые клещи и тля, например Aphisfabae, Nulacorthum circumflexum, Myzus Nersicae, Nepho-teltix cineticeps, nilparvata Lugens, Panomychus ulmi, Phorodon humuli, Phyliocoptruta oleivora, Tetranychys urticae и представители рода Trialeuroides; нематоды, например представители рода Aphelencoides, Globodera, Heterodeta, Meloidogyne и Panagellus; чешуйчатые, например Heliothis, Plutella и Spodoptera; долгоносик- каландрина, например Anthonomus grandis и Sitophilus granaries: хрущаки мучные, например Tri-bolium castaneum мухи, например Musca olomestica: муравьи Рихтера: моли-минеры узкокрылые; Pearpsilla; трипсы табачные; таракановые, например Blatella germanica и Periplaneta москитные, например Aedes aegypti.
В соответствии с изобретением предложены соединения формулы II, которые могут быть использованы в качестве антибиотика. В частности, их можно использо-вать при лечении животных и людей, пораженных эндопаразитарной, энтопаразитар-ной и/или грибковой инфекциями, и в качестве пестицидов для борьбы с вредителями-насекомыми, клещами и нематодами в сельском хозяйстве, садоводстве, или лесном хозяйстве. Их можно применять, кроме того, обычно в качестве пестицидов в других обстоятельствах, например в хранилищах, зданиях или других общественных вреди-телей. По существу предлагаемые соединения могут быть применены либо к хозяину (животному или человеку), либо к культурным растениям или другой растительности, либо к самим вредителям или месту их расположения.
Заявленные соединения могут быть изготовлены для приема в любой удобной форме при использовании в ветеринарии или практической медицине. Таким образом, изобретение содержит в пределах своего объема фармацевтические композиции, со-держащие соединение согласно заявленному способу, пригодное для применения в ветеринарии или терапии. Такие композиции могут быть представлены при использо-вании в традиционной форме с помощью одного или нескольких подходящих носите-лей или наполнителей. Предлагаемые композиции содержат составы в форме, осо-бенно пригодной для парентерального (в том числе, введение внутрь молочной желе-зы), орального, ректального, местного применения в виде имплантанта, для примене-ния при глазных, ушных или заболеваниях мочеполовой системы. Подходящими спо-собами и агентами для приготовления состава соединений данного изобретения, при-годного для использования в ветеринарии или терапии, являются известные способы для соединений антибиотиков S541.
Заявленные соединения можно применять в комбинации с другими фармацевти-ческие активными ингредиентами.
Суммарная суточная доза предлагаемых соединений, применяемая как в ветери-нарии, так и в терапии, будет соответственно в интервале 1-2000 мг/кг веса тела, предпочтительно 50-1000 мг/кг, причем указанные дозировки можно принимать в дробных дозах, например 1-4 раза в день.
Заявленные соединения можно составлять в любой удобной форме, пригодной для земледелия или садоводство. Таким образом, изобретение включает в пределах своего объема составы, содержащие соединение, предназначенное для применения в земле или садоводство. Такие рецептуры включают сухие или жидкие формы, напри-мер дусты, включая пылевидные субстраты или концентраты, порошки, в том числе растворимые или смачиваемые порошки, гранулы, включая микрогранулы и диспер-гируемые гранулы, таблетки, текучие вещества, эмульсии, например разбавленные эмульсии или эмульгируемые концентраты, пропиточные составы, например составы для пропитки корней и семян, протравливатели семян, семенные гранулы, масляные концентраты, масляные растворы, инъекции, например, инъекции в ствол, растворы для опрыскивания, дымы и туманы.
Подходящие способы и агенты для составления рецептуры предлагаемых соеди-нений для применения в садоводстве или земледелии включают известные для анти-биотиков S541.
При составлении рецептуры концентрация активного вещество обычно составля-ет 0,01-99 мас.% и более предпочтительно 0,01-40 мас.%.
Промышленные (товарные) продукты обычно приготовлены в виде концентриро-ванных композиций, которые при использовании разбавляют до требуемой концен-трации, например 0,001-0,0001 мас.%.
При использовании в ветеринарии или в садоводстве и земледелии, и в случае, когда предлагаемые соединения являются продуктами, образуемыми посредством ферментации, желательно использовать весь бродильный бульон в качестве источни-ка активных соединений. Кроме того, может быть пригодным использованием обез-воженного бульона (содержащего мицелий) или мицелия, отделенного из бульона и пастеризованного, или более предпочтительно высушенного. При желании, указан-ный бульон или мицелий может быть изготовлен в композициях, как указывалось вы-ше, включающих традиционные инертные носители, наполнители или разбавители.
Антибиотические соединения предлагаемого изобретения могут вводиться и применяться в комбинации с другими активными ингредиентами.
В частности, предлагаемые соединения антибиотика могут использоваться вме-сте с соединениями антибиотиков S541 или с другими антибиотическими соединени-ями данного изобретения. Это может возникнуть, например, в случае, когда неочи-щенные продукты брожения взаимодействует согласно предлагаемому способу без предшествующего или последующего отделения, указанное может быть предпочти-тельным, например при использовании соединений в земледелии, где важно обеспе-чить (сохранить) низкую себестоимость продукции.
Активность против Nematospirorides dublus.
Была определена действенность соединений данного изобретения против Me-matospiroides dubius, которым инфицировали мышей. Самку мыши CR/H (18-22 г) за-разили личинками 100 L 3 larvaed N.dubius и инфекции дали развиться полностью (обычно 3 недели). Затем мышь обработали путем единоразового стоматического приема предлагаемого соединения в дозировке 3/4 титрованной дозы. Соединение вводили в пропилен гликоле. Затем мышь выдержали по крайней мере 3 дня (обычно 5 дней) для того, чтобы убить инфекцию в месте ее развития, и тонкую кишку удали-ли. Вырезанную часть кишки разрезали ножницами с тупыми концами для того, чтобы освободить от кишечной слизи. Зрелы глисты собрали посредством модифицирован-ного аппарата Baarmanna. Время миграции составляло 5 ч и в течение этого периода мигрирующие глисты были при поддерживающей температуре 370С. Спустя 5 ч нейлоновую сетку, через которую мигрировали глисты, проверили с помощью лупы, с увеличением в 2 раза. Глисты собранные на сетке и мигрировавшие, подсчитали для получения общего количества глистов для каждой мыши и сравнили с контрольной группой.
Следуя этой методике, было найдено, что при предлагаемых соединений 10 мг/кг общее количестве глистов для обработанной мыши значительно уменьшилось. Например, соединение примера 3 привело к уменьшению глистов в процентном от-ношении обработанных мышек к контрольным более чем на 80%.
Активность против многообразия экто- и эндопаразитов для различных видов животных.
Единственная доза (800 мг/кг) соединения примера 3 принятая внутривенно или введенная подкожно, полностью устраняла глисты у телят, зараженных глистов Cooperia oncophera. В течение 5-дневной обработки кроликов, зараженных личинками Rhipicephalus appendiculolus с помощью соединения примера 3 эти личинки уничто-жались на 97%.
Продукт примера 3 проявил абсолютную эффективность, когда его стоматически в дозе 200 мг/кг ввели лошадям, инфицированным Parascaris.
Продукт примера 3 был эффективен так же, как ивермектин, когда его вводили стоматически с дозой 200 мг/кг против личинок и вызревших Namatodirus bottus и взрослых Ostertggia circumcincta, Irichostrongylus axci. Haetmohchus contortus, Nema-todirus spathiger, Cooperia curticel и Trichostrohgylus vitrinus.
Продукт примера 3 был абсолютно эффективен, когда его вводили в дозе 150 мг/кг, инфицированным Toxocara.
Соединение примера 3 введенное подкожно, проявило эффективность на более чем 98% против Oesophagostomum, которым были заражены свиньи.
Оценка действия 23-Дезокси Фактора А (пример 3) на инсектицидную актив-ность.
Все концентрации, которые здесь приведены, даны по отношению к активным ин-гредиентам. Опытные растворы были приготовлены путем растворения активного ин-гредиента в 35%-ном растворе ацетона с водой в концентрации 1000 ч на миллион, затем разбавлены водой, если это необходимо.
Tetranychus urticae (Р, прямое сопротивление) 2-обозначенным паукообразным клещом.
Были отобраны саженцы бобовых растений, их срезали так, что в каждом горшке осталось по одному растению. От листочка, выбранного из всей группы растений от-резали маленький кусочек и поместили на каждый листок испытуемого растения. Это сделали за два часа до обработки, чтобы позволить клещам передвигаться к испыты-ваемым растениям и откладывать на них яйца. Размер срезанного кусочка изменяется, чтобы получить около 100 клещей на лист. Во время обработки кусочек листа, ис-пользуемого для переноса клещей, удаляется и выбрасывается. Небольшая доля за-раженных растений погружается в опытный раствор на 3 с с перемешиванием и вы-держивается под колпачком для высушивания. Растения выдерживают в течение 2 дней, прежде чем делают оценку количества уничтоженных зрелых паразитов, ис-пользуя для контроля первый листок. Второй листок выдерживают на растении другие 5 дней, прежде чем делают наблюдения за погибшими яйцами и/или вновь появивши-мися личинками насекомых.
Empoasca abrupta, зрелые блошки на листьях картофеля. Листочек бобового рас-тения, лимфской фасоли длиной 5 см, окунули в опытный раствор на 3 с при переме-шивании и поместили под колпачком, чтобы высушить. Листок поместили в чашку Петри 10х10мм, содержащую на дне влажную фильтровальную бумагу. В каждую чашку поместили около 10 зрелых лиственных блошек и провели обработку в течение 3 дней прежде, чем сделали подсчет погибших насекомых.
Heliothis virescens. Семядоли хлопка окунули в опытный раствор и высушили под колпачком. После сушки каждую из них разрезали на четвертинки и десять частей поместили отдельно в медицинские пластмассовые чашки объемом 30 мл, содержа-щие кусочки влажных зубоврачебных тампонов длиной 5-7 мм. Одну третью часть гусениц внесли в каждую чашку и покрыли картонным колпаком. Обработку прово-дили в течение 3 дней, после этого подсчитали число погибших и уменьшение порций повреждений.
Шкала оценки
0 – Нет эффект
1 – 10-25% погибших
2 – 26-35% погибших
3 – 36-45% погибших
4 – 46-55% погибших
5 – 56-86% погибших
6 - 66-75% погибших
7 – 76-85% погибших
8 – 86-99% погибших
9 – 100% погибших
Результаты сведены в табл. 1.
В соответствии с предлагаемым способом соединение формулы II может быть получено восстановлением соединения формулы IV.



где R1 и -OR4 имеют указанные значения кроме OR4 – гидроксигруппы; L - группа R1 OCSO, где R’’-(C1-C5-алкил) фенил или фенил, с помощью регенерирующего агента, такого как оловогидридалкил (например, три-н-бутилоловогидрида) в присутствии инициатора радикалов, например перекиси, азобисизобутиронитрила или под дей-ствием света.
Реакцию можно также проводить в соответствующем растворителем, который может быть выбран из группы кетона, например ацетона, простого эфира, например диоксана, углеводорода, например трихлорбензола; или сложного эфира, например этилацетата. Можно также использовать комбинации указанных растворителей либо самых, либо с водой.
Указанную реакцию можно проводить при температуре 0-2000С, предпочтитель-но в интервале 20-1300С.
Предлагаемый способ представлен следующими препаратами и примерами. Все температуры приведены при 00С.
Соединения обозначены со ссылкой на исток «Факторы», которые представляют собой перечисленные соединения формулы V и сведены в табл.2.



Фактори А, В, С, D, Е, F можно получить известным способом (см. патент ЮАР № 85/7049).
Пример 1. 5-феноксиацетокси-23-(4-метилфенокситиокарбонилокси). Фактор А.
5 – феноксиацетокси Фактор А (747 мг) в дихлорметане (10 мг) при 00С в атмо-сфере азота обрабатывают пиридином (0,81 мг) а затем 4-метилфенилхлортиоформатом (0,75 г) в дихлорметане (2 мл). Полученный темный раствор тщательно перемешивают в течение 15 минут при температуре 00С и затем в течение еще 22 ч без охлаждения. Полученную смесь выливают в холодную воду и соляной раствор (рассол) и экстрагируют простым эфиром. Соединившиеся слои про-стого эфира промывают водой и соляным раствором, высушивают и выпаривают. Остаток очищают хроматографией на колонке двуокиси кремния и препаративной жидкостной хроматографией с обратной фазой с получением данного соединения (430 мл),  (CCI3): 3,34 (м, 1Н), 3,58 (м 1Н), 3,97 (д 10, 1Н), 4,72 (с, 2Н), 5,4 (м, 1Н), 559 (д 6, 1Н), и 6,9 до 7,4 (м, 9Н), м/з включает 728, 616, 576, 466, 464, 448, 354, 297, 247, 219 и 151.
Пример 2. 5-феноксиацетокси-23-деокси Фактор А.
Соединение примера 2 (350 г) и азобисизобутиронитрила (25 мл) в сухом толуо-ле (20 мл) в атмосфере азота при температуре 1200С обработано по каплям раствором три-н-бутилоловогидрида (0,5 мл) в сухом толуоле (10 мл), раствор нагревают с об-ратным, холодильником в течение 90 мин., охлаждают и выпаривают. Остаток хрома-тографируют через двуокись кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (40:1) в качестве растворителя с выходом названого соединения (280 мг),  (CDCI3): 3,32 (м, 1Н), 3,42 (д 10, 1Н), 3,57 (м, 1Н), 4,71 (с, 2Н), 5,59 (д 6, 1Н) и 6,8-7,4 (м, 5Н), м/з содержит 730, 712, 578, 560, 468, 450, 356, 314, 299, 249, 248, 221 151.
Пример 3. 23-деокси, Фактор А.
Соединение примера 2 (240 мг) введено в насыщенный раствор аммония в мета-ноле (10 мл) при температуре -50С. Полученный раствор перемешивают при темпера-туре 0-100С в течение 2 ч перед его выпариванием до сухого состояния. Остаток хро-матографируют через двуокись кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (20:1) с получением данного соединения (180 мг),  (CDCI3); 3,27 (м, 1Н), 3,42 (д9, 1Н), 3,54 (м, 1Н), и 4,29 (mb 6,1H), м/з содержит 596, 578, 560, 468, 450, 356, 314, 299, 249, 248, 221 и 151.
Пример 4. 23-Деокси-Фактор А, 5-метилкарбонат (57 мг) []D20+1520(с 0,6, CНCI3)): макс (Et OH) 244,5 нм ( 28200), макс (Et OН) 244,5 нм ( 28200), макс (CHBr3)3530 и 3460 (ОН), 1740(карбонат) и 1707 см-1 (сложный эфир, (CDCI3) вклю-чает 5,55 (с, 1Н, 3,82 (с, 3Н), 3,42(д, I 10 Гц, 1Н) и 0,69 (д, I 4 Гц, 3Н), из 23- деокси-Фактора А (90мг) и метилхлорформата (0,3 мл 1М раствора в дихлорметане).
Пример 5. (1) 23-п—Толилокситиокарбонилокси Фактор В.
Фактор В (600 мг) растворили в сухом дихлорметане (5 мл), и к этому раствору добавили сухой пиридин (600 мг) и п-толилхлортионоформат (750 мг). Спустя 24 ч. при температуре окружающей среды смесь вылили в эфир и органический раствор довели до нейтральной среды. В колонку из силикателя (50г) загрузили тиокарбонат в дихлорметане, причем колонка работала в том же самом растворе. Элюирование ко-лонки смесью дихлорметан: фир (95:5) позволяло выделить основной компонент, ко-торый далее очищался препаративно обратимой фазой НР С. Данное соединение было выделено в виде безцветной пены (417 мн), []D23 +1600 (c 0,40, CHCI3)),  максEtoH 238 нм ( макс 35,900  макс(СНBr3) 3770, 3539 (ОН), 1705(эфир);  (CDCI3) 7,18 (д, 9 Гц. 2Н), 6,98,д, 9 Гц. 2Н), 5,49 (кв, 6Нц, 1Н), 4,02 (д, 5 Гц, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,31 (м, 1Н), 3,49(с, 3Н), 2,36, (с 3Н), 1,81 (с, 3Н), 1,68 (д, 6, 3Н), 1,61 (с, 3Н), 1,53 (с,3Н), 1,00 (д, 6, Гц, 3Н) и 0.82 (д, 7 Гц, 3Н), m/z = 7,48 (М+).
(2) 23+Деокси Фактор В.
Температура плавления 184–1860С. []D22+1580С (с 0,40, CHCI), 238,5(28,150) и 244,5нм (макс 30,650), 3450 (ОН) и 1705 см-1 (эфир),  (CDCI3) включая 4,01 (д, 6 Гц, 1Н), 3,95 (д, 6 Гц, 1Н), 3,49 (с, 3Н), 3,29 (м, 1Н), 1,80 (с, 3Н), 1,64(д, 6 Гц, 3Н), 1,58 (с. 3Н), 1,53(с, 3Н), 0,93(д, 7 Гц, 1Н) и 0,69(д, 6ГЦ, 3Н), m/z = 582 (М+) из соединения 1 (350мг) за исключением того, что остаток хроматографиро-вали, используя дихлорметан, затем следовала смесь дихлорметана и эфира(95,5) до получения названного соединения в виде кристаллического твердого вещества при растирании с н-пентаном (по способу примера 2).
Пример 6.(1) 5-Ацетокси Фактор С.
К раствору Фактора С (338 мг) в сухом пиридине (0,5 мл) добавили уксусный ан-гидрид (71 мг). Спустя 20 ч. при комнатной температуре смесь вылили в дихлорметан, а раствор обработали до получения нейтрального материала. Полученный таким об-разом сырой материал очищали с помощью хроматографии над К 60, с размером пор оксида кремния 230-400 меш (28г). Элюирование колонки раствором дихлорметана и эфира (1) привело к получению названного соединения (210мг), которое было выде-лено в виде твердого кристаллического вещество с температурой плавления 1350С. [] D23+1420(с, 0,64, CHCI3) 244,5 нм, (макс 31,250, макс (CHDr3) 3490 (ОН), 1718 (эфир) и 1730 (ацетокси):  (CDBr3) включая 4,03 (д, 6. 1Н), 3,79 (д, 10 Гц. 1Н), 3,54(д, 10Гц. 1Н), 3,31 (м, 1Н), 2,14(с, 3Н), 1,74(с, 3Н), 1,66(д, 7Гц. 3Н), 1,60(с, 3Н), 1,52(с, 3Н), 0,98 (д, 6 ГЦ. 3Н) и 0,78(д, 7Гц. 4Н) m/z = 626 (M+).
(2)5-Ацетокси 23-п-толилокситиокарбонилокси Фактор С (430мг), []D23+1330 (с, 0,48.CHBr3), 237,5(36,9000), 244 (36,900) И 273 нм ( 2,400), макс (CHBr3) 3500 (ОН), 1732 (ацетат) и 1710см-1 (эфир),  CDCI3: 7,17(д, 8Гц. 2Н), 6,99 (д, 8,0 Гц. 2Н), 4,04 (д, 6 Гц. 1Н), 3,98 (д, 10Гц. 1Н), 3,57 (м, 1Н), 3,31 (м, 1Н), 2,34 (с, 3Н), 2,14 (с, 3Н), 1,74 (с, 3Н), 1,66 (д, 6Н Гц. 3Н), 1,60 (с, 3Н), 1,52 (с, 3Н), 0,99 (д, 6Гц. 3Н) и 0,81 (д, 7Гц 3Н), m/z = 776(M+) из соединения 1 (500 мг) в виде бесцветной пены. (Способ по примеру 7(1)).
(3) 5-Ацетокси, 23-деокси Фактор С (256 мг) с температурой плавления 2300С (с разложением), []D23+147 (с 0,32, CHCI3); 238,5 (28000), 244,5 нм (макс 30300), макс (CHBr3) 3440 (ОН), 1730 (ацетокси) и 1710 см-1 (эфир),  (CDCI3) 4,05 (д, 5Гц. 1Н), 3,57 (м, 1Н), 3,33 (м, 1Н), 2,15 (с, 3Н), 1,75 (с, 3Н), 1,64 (6Гц. 3Н), 1,59 (с, 3Н), 1,53 (с, 3Н), 0,99 (д, 6Гц. 3Н) и 0,68 (д, 5Гц. 3Н), m/z =610(М+) из соединения 2 (385 мг) после кристаллизации из н-пентана (способ примера 23).
(4) 23-Деокси Фактор С (80мг) []D23+1040 (с,0,56, CHCI3); 245,5 нм (макс 28050); макс (CHBr3) 3540, 3450 (ОН), 1702 см-1(эфир), ( CDCI3); 4,28 (m. 6 Гц. 1Н), 3,95 (д. 6 Гц. 1Н), 3,57 (м. 1Н), 3,45 (д, 10 Гц. 1н), 3,26 (м, 1Н), 1,87 (с. 3Н), 1,65 (д, 7 Гц. 3Н), 1,59 (с. 3Н), 1,53 (с. 3Н), 0,99 (д, 6 Гц. 3Н) и 0,69 (слабо разрешенный дуплет, 5 Гц, 3Н), m/z =568(М+) из соединений 3 (125 мг) в виде бесцветной пены.
Пример 7. Фактор А 5-ацетат и 24-п-толилтионокарбонат.
Раствор Фактора А 5-ацетат (4,000 г) в сухом дихлорметане (50 мл) и сухом пи-ридине (4,9 мл) в токе азота обработали п-толилхлортионоформатом (3,7 мл) по кап-лям в течение 10 мин. Полученный темный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 45 ч. Раствор разбавили дихлорметаном (200 мл), промыли последовательно 2 н. соляной кислотой, насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным рассолом (2200 мл), затем высушили (сульфатом магния), в растворитель испарили и образовалась темно-зеленая пена. Ее вновь растворили в этилацетете (200 мл) и обработали активированным углем. После фильтрования и от-паривания растворителя получали бледно-зеленую пену, которую хроматографиро-вали на диоксиде кремния (Merck Kleselgel 60, с размером частиц 0,040-0,063 мм, размером пор 230-240 меш при атмосферном давлении, с элюированием смесью гек-сан-этилацетат (2:1) до получения названного соединения в виде бледно-желтой пены (3,946), макс (в этаноле) 245 нм ( 34200), макс CHBr3) 3620-3640 (ОН) 1731 (ацетат), 1710 см-1 (карбонил),  (CDCI3) 6,81 (д, 6 Гц. 3Н), 2,16(с, 3Н), 2,36 (с, 3Н), 3,34 (м, 1Н), 6,99(д, 9Гц. 2Н), 7,20(д, 9Гц. 2Н).
(2) 23-деокси_Фактор А 5-ацетат.
Раствор Фактора А 5-ацетат-п-толилтионокарбонат (10,194 г) в сухом толуоле (100мл) нагрели до кипения с обратным холодильником в токе азота и обработали -азо-бис-изобутиронитрилом (509мг). По каплям добавили раствор три-н-бутилтингидрида (10,25мл) в сухом толуоле (60мл) в течение 25 мин. Сохраняя при этом кипячение с обратным холодильником. Смесь перемешивали еще 25 мин. Затем охладили до комнатной температуры и растворитель испарили до получения желтого масло. Его растворили в ацетонитриле (600мл) и промыли гексаном. Растворитель испарили до получения белой пены, которую хроматографировали на диоксиде крем-ния (Merck Kleselpel 60, с размером частиц 0,040-0,063 мм и диаметром пор 230-400 меш), элюровали смесью гексан-этилоцетат (4:1) до получения названного соедине-ния (2,442 г), []D22 +1440 (с 0,43 хлороформ), макс (в этаноле) 245,5 нм ( 29650), макс (CHDr3) 3420-3340 (ОН), 1732 (1732 (ацетат), 1710 см-1 (карбонил),  (CDCI3) включает 0,68 (д. 5 Гц. 3Н), 2,16 (с, 3Н), 3,32 (м. 1Н).
Пример 8. (1) 5-Ацетокси Фактор D (923 мг) []D21 +1430 (с. 0.9. CHCI3) 239 (28700) и 245 нм (макс 31000), макс (CHBr3) 3490 (ОН) 1730 и 1710 (эфир),  (CDCI3) 0,81 (д. 7 Гц. 3Н), 0,99 (д. 7Гц. 3Н), 1,00 (м. 7 Гц. 3Н), 1,53 (с. 3Н), 1,59 (с. 3Н), 1,75 (с. 3Н), 2,16 (с. 3Н), 3,32 (м. 1Н), 3,65 (м. 1Н), 4,04 (д.6Гц 1Н), и 5,53 (м. 2Н). m/zx=640 (М+), из Фактора D (205 г) и уксусного ангидрида (0,47 мл).
(2) 23-п-толилокситиокарбонилокси Фактор D 5-Ацетит (610 мг), []D21 +1320 (с. 0,4.CHCI3) 238,5 (34800) и 244,5 нм (макс 35400), макс (CHBr3) 359 и 3560 (ОН) и 1730 см-1 (эфир)  0(CДCl3) 0,81 (д. 7 Гц. 3Н), 0,99 (д. 7 ГЦ. 3Г), 1,00 (m.7Н.3Н), 1,53 (с. 3Н), 1,61 (с. 3Н), 1,75 (с. 3Н), 2,15 (с. 3Н), 2,36 (с. 3Н), 3,33 (м. 1Н), 3,98 (д. 10 Гц. 1Н), 4,04 (д. 6Гц. 1Н), 5,5-5,6 (м, 2Н), 6,98 (д. 9 Гц. 2Н) и 7,19 (д. 9. Гц. 2Н), m/z=790 (М+). Из 5-ацетокси Фактор D (776 мг) и п-толилхлортионоформата (0,75 мл) (способ см. пример 7).
(3) 5-Ацетокси, 23-деокси Фактор D (367 мг).
Часть этого образца перекристаллизовали из гексана до получения аналитически чистого вещества с помощью НРLС с температурой плавления 222-2240С []D21+1340 (с.0,9, СНСI3), 245 нм (макс 32400), макс (СНBr3),3550, 3460(Н), 1735 и 1710 см-1 (эфир)  (СДСI3) 0,69 (д, 6 Гц. 3Н), 1,00 (д, 6 Гц. 3Н), 1,00 (m. 7 ГЦ. 3Н), 1,53 (с. 3Н), 1,59 (с. 3Н), 1,76 (с. 3Н), 2,14 (с. 3Н), 3,31 (м. 1Н), 3,44 (д. 10 Гц. 1Н), 4,05 (д. 6 Гц. 1Н) и 5,5-5,6 (м. 2Н), m/z = 624 (М+). Из 5-Ацетокси, 23-н-толилокси–тиокарбонилокси Факор D (582 мг) (способ см. пример 7).
(4) 23-Деокси Фактор D (159 мг).
[]D21 +1230 (с. 0,5, СНСI3), 244,5 нм (макс 28300); макс (СНВr3) 3550 и 3460 (ОН) и 1705 см-1 (эфир),  (СДСI3) 0,69 (д. 6 Гц. 3Н), 1,00 (д. 6 Гц. 3Н), 1,00 (6,7 Гц 3Н), 1,53 (с. 3Н), 1,59 (с. 3Н), 1,87 (с. 3Н), 3,26 (м. 1Н), 3,44 (д. 10 Гц. 1Н), 3,96 (д. 6 Гц. 1Н) и 4,28 (m 6 Гц. 1Н), m/z =582 (М+).
Из 5-ацетокси, 23-дигидро Фактор D (232 мг).
Таблица 1 Пример Соединение Насекомое
ч/млн ч/млн ч/млн

А
Е 23-деокси
Фактор А
Фактор А 10 1 0,1
9 9 3
9 9 9 100 10 1
5 0 -
9 0 - 1000 100 10
0 0 0
9 5 0

Таблица 2
Фактор R R1

A
B
C
D -H
-CH3
-H
-H -CH(CH3)2
-CH3
-CH3
-CH2CH3

1. “Protective groups in Organic Synthesis“ by Theodora W. Oreene, W key – Inter-sciencl, New Jork, 1981.
2. “Protective groups in Organic chemistry by J.F.W. Me Omie Plenum Press. Lon-don, 1973
3. Патент ЮАР № 85/7049, кл. 5 С 07 D 493/22, 1985.