ДИБАФЕРОЛ, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ПРОТИВОМИКРОБНУЮ АКТИВНОСТЬ

Изобретение относится к новым биологически активным химическим веществам, в частности, к синтезу ранее неизвестного соединения гексаквадибазоло-μ-дигидрооксожелезо (II) сульфат (дибаферрол) - [Fe2(Db)2(OH)2(H2O)6]SO4, - который может быть использован в ветеринарии в качестве противомикробного препарата.
Целью изобретения является изыскание новых более эффективных средств, проявляющих противомикробную активность.
Поставленная цель достигается тем, что новый препарат дибаферол синтезируют взаимодействием сульфата железа (II) с дибазолом в сложном растворителе, отличающийся тем, что в новом соединении противомикробная активность усиливается совместным действием дибазольного остатка, ионами сульфата и металла комплексообразователя; улучшается растворимость, производство препарата обходится дешевле.
Исследования показали, что противомикробная активность полученного препарата по сравнению с контролем выше на 25%, а эффективность лечения при желудочно-кишечных заболеваниях животных повышается на 20%.

Изобретение относится к новым биологически активным химическим веществам, в частности, к синтезу ранее неизвестного соединения дибаферрол, графическая формула которого представлена фигурой 1.






Фиг 1. Графическая формула гексааквадибазол-μ-дигидроксожелеза (П) сульфат


Это соединение может быть использовано в ветеринарии в качестве противомикробного препарата, для лечения заболеваний животных, вызываемых эшерихиями коли, сальмонеллами и пастереллами и бруцелла-ми. Химическое название вещества согласно номенклатуре координационных соединений ЮПАК: гексааква-дибазол-μ-дигидроксожелеза (II) сульфат, со следующей общей формулой: [Fe2(Db)2(OH)2(H2O)6]SO4, (1)
В формуле (1) знаком Db обозначен дибазол. Состав синтезированного соединения в общем виде уста-новлен оксредметрическими исследованиями в растворах редокс системы. Теоретический молекулярый вес препарата – 766, экспериментально найденный методом криоскопии - 760, а методом гравиметрии - 770.
Известен гидрохлорид β-N–пиперидилового эфира 3-хлорбензо(6)-тиофен-2-карбатионовой кислоты, общая графическая формула которой представлена фиг. 2 [1].
Недостатком этого соединения (фиг.2), является отсутствие противомикробного действия в отношении пастереллы, плохая растворимость, а также высокая стоимость.
Известны противомикробные бензо-1,2,4-тиразины общая графическая формула которых представлена фиг. 3. Эти соединения (фиг. 3) используются для лечения бактериальных инфекций людей и животных, вызы-ваемых грамположительными микроорганизмами [2].




Фиг. 2. Графическая формула гидрохлорид β-N–пиперидилового эфира 3-хлорбензо(6)-тиофен-2-карбатионовой кислоты.



Фигура 3. Графическая формула бензо-1,2,4-тиразинов.

Известен препарат дибазол (2-бензилбензимидазола гидрохлорид) графическая формула которого пред-ставлена фиг. 4, обладающий противомикробной активностью к патогенным возбудителям желудочно-кишечных болезней [3]. Однако, указанный препарат (фиг. 4) проявляет слабую бактерицидную активность по отношению к эшерихии коли, сальмонелле и пастерелле, имеет плохую
растворимость.



Фигура 4. Графическая формула дибазола (2-бензилбензимидазол гидрохлорид).

Целью изобретения является изыскание новых более эффективных средств, проявляющих противомик-робную активность.
Поставленная цель достигается тем, что новый препарат дибаферрол синтезируется взаимодействием сульфата железа (II) c дибазолом. В новом соединении противомикробная активность усиливается совмест-ным действием дибазольного остатка, ионами сульфата и металла комплексообразователя; улучшается рас-творимость, производство препарата обходится дешевле.
Координационное соединение [Fe2(Db)2(OH)2(H2O)6]SO4 получается при взаимодействии дибазола с сульфатом железа (II) в сложном растворителе, при заданных условиях среды. Ниже приводится методика синтеза биоактивного препарата дибаферрола.
Пример 1. В реакционный сосуд объемом 25 мл высыпают 0,611 гр дибазола гидрохлорида, добавляют 1 мл этилового спирта (96 %), 24 мл дистиллированной воды и 0,695 гр FeSO4.7H2O, непрерывно пропуская через систему газообразный азот. Реакционную смесь нагревают на водяной бане до температуры 90-100 0С в течение трех часов. После охлаждения полученный продукт отфильтровывают на фильтре Шотта, высуши-вают и взвешивают. Выход 85,2 %.
Полученное соединение растворяется в воде, хорошо растворимо в 0,1 н растворе HCl, нерастворимо в органических растворителях.
Пример 2. Исследования по определению токсичности нового соединения проводили в трех сериях на кроликах. В результате опытов установлено, что максимальная переносимая доза (МПД) испытуемого соста-ва для кроликов: ЛД00 - 2000 мг/кг, ЛД50 - 3000мг/кг, ЛД 100 – 8000 мг/кг.
Подкожное и внутривенное введение испытуемого состава кроликам в течении 7 дней в дозе 20 мг/кг жи-вой массы не вызывало никаких отклонений от физиологической нормы. При патологоанатомическом вскры-тии вынуждено убитых животных макроскопических изменений в паренхиматозных органах, мышцах и лим-фатических узлах не регистрировали.
Результаты опытов показали, что разработанное соединение безвредно и относится к нетоксичным пре-паратам.
Пример 3. Противомикробную активность соединения определяли методом серийных разведений по от-ношению к полевым культурам: эшерихии коли, сальмонеллы и пастереллы, - выделенным от больных телят с клиникой диареи. Противомикробную активность состава изучали в сравнению с дибазолом. Опыты прово-дили в трех сериях (табл.1).
Результаты опытов показали, что испытуемое соединение обладает высокой противомикробной актив-ностью в отношении эшерихии коли, сальмонеллы, пастереллы и бруцеллы. Противомикробная активность испытуемого препарата колебалась от 7,8 до 62,5 мкг/мл. Активность его по сравнению с прототипом (диба-золом) была на 25% выше.

Таблица 1

Противомикробная активность препарата дибаферрола в сравни с дибазолом

Препарат (мкг/мл) Эшерихия коли Сальмонелла Пастерелла Бруцелла Контроль культуры
Испытуемое соединение 15,6 15,6 7,8 62,5 +
Дибазол (контроль) 62,5 62,5 31,2 500 +

Примечание:+ рост культуры бактерии без добавления препаратов.


Пример 4. Терапевтическую эффективность испытуемого соединения изучали по сравнению с дибазолом и окситетрациклином на 30 больных телятах с клиникой диареи, вызываемой эшерихией коли и сальмонел-лами. Результаты опытов представлены в табл.2. Из данных таблицы видно, что наилучший терапевтический эффект достигается при применении дибаферрола в дозе 0,5 мг/кг массы тела в течение 7 дней. При этом ле-чебная эффективность достигла 90%, тогда как у контрольной второй и третьей групп эффективность достиг-ла 70%. Результаты опытов показали, что при применении дибаферрола срок лечения по сравнению с извест-ными препаратами сократился на 2-3 дня.


Таблица 2

Эффективность лечения больных телят с клиникой диареи

Группы животных Препараты Кол-во живот-ных (гол.) Из них выздоровило Средний срок лечения (дни)
Голов %
Опытная Дибафер-рол 10 9 90,0 4,0
Контрольная Дибазол 10 7 70,0 7,0
Контрольная Окситетра-циклин 10 7 70,0 6,0

Примечание: Дибаферрол применяли внутрь 2 раза в день в течение 7 дней в дозе 0,5 мг/кг массы тела. Дибазол – внутрь 2 раза в день в течение 7 дней в дозе 0,5 мг/кг массы тела. Окситетрациклин – внутрь 2 раза в день в течение 7 дней в дозе 5 тыс.ед. на кг массы тела.

1. RU 2098421 C1, 10.12.1997
2. US 6043008 A, 28.03.2000
3. EP 0589166 A1, 30.03.1994
4. Samarskii V.A., Kazak L.I., Lunenok-Bumarkina L.I. et. al. «Formation of Dibazole complexes with metal cations». Farmatsevtichnii Zhurnal, Kiev, N 2, 1985