ГЕПАТОЗАЩИТНЫЙ ПРЕПАРАТ.

Изобретение относится к области медицине, в частности к препаратам которые используются для лечения подострого и хронического гепатита.
Препарат состоит из смеси гвоздичного эфир-ного и растительного масел при следующем соот-ношении ингредиентов, масс. %:
гвоздичное эфирное масло - 5-25%.
растительное масло – остальное.

Изобретение относится к области медицине, в частности к препаратам, которые используются для лечения подострого и хронического гепатита.
Прототипом является препарат «Розанол», со следующим процентным соотношением ингридиентов: розовое масло - 34,4 мг и расти-тельное масло – остальное (А.Малеев и др. Розанол. Болгария, София. 1973, стр. 145).
Из-за недостаточности сырья трудно обеспечивать данным препаратом нужды медицины, что не позволяет быть общедоступным населению
Целью изобретения является разработка эффективного препарата на базе доступного сырья, которое позволило бы расширить арсенал и практически обеспечить нужды страны в гепатозащитных средствах.
Поставленная цель достигается тем, что в качестве активного начала берут эфирное гвоздичное масло в смеси с растительным при следующем соотношении ингредиентов, масс. %:
гвоздичное эфирное масло - 5-25%.
растительное масло - остальное.
Средство готовят следующим образом:
В гвоздичное масло добавляют рафинированное растительное масло, затем смесь при комнатной температуре перемешивают методом встряхивания в течении 20-30 мин до получения гомогенной смеси. Для изготовления предложен-ного гепатозащитного препарата (ГЗП) было использовано гвоздичное масло.
Характеристика компонентов
Данное гепатозащитное средство представляет собой подвижную жидкость с запахом эвгенола желтого цвета, легко растворимую в 95% спирте, которое должно храниться в плотно закрытой таре в сухом, прохладном и темном месте. Используемое гвоздичное масло должно соответствовать следующим показателям: плотность - 1,040-1,068; угол вращения от 0° до 13°; показатель преломления - 1,530-1,540. Кроме того 1 мл масла должен растворятся в 2-4 мл 70% спирта с образованием прозрачного раствора.
Количественное определение. Содержание количества компонентов гвоздичного масла определяют методом газожидкостной хромато-графии (ГЖХ) на любом приборе отечественного производства или зарубежной фирмы. В качестве жидкой фазы используют 5% SE-30 (селиконовый эластомер), нанесенный на твердом носителе хроматоне N-AW-DMCS, длина колонки 3-4 м, диаметр 6 мм, температура колонки 130-150°С.
Содержание Эвгенол от 90 до 93 %
Ацетат эвгенола от 15 до 7,5 %
Растительное масло (оливковое, хлопковое, подсолнечное), используемое для изготовления средства должно быть рафинированным.
Как показали эксперименты наиболее оптимальным количеством гвоздичного масла, введенного в средство, является 5-25%. При таком количественном введении гвоздичного масла в смесь сохраняется фармакологическая активность препарата без побочных явлений на организм. При увеличении концентрации гвоздичного масла более 25% приводит к следующим побочным явлениям: жжению, гиперемии слизистых оболочек верхних отделов желудочно-кишечного тракта.
При снижении концентрации гвоздичного масла в смеси менее чем 5% фармакологическая активность настолько не велика, что нет смысла использовать такой препарат. Кроме того в нем повышается концентрация растительного масла, что в последствии приводит к диспепсическим явлениям.
Пример 1: препарат был испытан на белых крысах самцах весом 160-180 г с подострым токсическим поражением печени и был введен внутрижелудочно.
Животные были распределены на следующие группы:
1. Интактные, которым ежедневно в течении 1 мес. внутрь вводилось подсолнечное масло из расчета 2 мл/кг массы.
2. Контрольные, крысы которым через день в течении месяца подкожно вводили CCI4 в дозе 2 мл/кг массы.
3. Опытные животные с подострым токсическим гепатитом, ежедневно получавшие ГЗП в дозе 20 мл/кг массы.
Как видно из представленной таблицы № 1, процент выживаемости в контрольной серии в среднем составлял 66,6%. Из 12 опытных крыс, леченных с помощью ГЗП, выживало 10, что составляет 83,3%.
Антитоксическая функция печени у контрольных, леченных с помощью ГЗП оценивалась по продолжительности барбамилового сна у 32 животных с острым и 36 животных с подострым токсическим поражениями печени.
Как видно из представленной таблицы № 2 у животных с токсическим поражением печени продолжительность сна удлинялась в 2,5 раза, а у крыс с подострым токсическим гепатитом продолжительность барбамилового сна удлинялась в 2,4 раза, что свидетельствовало о тяжелом поражении гепатоцитов.
Под действием ГЗП продолжительность барабамилового сна уменьшалась почти в два раза. Под действием гепатозащитного свойства (статистически достоверно Р 0,001) улучшалась экскреторная функция печени в результате про-веденного лечения ГЗП.
\ О гепатозащитном действии ГЗП судили по характеру его действия на обмен сиаловых кислот в ткани печени у леченных и контрольных животных.
Как видно из представленной таблицы № 3 месячное введение CCI4 уменьшало концентрацию сиаловых кислот до 17,95±0,7 нмоль/л на ткани печени против 46,0±2,43 нмоль/л ткани печени у интактных животных.
У животных, леченных в течении 1 мес. с помощью ГЗП концентрация сиаловых кислот в среднем составляла 39,84±1,36 против 17,9±0,7 нмоль/л ткани печени у нелеченной серии (Р 0,001).
Как видно из таблицы № 4, месячная затравка животных CCI4 способствовала повышению сред-него веса печени и особенно коэффициента веса печени. В среднем коэффициент веса печени у нелеченных животных составлял 0,052±0,0001 против 0,03±0,004 у интактных крыс.
Коэффициент веса печени у крыс с подострым токсическим гепатитом, леченных в течение 1 месяца припомощи ГЗП в среднем был равен 0,033±0,0001% (у интактных 0,03±0,0004).
Результаты морфологического изучения биопсийного материала контрольных и опытных животных с токсическим поражением печени оказались следующими:
1. B срезах печени 6 нелеченных крыс с подострым токсическим гепатитом обнаружены тяжелый некроз гепатоцитов, крупнокапельная жировая дистрофия, резко выраженная гидрофобная дистрофия и геморргии отек в портальном тракте. Полость печеночных синусоидов заполнена эритроцитами и лейкоцитами.
В биопсийном материале печени 8 животных, леченных с помощыо ГЗП, наблюдалось отчетливое предупреждение некроза, жировой и гидроптической дистрофии гепатоцитов и у 5 из 8 случаев только в отдельных полях зрения наблюдалось еще сохранившееся очень мелкое или средне-капельное ожирение гепатоцитов.
Во всех случаях прослеживалось отчетливое проявление, усиление процесса регенерации гепатоцитов. Это проявлялось в увеличении количества полиплоидных двух или многоядерных гепатоцитов.
У животных леченных ГЗП наблюдалось выраженное полнокровие сосудов портального трак-та. Геморрагии отсутствовали. В полости синусоидов в отдельных случаях наблюдались единичные и мелкие капли жира.
У 6 из 8 животных с подострым токсическим гепатитом, леченных карсилом, морфологическая картина биопсийного материала была сходной с результатами исследования животных леченных ГЗП.
Лишь в некоторых случаях наблюдалась крупнокапельная жировая дистрофия гепатоцитов. В двух случаях из 8 наблюдались обширный некроз гепатоцитов, крупнозернистая дистрофия и гидропическая дистрофия гепатоцитоз. Гепатозащитное действие ГЗП на морфологическом уровне проявлялось активно.
Пример 2. С целью выяснения наличия противовоспалительного эффекта ГЗП, эффективность препарата выявлялась на модели формалинового отека лапок у белых крыс.
Эксперименты проводились на 26 белых крысах весом 140-160 г обоего пола. Животные были распределены на следующие группы:
1. Контрольные, которым в подапоневроз правой задней лапки с помощью иглы для внутри-кожных инъекций вводился 0,1 мл 2,5 % раствора формалина.
2. Леченные животные, которым за час до инъекций формалина внутрижелудочно 1 раз в сутки вводился ГЗП в дозе 20 мг/кг массы и так в течении 4 дней.
О противовоспалительном действии ГЗП судили по величине объема воспаленной лапки, который определялся плетизмометрическим методом (исходный объем принят за 100%,а также через 3, 6, 24, 48, 72, 109 часов (4 суток) после инъекций формалина и в процессе лечения препаратами.
Как видно из представленной таблицы № 5 подапоневрозное введение формалина вызывает резкое увеличение объема лапок через 3 часа на 51%, 6 часов – 68%, 24 часа - на 93%. Формалиновый отек стойко держался в течении 4 суток. У животных, леченных с помощью ГЗП на всех сроках исследования наблюдалось статистически достоверное (Р 0,05-0,001) уменьшение формалинового отека лапок.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о наличии активного противовоспалительного эффекта у ГЗП, который достаточно активно проявляется при эксудативной (Р 0,005) и особенно при пролиферативной стадиях воспали-тельного процесса.
ГЗП является малотоксичным и не проявляет токсического действия на деятельность нервной, сердечнососудистой и дыхательной систем.
На основании изложенного и экспериментальных данных подтверждается активный гепатозащитный эффект ГЗП.
Преимущества предложенного препарата заключаются:
- в проявлении более активного печеночно-защитного эффекта;
- в более активном восстановлении антитоксической и экскреторной функции печени;
-в проявлении более активного процесса стимуляции регенерации в печени и уменьшении жировой, a также гидропической дистрофии гепатоцитов;
- в более активной нормализации нарушенного при остром токсическом гепатите обмена сиаловых кислот;
- в проявлении более активного противовоспалительного эффекта.

А.Малеев и др. Розанол. Болгария, София. 1973, стр. 145